Қан сарысуын екі еселеп сұйылту

14 
Қан сарысуы 
0,2 
Физиологиялық ертіндіні 1-ші пробиркаға 0,6 мл ал 
қалғандарына 0,3 мл ден құяды, 1-ші пробиркаға 0,2 мл қан 
сарысуын қосып араластырады да одан 0,3 мл қосындыны 2-ші 
пробиркаға ауыстырады, 2-шіден 3-шіге осылайша соңғы 
пробиркаға дейін құяды, ал соңғысынан 0,3 мл сыртқа төгеді. 
Содан соң дайын сұйылтқан қан сарысуың БР да қолданады. 
2-кесте. 
Вирустың мөлшері тұрақты болғанда вирус 
бейтараптайтын антиденелердің титрін есептеу 
Компоненттері
Қан сарысуының ертіндісі 
Бақылау 
1:4 
1:8 
1:16 
1:32 
1:64 
1:128 вирус Қан 
сарысуы 
Физ.ерт. 
Тексерілетін қан 
сарысуы 
0,2 
0,2 
0,2 
0,2 
0,2 
0,2 
- 
- 
0,4 
Вирус 1000 ЛД
50 
0,2 
0,2 
0,2 
0,2 
0,2 
0,2 
0,4 
- 
- 
Реакция қою әдісі. Сұйылтылған қан сарысуын бос 
пробиркаға 0,2 мл ден алмастырады да барлық пробиркаларға 0,2 
мл вирус (100 ЛД
50 
немесе 1000 ЛД
50
) қосады. Пробиркаларды 
шайқап бөлме температурасында 30 минутқа қалдырады. Содан соң 
осы қосындылармен ақ тышқандарды зақымдайды. 
Қан сарысуының зақымданған тышқандардың 50% вирустың 
ауру туғызуынан сақтап қалатын мөлшерін анықтау. 
3-кесте. Вирус мөлшерін 10 еселеп сұйылту үлгісі 
Компоненттер 
Вирус сұйылту дәрежесі
10
-1 
10
-2 
10
-3 
10
-4 
10
-5 
Физ.ертінді 
0,9 
0,9 
0,9 
0,9 
0,9 
Вирус
0,1 
Вирусты 10
-1 
бастап 10
-5
дейін 10 еселеп сұйылтады. Ол үшін 5 
пробиркаға 0,9 мл физиологиялық ерітінді құяды. Бірінші 
пробиркаға 0,1мл вирус құйып араластырады, одан 0,1 мл екінші 
пробиркаға құяды, екінші пробиркадан 0,1 мл үшінші пробиркаға 
алмастырады т.с.с. соңғы пробиркаға құяды, ал соңғысынан 0,1 мл 
сыртқа төгеді. Содан соң сұйылтылған вируспен БР-сын қояды: 

15 
әрқайсысы 5 пробиркадан тұратын 3 қатарға 0,2 мл вирус 
құйылады. Содан соң бірінші қатарға 0,2 мл ден иммунды қан 
сарысуы, екінші қатарға қалыпты қан сарысуы, ал үшінші қатарға 
физиологиялық ерітінді құйылады. Пробиркаларды шайқап, бөлме 
температурасында 30 минутқа қалдырады. Уақыт өтке соң әр 
пробиркадағы қоспамен 4 тышқаннан зақымдайды. 
4-кесте. Қан сарысуының мөлшері тұрақты болғанда вирустың 
титрін анықтау 
Пробирка 
қатарының 
номері 
Қан 
сарысуы 
(мл) 
Вирус жүзіндісі 
1 
10
-1 
10
-2 
10
-3 
10
-4 
10
-5
Иммунды 
қан 
сарысуы
0,2 
0,2 
0,2 
0,2 
0,2 
2 
Қалыпты 
қан 
сарысуы 
0,2 
0,2 
0,2 
0,2 
0,2 
3 
Физ. 
ертінді 
0,2 
0,2 
0,2 
0,2 
0,2 
Арнамалы бейтараптауды бағалау үшін жануарлардың өлімінің 
нақты себебін алу қажет. БР ның қортындысын бейтарапау 
индексмен (БИ) анықтайды. 

жүктеу/скачать 0.93 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: