М. С. Бактыбаева, Г. Ж. Утеубаева, Э. А. Ахмедьярова
Реакция бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ)
жүктеу/скачать 0.94 Mb. Pdf көрінісі
|
| Реакция бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ) применяется для диагностики гиперчувствительности замедленного типа
препараты (β-лактамные антибиотики, хинолоны, сульфаниламиды и др.), противоэпилептические препараты (ламотригин, карбамазепин, фенобарбитал, фенитоин), местные анестетики и пр.). Этот метод основан наспособности сенсибилизированных лимфоцитов превращаться в лимфобласты под влиянием антигена или неспецифических митогеновinvitro. Имеется много митогенов для лимфоцитов, например: бактериальный липополисахарид и митогенлаконоса (PWM) для B-клеток, фитогемагглютинин (PHA) и конкана-валлин А (ConA) для T-клеток. Гепаринизированная кровь помещается в спе-циальную среду для разделения клеток (например, ficoll-paque) с градиентом плотности 1,077 и центрифугируется (рисунок 2). Лимфоциты помещаются в специальную среду с исследуемым стимулятором и инкубируются в течение 4-5 дней при 37ºC. Затем % лимфобластов может быть учтён при использовании жидкого сцинтилляционного спектрометра по метке 3 H-тимидин или в световом микроскопе (рисунок 3). Рисунок2 – Проба реакции бласттрансформации лимфоцитов Рисунок3 – Реакция бласттрансформации лимфоцитов Отрицательный результат теста invitro не исключает возможности развития аллергической реакции в последующем. Иммунологические лабораторные методы, перечисленные выше, такие как тест высвобождения гистамина из базофилов (под влиянием диагностируемого лекарственного средства), тест активации базофилов, тест высвобождения цистеиновых лейкотриенов, тесты активации лимфоцитов, реакции бласттрансформации лимфоцитов, в отдельных случаях могут быть весьма полезны, однако в повседневной клинической практике в настоящее время они практически не используются, так как пока недостаточно стандартизованы для диагностики лекарственной аллергии [34]. Информативность многих из них убедительно не доказана и дальнейшее развитие требует значительных финансовых затрат. Следует подчеркнуть, что окончательно подтвердить или исключить наличие гиперчувствительности к тем или иным лекарственным средствам только на основе тестов in vitro в настоящее время не представляется возможным. Результаты тестов должны быть интерпретированы в совокупности с данными анамнеза и клиническими показателями [35]. Последние достижения в области генетики выявили ряд HLA-аллелей, связанных с формированием гиперчувствительных лекарственных реакций, преимущественно влияющих на кожу. Например, выявленные ассоциации между гиперчувствительностью к абакавиру и HLA-B*57:01, а также между карбамазепин-индуцированным синдромом Стивенса– Джонсона и HLA-B*15:02 реализованы в клинической практике — разработаны тест-системы для выявления предрасположенных лиц, что позволяет реализовать в их отношении профилактику лекарственной аллергии к карбамазепинам (ограничение их применения) [36]. жүктеу/скачать 0.94 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|