Литература
Токсикологическая химия: метаболизм и анализ токсикантов: учебное пособие + СD/ под ред. Н.И. Калетиной. – М., 2008. – 1016 с. Переплет.
Токсикологическая химия: учебник / под ред. Т.В. Плетеневой. – 2-ое изд. – М., 2008. – 512 с. Переплет.
Лужников Е.А. Клиническая токсикология. -М.,"Медицина", 1994. –189с.
Контрольные вопросы
Вредные пары и газы. Оксид углерода.
Распространенность отравлений, причины. Токсичность.
Токсикокинетика.
Клиника отравлений и клиническая диагностика.
Метод гипербарической оксигенации в комплексе методов дезинтоксикационной терапии.
Качественный анализ. Химические экспресс-методы обнаружения в крови карбоксигемоглобина.
МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ ПОД РУКОВОДСТВОМ ПРЕПОДАВАТЕЛЯ
Тема 2 – Принцип химического метода анализа карбоксигемоглобина.
Цель: Ознакомление студентов с химическими метода анализа карбоксигемоглобина.
Задачи обучения: сформировать у студентов знания по методам химического анализа карбоксигемоглобина.
Форма проведения: групповое обсуждение с презентацией, обсуждение результатов проведения индивидуальных занятий
Задания по теме – презентация химических методов анализа карбоксигемоглобина
1. Методы определения оксида углерода (II) в биообъектах.
2. Определение СО в крови
Раздаточный материал
Методы определения оксида углерода (II) в биообъектах
Определение СО в крови
Для определения СО в крови можно использовать различные методы, включая предварительные пробы, спектрофотометрию, газовую хроматографию и специальные методы. Определение СО в крови проводят либо по СО, либо выделяют из пробы крови газобразную смесь СО, СО,. О,, N.. измеряют количество газа и тем или иным способом устанавливают содержание в нем оксида углерода (II).
Предварительные методы исследования (химические). При выполнении нижеуказанных реакций параллельно исследуют два образца — кровь, не содержащую НЬСО и кровь пострадавшего при отравлении. В образцы добавляют одинаковые объемы реактивов и наблюдают за изменением окраски. Изменение окраски происходит только в образцах с нормальной кровью. Окраска образцов крови пострадавшего при отравлении не изменяется или изменяется незначительно.
Экспресс-тесты, или пробы, проводят непосредственно на месте происшествия или сразу после поступления пострадавшего в клинику. Цель — быстро установить наличие НЬСО.
Тест /. К 15 мл воды добавляют 1—2 капли исследуемой крови и отдельно донорскую кровь, пробирки встряхивают. В норме проба светло-розового цвета, при наличии НЬСО — вишнево-красного. Затем добавляют 5 капель 20% раствора гидроксида натрия. После энергичного встряхивания при наличии НЬСО в течение нескольких секунд сохраняется светло-розовый цвет (концентрация НЬСО не менее 20%). Если светло-розовый цвет перейдет в соломенно-желтый, в крови нет НЬСО или его содержится менее 20%. Проводят контрольную пробу с донорской кровью.
Тест 2. В две пробирки вносят по 10 мл дистиллированной воды, затем в первую — 5 капель анализируемой пробы (кровь) и 5 капель свежеприготовленного раствора сульфида аммония, во вторую — 5 капель донорской крови и 5 капель свежеприготовленного раствора сульфида аммония. После осторожного перемешивания добавляют в обе пробирки по 2—3 капли 30% раствора уксусной кислоты. Анализируемая проба при наличии НЬСО окрашивается в красный цвет, контрольная проба (донорская) — в грязно-зеленый.
Тест 3. К 5 мл крови (анализируемой пробы и донорской), разбавленной в 100 раз дистиллированной водой, добавляют 5 капель концентрированного раствора сульфида меди. Длительно и энергично встряхивают. Кровь, содержащая НЬСО. красного цвета, не содержащая — зеленого.
Тест 4. К 1 капле крови (анализируемой пробы и донорской) добавляют 40 капель воды и 5 капель 40% раствора фенилгидразина. Кровь, содержащая НЬСО. светло-красная, не содержащая НЬСО — темно- или черно-красная.
Тест 5. К 5 мл крови (анализируемой пробы и донорской), разведенной 100 раз добавляют 5 капель 1% раствора гексаиианоферрата (III) калия. Кровь, содержащая НЬСО, вишневого цвета, не содержащая — светло-коричневого (железо гемоглобина окисляется до Ре").
Другие химические пробы. Исследуемую кровь и контрольную кровь из печени животного в количестве 2—5 мл разбавляют 100 мл воды. При этом кровь, содержащая НЬСО. имеет ярко-красный цвет, контрольная кровь — буроватый оттенок.
Затем проводят следующие химические реакции.
• К разбавленным в соотношении 1:100 пробам испытуемой и контрольной крови прибавляют равные объемы 30% раствора гидроксида натрия. Кровь, содержащая оксид углерода, сохраняет розовую окраску, контрольная принимает зеленовато-черную окраску.
• К разбавленным в соотношении 1:4 пробам испытуемой и контрольной крови прибавляют приблизительно по 3 объема 1% раствора танина и взбалтывают. Кровь, содержащая оксид углерода, сохраняет розовый цвет; контрольная принимает серую окраску.
• К разбавленным в соотношении 1:20 пробам испытуемой и контрольной крови прибавляют равные объемы 20% раствора гексанианоферрата (III) калия и 2 мл разведенной 1:2 уксусной кислоты. Кровь, содержащая оксид углерода, сохраняет розовый цвет, контрольная приобретает бурую окраску.
• Контрольная кровь, смешанная с 5 частями раствора основного ацетата свинца, принимает грязно-зеленую окраску, кровь, содержащая оксид углерода, сохраняет свой цвет.
• Контрольная кровь после разбавления формалином спустя короткое время принимает грязно-бурую окраску, кровь, содержащая оксид углерода, сохраняет красный цвет в течение нескольких недель.
Реакции можно проводить, смочив разведенной кровью белую фильтровальную бумагу, нанося затем на нее реактивы. Описанные реакции малопригодны для обнаружения малых количеств НbСО в крови.
Достарыңызбен бөлісу: |