Материалы и методы В работе были использованы генотипы риса
с окрашенным перикарпом: Черный рис,F
1
♀Рубин × ♂ВНИИР 10178. При
предварительном проращивании перед посевом
у данных образцовлабораторная и полевая
всхожесть была нулевая.
Для восстановления всхожести семена риса
подвергали стрессовым воздействиям низкой
температурой. Зерновки риса помещали в
криопробирки и погружали в жидкий азот (ЖА)
на 1 час. В качестве контроля использовали
семена, не подвергнутые стрессу.
После
замораживания
в
ЖА
для
проращивания
invitroзерновки
риса
стерилизовали 75% раствором белизны, 1%
деохлором и 3% раствором TWEEN 20
(экспозиция 20 мин.). После стерилизации для
выявления
скрытой
инфекции
зерновки
культивировали
на
провокационной
питательной
средеVISSв
состав
которой
входит: сахароза 10 г/л; гидролизат казеина 8
г/л; дрожжевой экстракт 4,0 г/л; КН
2
РО
4
– 2,0
г/л; МgSO
4
·7H
2
O – 0,15 г/л; джелрайт 6,0 г/л;
рН 6,9.
После подбора оптимальных условий
стерилизации
для
проращивания
семян,
использовали 2 варианта питательной среды:
МС без гормонов; МС, БАП-2,0 мг/л, НУК-0,5
мг/л, ГК-5,0 мг/л.Семена культивировали в
светокультуральном помещении в чашках
Петри при температуре 24°С и 16-часовом
фотопериоде. В дальнейшем полученные
регенеранты
пересаживали
в
почвенно-
торфянную смесь и выращивали до получения
зерновок.
Результаты и их обсуждение В
результате
исследований
было
выявлено,наиболее
оптимальным
стерилизующим агентом является 75% раствор
белизны и 3% раствор TWEEN 20 (экспозиция
20 мин.). Заражаемость при обоих вариантах
составила -10%, по сравнению с 1% раствором
деохлора в течение 20 мин. при котором
заражаемость достигала до 70 % (таблица 1).
Проверка на провокационной среде VISS,
показала
эффективность
полученных
результатов по стерилизации зерновок риса.
На
всхожесть семян черного риса положительно
влияет замораживание в жидком азоте, при
этом всхожесть семянпосле ЖА и в
дальнейшем проращиваний на среде МС: 2,0
мг/л БАП, 0,5 мг/л НУК и 5,0 мг/л ГК составила
30,0% (таблица 2).