Селекция. А. Б. Рысбекова, Т. Т. Турдиев, Д. Т. Казкеев, Е. А. Жанбырбаев, Б. Н. Усенбеков, И. А. Сартбаева, Б. И. Мошан
жүктеу/скачать 2.72 Mb. Pdf көрінісі
|
| Материалы и методы
В эксперименте использовали гибридную комбинацию: F 2 ♀Виола х ♂Акдала, F 2 ♀Виола х ♂Баканасский, F 3 ♀Виола х ♂Баканасский. Наиболее подходящая фаза получения гаплоидов андрогенезом является одноядерная стадия микроспор. Морфологический данная стадия соответствует фазе трубкования. Метелки гибрида срезали в фазе трубкования и подвергали холодовой обработке в течение 4-7 суток в холодильнике при температуре +4 0 С. Для индукции эмбриоидов и каллусов использовали питательную среду N6 с добавлением 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты (2,4-Д) [5]. Для получения регенерантов из каллусов использовали регенерационную питательную среду Мурасиге и Скуга (МС) с добавлением гормонов: бензиламинопурина (5 мг/л), индолил-3- уксусной (1,0 мг/л), а также органических веществ: глутамин (500мг/л), гидролизат казеина (500 мг/л) [6]. На 20-30 сутки наблюдали появление зеленых растении регенерантов. Для увеличения количества регенерантов проводили клональное размножение in vitro. С этой целью растения регенеранты с хорошей кустистостью разделяли на отдельные побеги и культивировали изолированно на регенерационной среде МС. Часть регенерантов которые, не имели корневую систему, культивировали на среде для ризогенеза [7]. Данная среда содержит половинный набор базовый среды МС с добавлением 1,0 мг/л ИУК, 30,0 г /л сахарозы, 7,0 г/л агара. Далее, растения регенеранты с хорошо развитой корневой системой отмывали от питательной среды и помещали в сосуды с водопроводной водой на трое суток для адаптации с in vitro в in vivo. После адаптации, растения переводили в вегетационные сосуды с почвенно-торфяной смесью. жүктеу/скачать 2.72 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|