Занятие. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ВОСПРОИЗВЕДЕНИЕ И ИЗУЧЕНИЕ ПАТОГЕНЕЗА НЕФРОТИЧЕСКОГО И УРЕМИЧЕСКОГО СИНДРОМОВ
Цель занятия: изучить нарушение очистительной функции почек при экспериментальном нефро-тическом синдроме и патогенез уремии
Опыт 1. Определение очистительной функции почек при экспериментальном нефротическом синдроме
У кролика (самки) вызывают развитие нефротического синдрома. Для этого дважды (за 7 и 8 дней до исследования) ей подкожно вводят азотнокислый уранил из расчета 0,4-0,5 мг/кг веса животного. Перед занятием кролика катетеризируют, вводя катетер в мочевой пузырь, и выпускают мочу в стеклянный сосуд. Из краевой вены уха шприцом, промытым гепарином берут 2,5 мл крови, переносят ее в пробирку, содержащую 0,25 мл 0,5% раствора цитрата натрия. Не вынимая иглы, в вену вводят подогретый до 37 °С 50% раствор гипосульфита натрия из расчета 1 мл/кг веса. Через I час у животного вновь выпускают мочу в мерный сосуд и рассчитывают минутный диурез (мин Д). Одновременно из вены берут 2,5 мл крови и переносят ее в пробирку с 0,25 мл 0,5% раствора цитрата натрия. В моче и плазме определяют концентрацию гипосульфита. Для этого кровь, взятую до (холостая проба) и после введения гипосульфита центрифугируют 10-15 мин при 9000 об в мин., по 1,0 мл плазмы переносят в пробирки, куда прибавляют по 1,0 мл 10% раствора трихлоруксусной кислоты (ТХУ) для осаждения белка. Пробирки взбалтывают 2-3 мин и центрифугируют 5-10 мин при 2000 об/мин. Центрифугаты по 1 мл переносят в отдельные пробирки, добавляют по 1 капле 1 % раствора крахмала и титруют N/200 раствором йода (1 мл эквивалентен 0,00012411 г гипосульфита) до появления сине-голубого окрашивания.
Из порций мочи, взятой до и после введения гипосульфита отдельными микрогошетками набирают по 0,1 мл, переносят их в пробирки, добавляют по 1-2 капле 1% раствора крахмала, титруют N/200 раствора иода (1 мл эквивалентен 0,0012411 г гипосульфита) до появления сине-голубого окрашивания.
Достарыңызбен бөлісу: |
