Современные биотехнологические процессы и иммунологические методы при промышленном производстве ветеринарных препаратов 03. 00. 23 биотехнология



бет4/6
Дата25.06.2016
өлшемі370 Kb.
#156894
түріАвтореферат
1   2   3   4   5   6

Таблица 10

Результаты активности гипериммунных сывороток

Вид животных

Кол-во голов

Антигены

Гипериммунные сыворотки

Опр. активность

Методы

КРС

5

Вирусов ИРТ

25600+6000

ИФА

КРС

5

ПГ-3

1:12800+2000

ИФА

Овцы

63

Бешенство

1:480+7

РСК

КРС

5

РС

1:12800+2000

ИФА

КРС*

5

Ящура тип А22

3,2+0,1 lg

РН

Овцы

45

хламидиоза

1:256-1:1024

РСК


Примечание:*- с вирусом ящура изучали иммуногенную активность вакцин с масляным адъювантом при ревакцинации животных.

Полученные данные позволили получать высокоэффективные специфические гипериммунные сыворотки для изготовления диагностикумов с использованием отобранных адъювантов на разных видах животных без заметных клинических изменений.



2.2.12. Способы получения лечебной ассоциированной гипериммуной сыворотки против пастереллеза, гемофилеза и стрептококкоза свиней с использованием различных видов животных

В последние ноды за рубежом изготавливается целый ряд вакцинных и сывороточных препаратов против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза, в том числе и ассоциированных.

В нашей стране сывороточные препараты против гемофилеза, пастереллеза и стрептококкоза не разработаны.

Значительный экономический ущерб, наносимый свиноводству гемофилезом, пастереллезом и стрептококкозом, и отсутствие эффективных специфических средств лечения и профилактики этих заболеваний послужило основанием для выполнения работы по разработке нового препарата – гипериммунной сыворотки против гемофилеза, пастереллеза и стрептококкоза свиней.

Исследования по отработке схемы гипериммунизации и получению опытных партий сывороток против гемофилеза, пастереллеза и стрептококкоза свиней проводили на Армавирской биофабрике.

Для этого были сформированы пять групп свиней по пять голов в каждой.

Гипериммунизацию свиней проводили путем внутримышечных инъекций возрастающих доз инактивированных концентрированных гемофилезного, пастереллезного и стрептококкозного антигенов с интервалом в 2-3 дня. При этом антигены вводили раздельно в разные участки тела животного. Через 7-10 дней у свиней брали кровь, получали сыворотку и определяли ее активность в реакции агглютинации (РА). Были испытаны пять схем, отличающихся дозой антигенов и количеством инъекций (таблица 13).

Как показывает таблица 11 (схема 1) гипериммунизация свиней путем 10-ти внутримышечных инъекций в возрастающих дозах инактивированного концентрированного пастереллезного и гемофиллезного антигенов в общем количестве по 1000 млрд. микробных тел (м.т.) каждого антигена, стрептококкового – в общей дозе 1255 млрд.м.т. позволяет получить сыворотку с титрами антител в РА: к P. multocida A, D – 1:400, B – 1:800, к H. pleuropneumoniae 5870 – 1:320, ГУ – 19 – 1:640, к Str. suis Касли – 1:200.

Увеличение числа инъекций больше 10-ти и количества антигенов пастереллезного и гемофилезного больше 1000 млрд.м.т., стрептококкового больше 1255 млрд.м.т. (схема 2, 3) не привело к дольнейшему повышению титра антител сыворотки в РА.

Увеличение количества антигенов и числа инъекций нецелесообразно, так как оказывает дополнительную нагрузку на иммунную систему продуцентов и не выгодна с экономической точки зрения.



Таблица 11


Активность в РА сывороток против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза свиней, полученных разными способами




Схема

1

2

3

4

5

1

2

3

4

5

6

Количество инъекций

10

11

12

8

7

Количество (млрд.микробных тел)

Пастереллы

Гемофилы

Стрептококки


1000


1000

1255

1220

1220


1475

1470


1470

1725

645

800


1000

510


700

800


1

2

3

4

5

6

Активность сыворотки в РА

P. multocida A

В

D

H. pleuropneumoniae 5870



ГУ-19

Str. suis Касли


1:400


1:800

1:400


1:320

1:640


1:200

1:400


1:800

1:400


1:320

1:640


1:200

1:400


1:800

1:400


1:320

1:640


1:200

1:400


1:800

1:400


1:320

1:640


1:200

1:200


1:400

1:200


1:160

1:160


1:100

Уменьшение числа инъекций до 8-ми (схема 4) при уменьшении общего количества вводимых антигенов: пастереллезного до 645 млрд.м.т., гемофилезного – до 800 млрд.м.т., стрептококкового – до 1000 млрд.м.т., не привело к снижению титра антител в сыворотке.

Уменьшение числа инъекций до 7-ми (схема 5) при уменьшении общего количества вводимых антигенов пастереллезного – до 510 млрд.м.т., гемофилезного – до 700 млрд.м.т., стрептококкового – до 800 млрд.м.т. привело к снижению титров антител в полученной сыворотке в 2 раза.

Таким образом, сравнительная оценка 5-ти схем гипериммунизации свиней для получения сыворотки против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза свиней позволило предложить схему гипериммунизации путем 8-10-ти инъекций антигенов в общей дозе пастереллезного – 645-1000 млрд.м.т., гемофилезного – до 800-1000 млрд.м.т. и стрептококкового – 1000-1255 млрд.м.т. с интервалом в 2-3 дня. В виду разной реактивности продуцентов целесообразно проводить гипериммунизацию по циклам: 1-й цикл - 8 инъекций, 2-й цикл – 2 инъекции. Животных, давших активную сыворотку после 1-го цикла, переводят в эксплуатационную группу, остальных подвергают второму циклу гипериммунизации, что экономически оправдано.

Предложенный способ апробирован с положительными результатами в производственных условиях на Армавирской биофабрике.

Разработку способа получения гипериммунной сыворотки против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза свиней, включающего приготовление антигена из инактивированных и концентрированных культур Pasterella multocida серовариантов А, В и Д и Haemophilus pleuropneumoniae сероваров I и II, Streptococcus suis серовара II (штамм Касли), грундиммунизацию и гипериммунизацию возрастающими дозами антигена с последующим крововзятием и выделением целевого продукта, отличающегося тем, что в качестве продуцентов использовали волов, при этом гипериммунизацию проводили 7-10-кратными внутримышечными инъекциями в общей дозе каждого антигена 1800-2400 миллиардов микробных тел с интервалом 2-3 дня, а грундиммунизацию осуществляют подкожно в разные участки тела двукратно сначала по 10-15 млрд микр. тел, а через 14 дней по 20-25 млрд микр. тел с добавлением 10 см3 гидроокиси алюминия. Промышленные серии лечебных сывороток на волах имели следующую активность, гарантирующую высокую лечебную эффективность.

Титры антител зависели от антигена и индивидуальных особенностей продуцентов. Средние титры антител в РА в отношении H. Pleuropneumoniae (шт. 5870 и ГУ-19) и Str. suis (Касли) составили 1:474 (1:80-1:640); 1:640 (1:320-1:1280) и 1:200 (1:100-1:400), соответственно.

Наибольший титр в РПГА наблюдался в сыворотках в отношении П. мультоцида серовариантв В 1:700 (1:320-1:1600). Титры антител в отношении П. мультоцида серовариантоа А и Д были 1:130 (1:40-1:256) и 1:139 (1:64-1:240), соответственно.

В процессе эксплуатации 10 продуцентов было получено 3 сыворотки-сырца, которые были объеденены в одну опытную серию объемом 75 л.

В таблице 12 представлены титры антител в РА и РПГА опытной серии сыворотки в сравнении с показателями ТУ.



Достарыңызбен бөлісу:
1   2   3   4   5   6




©dereksiz.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет