В ходе изучения темы «Медицинкая микология» студенты должны уметь:
Необходимые умения | | Микроскопическая диагностика микозов. | | Посев материала на среду Сабуро | | Идентификация грибов - по биохимической активности - органам плодоношения. | |
Занятие № 14-16 Дата____________
Тема: сАНИТАРНАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ
Цель: Изучить основные санитарно-показательные микроорганизмы, номенклатуру санитарно-бактериологических исследований и методы современной лабораторной диагностики.
Мотивация: освоение студентами учебного материала по данной теме необходимо для знания характеристики санитарно-показательных микроорганизмов, умения проводить санитарно-бактериологические исследования и оценивать результаты.
Основные вопросы, разбираемые на занятии:
-
Понятие о санитарно-показательных микроорганизмах. Критерии оценки санитарного состояния объектов по микробиологическим показателям (СаН ПиН и ГОСТ).
-
Методы санитарно-бактериологического исследования воды. Критерии оценки.
-
Методы санитарного контроля загрязнения микроорганизмами воздуха. Критерии оценки.
-
Методы санитарно-бактериологического контроля обсеменности предметов, оборудования, спец. одежды и рук персонала.
-
Методы бактериологического контроля стерильности, бактериологического загрязнения лекарств.
-
Методика исследования пищевых продуктов. Критерии оценки.
Санитарная микробиология- ___________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
Санитарно-показательные микроорганизмы (СПМ)______________________
_____________________________________________________________________________
Группы санитарно-показательных микроорганизмов.
Группа
|
Показатель
|
Представитель
|
1 группа
|
Фекального загрязнения
|
1.______________________________________________
2.______________________________________________
3.______________________________________________
4.______________________________________________
5.______________________________________________
|
2 группа
|
Воздушно-капельного загрязнения
|
1.______________________________________________
2.______________________________________________
|
Основные требования, предъявляемые к санитарно-показательным микрорганизмам:
1. ___________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
2. ___________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
3. ___________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
5. ___________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
6. ___________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
7. ___________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
8. ___________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
9. ___________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
10.___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________
Основные показатели:
1) Общее микробное число (ОМЧ). ______________________________________________
_____________________________________________________________________________
2) Содержание СПМ выражают в титрах и индексах.
Титр СПМ – _________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
Индекс СПМ – ________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
Номенклатура
№
|
Объекты
|
Показатели
|
1
|
Воздух:
-операционных
-родильных палат
-предродовые
-палаты новорожденных
|
|
2
|
Вода:
-водоисточников
-питьевая
-пляжи, бассейны
-сточные воды
|
|
3
|
Контроль микробной обсеменности:
- кожа рук
- оборудование и инвентарь больниц, детских учреждений, предприятий торговли и общественного питания
|
|
4
|
Пищевые продукты:
- в плановом порядке: каждая выпускаемая партия продуктов на всех предприятиях пищевой промышле-нности, магазинах и учреждениях общественного питания.
- при подозрении на пищевые отравления
|
|
5
|
Аптеки:
-растворы для инъекций
-глазные капли
-дистиллированная вода после перегонки
|
|
6
|
Контроль стерильности
|
|
7
|
Продукция молочных кухонь
|
|
протокол лабораторной работы (протокол заполняется на занятиях № 14-16).
Работа №1.
СХЕМА САНИТАРНО-БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ВОЗДУХА
Метод исследования: седиментационный, аспирационный.
Определяемые показатели: ОМЧ, S. aureus, грибы.
Ход исследования:
1 день: Отбор проб воздуха на чашки с твердым агаром
Место отбора воздуха:__________________________________________________________
Метод исследования:___________________________________________________________
Питательная среда
|
Показатель
|
Экспозиция
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
После экспозиции чашки подписывают и ставят в термостат. Инкубация в термостате при __°С 24 часа.
2 день:
1. Учет результатов:
Питательная среда
|
Характер колоний
|
Количество колоний
|
МПА
|
Общее количество колоний
|
|
ЖСА
|
Колонии желтого цвета с опалесценцией вокруг
|
|
Среда Сабуро
|
Колонии дрожевых грибов
|
|
Колонии плесневых грибов
|
|
2. Вычисление ОМЧ воздуха по таблице.
В зависимости от диаметра и площади чашек Петри были рассчитаны постоянные множители, на которые надо умножать число колоний, выросших на данной чашке.
Диаметр
чашки в см
|
Площадь
чашки в см
|
Множитель расчета числа микробов в 1 м3
|
8
|
50
|
100
|
9
|
63
|
80
|
10
|
78
|
60
|
11
|
95
|
50
|
12
|
113
|
45
|
Нормативы:
ОМЧ бытовых помещений – до 2000 КОЕ/м3.
Золотистый стафилококк – до 10, грибы – не нормируются
Результат:
ОМЧ__________ количество колоний золотистого стафилококка________, грибов_______
Вывод: при санитарно-бактериологическом исследовании воздуха в помещении_________
ОМЧ___________________, (не) выявлен золотистый стафилококк, что свидетельствует о (не) благоприятном санитарном состоянии.
Работа №2.
СХЕМА САНИТАРНО-БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО КОНТРОЛЯ МИКРОБНОЙ ОБСЕМЕННОСТИ ОБЪЕКТОВ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ
Метод исследования: (смывов, контактный при использовании бакпечатки).
Определяемые показатели: фекальное загрязнение (БГКП)
воздушно-капельное загрязнение (S. aureus.)
Ход исследования:
1 день:
Материал взят методом_________________________________________________________
С поверхности_________________________________________________________________
Произведен посев на среду Эйкмана - для определения ___________________ загрязнения,
на ЖСА- для определение____________________________________________ загрязнения.
Инкубация в термостате при __°С 24 часа.
2 день:
Учет роста:
|
Среда Эйкмана
|
Среда ЖСА (МСА)
|
Характер роста
|
|
|
Пересев на
|
|
|
Инкубация в термостате при __°С 24 часа.
3 день: Учет результатов:
|
Среда Эндо
|
МПА
|
Характер роста
|
|
|
Морфология
|
|
|
Окраска по Граму
|
|
|
Для идентификации пересев на
|
|
|
Инкубация в термостате при __°С 24 часа.
4 день: Учет результатов:
1.____________________________________________________________________________
2.____________________________________________________________________________
Результат: ____________________________________________________________________
Вывод: при контроле микробной обсемененности на________________________________
___ обнаружено фекальное загрязнение, ___ обнаружено воздушно- капельное загрязнение, что свидетельствует о (не) благоприятном санитарном состоянии.
Работа № 3.
СХЕМА САНИТАРНО-БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО КОНТРОЛЯ СТЕРИЛЬНОСТИ
Метод исследования: погружения, смывов.
Определяемые показатели: наличие аэробных и анаэробных микроорганизмов, грибов.
Ход исследования:
1 день: Отбор проб
Объект исследования:__________________________________________________________
Питательная среда
|
Показатель
|
Период экспозиции
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Инкубация в термостате при __°С 24 часа.
2 день:
Учет результатов:
Питательная среда
|
Наличие роста
|
Пересев
|
Сахарный бульон
|
|
|
Тиогликолевая среда
|
|
|
Бульон Сабуро
|
|
|
Результат: ________________________________________________________________
Вывод: при санитарно-бактериологическом контроле стерильности______________________, _______________________рост микроорганизмов (не) выявлен, что свидетельствует ______________________________________________.
Работа № 4.
СХЕМА САНИТАРНО-БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ВОДЫ БРОДИЛЬНЫМ МЕТОДОМ
Определяемые показатели: определение титра и индекса БГКП.
Отбор проб: (методика отбора проб водопроводной воды) ________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
Ход исследования питьевой воды по ГОСТу Р 5159.3-2000
Ход
исследования
|
Засеваемые объемы, мл
|
100
|
100
|
10
|
10
|
10
|
10
|
10
|
10
|
10
|
10
|
10
|
10
|
1 день:
Посев на среду Эйкмана 300 мл исследуемой воды.
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
2 день:
I. Учет роста в каждой пробе
Характер роста
Выделение газа
II. Пересев на среду Эндо по секторам
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
3 день:
Учет роста.
Отобрать лактозо-позитивные колонии, готовить мазки и окраска по Граму. При наличии Гр- палочек определяют коли-титр по таблице (см. приложение № 2).
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Результат: Титр БГКП __________________ индекс БГКП_________________________
Вывод: при санитарно-бактериологическом исследовании ____________________воды
титр БГКП ________ индекс БГКП___________, что _____________________________
__________________________________________________________________________
Работа № 5.
СХЕМА САНИТАРНО-БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ПРОДУКЦИИ МОЛОЧНЫХ КУХОНЬ
Определяемые показатели: определение ОМЧ, титра БГКП.
Правило взятия пробы: молоко тщательно перемешивают и в количестве 50-100 мл отбирают в стерильную колбу.__________________________________________________
Ход исследования:
1. Определение ОКБ:
-
Произвести разведения исследуемого молока 1/10 (0,5 мл молока развести в 4,5 мл физ. раствора) и 1/100 (0,5 мл разведения молока 1/10 развести в 4,5 мл физ. раствора)
-
Поместить по 0,1 мл из разведений продукта 1:10 и 1:100 соответственно в чашки Петри и залить 10 мл расплавленного МПА, охлажденного до 45º С. Посев тщательно перемешать до застывания агара путем вращения или покачивания чашки.
-
Посевы подписывают и инкубируют 48 часов при 37º С.
-
Подсчет ОМЧ
2. Определение коли-титра:
1. произвести посев в соответствии со схемой:
Основные этапы исследования
|
Засеваемые объемы, мл.
|
10 мл
|
1 мл
|
1 мл 1/10
|
1 мл 1/100
|
1 день.
Посев на среду Кесслера. Инкубация при 43º С.
|
|
|
|
|
2 день.
Учет результатов.
Пересев на среду Эндо по секторам.
|
|
|
|
|
3 день.
Учет результатов. Мазок по Граму.
Пересев: лактозопозитивных колоний на среду Клиглера
Инкубация посевов при 37º С. в течении 24 часов.
|
|
|
|
|
4 день.
Учет результатов. Дальнейшая идентификация по ферментативной активности и антигенной структуре.
|
|
|
|
|
2.Определить титр исследованного молока. Величина титра БГКП определяется по специальной таблице (см. приложение № 2).
Вывод: при санитарно-бактериологическом исследовании _____________________молока ОМЧ бактерий составил___________________, титр БГКП_________________________, что свидетельствует о (не) доброкачественности молока.
Достарыңызбен бөлісу: |