Тема: Основы рационального питания
жүктеу/скачать 1.35 Mb. Pdf көрінісі
|
- Бұл бет үшін навигация:
- Изолирование производных 1,4-бензодиазепина из биологического материала
| Таблица 18.
Значения R f некоторых производных 1,4-бензодиазепина в общих и частных системах Вещество Общие системы Частные системы хлорофор м - ацетон (8:2) этилацета т хлорофор м - метанол (9:1) этилацета т -метанол - аммиак (85:10:5) метано л Хлордиазепоси д 0,62 0,00 0,50 0,10 0,51 Диазепам 0,75 0,23 0,73 0,58 0,77 Нитразепам 0,72 0,00 0,53 0,35 0,60 Оксазепам 0,56 0,00 0,40 0,22 - Проявление осуществляют следующими реактивами: 1) обработка реактивом Драгендорфа – оранжевые или желто-оранжевые пятна; 2) обработка реактивом FPN (железа хлорид (III) в смеси с хлорной и азотной кислотами) – происходит окисление 1,4-бензодиазепинов с образованием желтых пятен; 3) обработка реактивом Марки – пятна желтого цвета; 4) обработка подкисленным раствором иодплатината – темноокрашенные пятна. Изолирование производных 1,4-бензодиазепина из биологического материала. При исследовании на производные 1,4-бензодиазепина по продуктам гидролиза пробоподготовка включает стадии гидролиза и последующей ЖЖЭ. Гидролиз объектов (мочи, крови, гомогенаты внутренних органов и экстракты из них) осуществляют 6 М раствором соляной кислоты при температуре 140-145 0 С. Время гидролиза определяется характером объекта: кровь – 20 мин, печень и почки – 60 мин, желудок и кишечник – 80-90 мин. Аминобензофеноны из гидролизатов экстрагируют органическими растворителями после подщелачивания до значений рН 6,0-9,5. В случае 71 исследования внутренних органов экстракцию проводят после отделения гидролизата путем центрифугирования при 9000 об/мин. В качестве экстрагентов используют: для гидролизатов крови и мочи – н-гептан, дихлорметан, хлороформ, смеси: диэтилового эфира - дихлорметаном (1:1), н- гексан - дихлорметан - изопропанол (40:60:2); для гидролизатов внутренних органов – хлороформ - изоамиловый спирт (100:1). Таким образом, методика изолирования производных 1,4-бензодиазепина при исследовании по продуктам гидролиза включает следующие стадии: 1) Кислотный гидролиз; 2) Центрифугирование для отделения гидролизата (при необходимости); 3) Подщелачивание до рН 6,0-9,5; 4) Экстракция анализируемого вещества методами ЖЖЭ или ТФЭ; 5) Упаривание. При необходимости для некоторых производных 1,4-бензодиазепина проводят дериватизацию. При проведении анализа на производные 1,4-бензодиазепина по нативным соединениям и их метаболитам объекты по возможности быстро должны быть направлены на исследование в замороженном состоянии. Консервирование этанолом не рекомендуется, анализ желательно проводить незамедлительно. Методика изолирования из крови нативных соединений – 1,4- бензодиазепинов включает следующие стадии: 1) Подщелачивание крови 1 М раствором трис-буфера до значения рН 11,0; 2) Экстракция бутилацетатом; 3) Концентрирование проводится по необходимости, часто эту операцию не проводят. жүктеу/скачать 1.35 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|