Требования к обращению и расфасовке спермодоз в лаборатории
1.
Разбавители
а) Используемые ёмкости должны быть стерильны.
б) Входящие в состав разбавителей буферные растворы, приготовляемые на месте, должны быть
стерилизованы фильтрацией (0,22 µm), автоклавированы (121 °C в течение 30 мин) или быть
приготовлены с помощью стерильной воды до добавления яичного желтка (или эквивалентной
добавки) и антибиотиков.
в) Когда в раствор добавляют порошковый разбавитель, то дистиллированную или
деминерализованную воду, получаемую на месте, стерилизуют (121 °C в течение 30 мин или
эквивалент), хранят надлежащим образом, а перед использованием охлаждают.
г) При использовании молока, яичного желтка или другого животного протеина для приготовления
разбавителя семени продукт не должен содержать патогенных агентов или должен быть
простерилизован; молоко подвергают нагреванию до 92°C в течение 3-5 мин; белок, по
возможности, должен закупаться в хозяйствах SPF. При использовании яичного желтка его
извлекают из яйца в асептических условиях. Допускается использование желтка товарного яйца
потребительского назначения или желтка, обработанного, например, пастеризацией или
ионизацией для снижения бактериального присутствия. Любые добавки перед использованием
также должны подвергаться стерилизации.
д) Перед использованием разбавитель хранят не более 72 часов при +5 °C. Более длительный
период консервации возможен при хранении при температуре -20 °C. Разбавитель хранят в
закрытой ёмкости.
е) На каждый ml замораживаемого семени добавляют смесь антибиотиков с бактерицидным
уровнем, минимум эквивалентным следующим смесям: либо гентамицин (250 µg), тилозин
(50
µg), линкомицин-спектиномицин (150/300 µg), либо пенициллин (500 UI), стрептомицин
(500
UI), линкомицин-спектиномицин (150/300 µg), либо амикацин (75 µg), либо дивекацин
(25 µg).
Названия добавленных антибиотиков и уровень их концентрации указывают в международном
ветеринарном сертификате.
2.
Операции по разбавлению и расфасовке
а) Пробирку со свежеотобранной спермой немедленно закрывают и хранят в таком виде до
поступления на обработку.
б) После разбавления и во время охлаждения семя должно находиться в закрытом флаконе.
в) Во время операций по фасовке в ёмкости (например, пипетки для искусственного осеменения),
одноразовые ёмкости и одноразовый расходный инвентарь следует использовать сразу после
извлечения из упаковки. Инвентарь многоразового использования дезинфицируют спиртом,
окисью этилена, паром или другим принятым способом.
|