32. Лейкоциттер интерферонын өндіру процесінің технологиялық схемасын жасаңыз.
Прокариоттық жүйелерде (E. coli) генетикалық инженерияланған лейкоциттік интерферон алынады. Интерферон алудың биотехнологиясы келесі қадамдарды қамтиды:
лейкоциттер массасын интерферон индукторларымен емдеу;
өңделген жасушалардан мРНҚ қоспасын бөліп алу;
кері транскриптазаның көмегімен толық комплементарлы ДНҚ (цДНҚ) алу;
ішек таяқшасының плазмидіне кДНҚ енгізу және оны клондау;
интерферон гендері бар клондарды іріктеу;
геннің сәтті транскрипциясы үшін плазмидаға күшті промоторды енгізу;
интерферон генінің экспрессиясы, яғни. сәйкес ақуыздың синтезі;
прокариоттық жасушаларды жою және аффинді хроматографияны қолдану арқылы интерферонды тазарту.
Жоғары тазартылған және концентрацияланған интерферон препараттары алынды, олар клиникада сынақтан өтеді.
Адамның лейкоциттік интерфероны, табиғи және шоғырланған, тұмаудың және басқа да вирустық респираторлық аурулардың алдын алуға және емдеуге арналған.
Лейкоциттік интерферон – интерфероноген вирусының әсеріне жауап ретінде адам лейкоциттері синтездейтін түрге тән ақуыз. Интерферон селективті вирусқа қарсы белсенділікке ие емес және барлық дерлік вирустарға әсер етеді.
Интерферонды дайындау үшін жаңадан алынған донор қанының лейкоциттері қолданылады. Вирус – интерфероногеннің әсерінен қоректік ортадағы лейкоциттер интерферонды синтездейді. Содан кейін лейкоциттер центрифугалау арқылы жойылады, вирус инактивацияланады. Препарат табиғи интерферон болып табылады. Концентрленген нативті интерферонды алу үшін оны сефадексі бар бағандарда хроматографиялық бөлу арқылы қосымша тазартады.
Интерферон ампулада құрғақ түрінде шығарылады. Жергілікті құрғақ интерферон - тазартылған суда оңай еритін сұр-қоңыр кеуекті ұнтақ. Ерітілген препарат сопалесценциямен қызғылт-қызыл түске ие. Ерітіндінің сәл қоңыр реңкіне рұқсат етіледі. Концентрленген құрғақ препарат - бұл тазартылған суда да оңай еритін, кеуекті сұр-ақ ұнтақ. Препараттың ерітіндісі копалесценциямен сұрғылт түсті, аздап сарғыш-қоңыр түсті делік. Бөгде қоспалар болмауы керек.
Адамның лейкоциттік интерфероны вирусологиялық және бактериологиялық стерильді түрде өндіріледі. Жергілікті препараттың вирусқа қарсы белсенділігі кемінде 32 бірлік, шоғырланған - 100 бірлік болуы керек. Белсенділік везикулярлы стоматит вирусы бар адам эмбрионының тірек-қимыл аппаратының бастапқы жасуша дақылында титрлеу арқылы анықталады.
Препаратты қолдануға қарсы көрсетілімдер жоқ. Интерферон реактивті емес, жанама әсерлер тудырмайды.
Препарат 4 °C температурада сақталады. Жарамдылық мерзімі 1 жыл. Жарамдылық мерзімі өткеннен кейін препараттың осы сериясын шығарған институт қайта бақылауды жүзеге асыра алады. Физикалық қасиеттері мен белсенділігін сақтай отырып, препараттың жарамдылық мерзімін тағы 3 айға ұзартуға болады.
Достарыңызбен бөлісу: |