Ақуыздар. Ақуызды тазалау әдістері Хамидов Султанбек


Ақуызды тазалау әдістері Белокты фракциондау және тазалау



бет7/9
Дата30.11.2022
өлшемі1.72 Mb.
#466166
1   2   3   4   5   6   7   8   9
Ақуызды таззалау әдістері

Ақуызды тазалау әдістері Белокты фракциондау және тазалау

  • Аффинды хроматография (ұқсастығы бойынша хроматография).
  • Ақуыздардың (немесе басқа да макромалекулдердің) тасымалдағышта бекітілген (иммобилизацияланған) ерекше заттармен – субстраттар немесе коферменттер (қандай да бір фермент бөлінгенде), антигендер (немесе антиденелер), гормондар немесе рецепторлар және т.б. болуы мүмкін лигандтармен (немесе басқа да макромалекулдар) таңдамалы өзара іс-қимыл принципіне негізделген.

Ақуызды тазалау әдістері Белокты фракциондау және тазалау

  • Бұл ақуызды колонкадан алу өзгерген рН немесе өзгертілген иондық күшпен буферлік қоспаларды элюирлеумен, сондай-ақ элюент құрамына ақуыздар мен лигандар арасындағы байланысты әлсірететін детергенттерді енгізумен жүзеге асырылады. Әдістің сөзсіз артықшылығы-берілген ақуызды немесе тазалықтың жоғары дәрежедегі басқа да биополимерді бір кезеңді бөліп алу мүмкіндігі. Аффинды хроматографияның көмегімен, мысалы, лигандтар ретінде белгілі бір тРНК (көліктік РНК) қосылған полиакрилгидразидагар геліне аминоацетил-тРНК-синтетазды тазартылған препараттарды салыстырмалы түрде оңай бөліп алуға мүмкіндік алды.

Ақуызды тазалау әдістері Белокты фракциондау және тазалау

  • Гельді хроматография.
  • Препаративтік мақсаттарда, әсіресе ақуыздарды қоспалардан тазарту кезінде молекулалық електер немесе гель-хроматография әдісін кеңінен қолданады. Декстран полисахариді эпихлоргидринмен өңдеу кезінде суда ерімейтін және сефадекс деп аталатын ірі гидрофильді дәндердің қалыптасуына әкелетін көлденең байланыстың әр түрлі дәрежесі пайда болады. Суда еріп жүрудің арқасында астық хроматографиялық колонканы толтыратын гельдің пайда болуымен су ортасында қатты құрғайды. Заттардың осы әдіспен бөлінуі үлкен молекулалар стационарлы болып табылатын гельдің ішкі су фазасына енбейтіндігіне және жылжымалы фазамен бірге колонканың бойымен төмен қарай қозғала отырып, сыртынан қалатынына негізделген; шағын молекулалар, керісінше, жылжымалы және стационарлық фазалар арасында тепе-тең жүйе құрай отырып, дәннің ішіне еркін диффундирленеді және сәйкесінше аз жылдамдықпен колонканың бойымен қозғалады.


Достарыңызбен бөлісу:
1   2   3   4   5   6   7   8   9




©dereksiz.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет