Эпигаллокатехин и рак
жүктеу/скачать 1.88 Mb.
|
- Бұл бет үшін навигация:
- 6.2. Теломераза
- 6.3. Опухолевого супрессора р53
- 6.4. Фактор роста эндотелия сосудов (VEGF)
- 6.5. Протеасомы
6. МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МИШЕНИ ЭГКГ6.1. ЦиклооксигеназыОдним из медиаторов воспаления - простагландинов. Cyclooxygenases (COXs) являются ферментами, которые катализируют скорость лимитирующей стадии в процессе биосинтеза простагландинов из арахидоновой кислоты. COXs семья состоит из трех ферментов ЦОГ-1, ЦОГ-2 и ЦОГ-3. ЦОГ-1 является повсеместно выражены в тканях млекопитающих и участвует в поддержании гомеостаза. ЦОГ-3 функции неизвестны, но она найдена в головного и спинного мозга. Последние акцент делался на ЦОГ-2, как и его выражение оказывается до регулируемого воспаления и рака. Во многих опухолей сообщалось, что ЦОГ-2 играет роль в онкогенез путем модуляции клеточной пролиферации и апоптоза (116). EGCG ингибировал ЦОГ-2 выражение в клеток рака толстой кишки путем активации AMPK пути (117). В андроген-зависимых клеток LNCaP и андроген-независимых PC-3 клетки человеческого рака простаты, как мРНК и белка уровня ЦОГ-2 были заторможены EGCG (118). Дополнение GTP и BTP в качестве единственного источника питьевой решение Winstar крыс привести к нейтрализации АФК путем ингибирования ЦОГ-2 и инактивации фосфорилированных NF-kappa B и Akt (27). Таким образом, EGCG оказывает антипролиферативное воздействие через ЦОГ-2 торможения. 6.2. ТеломеразаРазличные подходы были разработаны для подавления активности теломеразы в раковых клетках человека. Показано, что теломераза-это более выражено во многих опухолей человека и важно для поддержания теломер ядерный белок концы хромосомы. Ингибирование Теломеразы было видно, как в клетке-бесплатная система (клеточный экстракт), а также в живых клетках с концентрации 1 мкмоль (IC50) и 15 мкмоль ЭГКГ. В бесклеточных системах при нейтральном рН, высокой наномолярных низких микромолярных концентрациях EGCG ингибировал активность теломеразы. EGCG (5-10 мкм) сообщили ингибировать теломеразу и вызывают старение клетки после длительного лечения (119). Возможно, подразумевалось, что EGCG разлагается, образуя galloyl радикал, который может ковалентно модифицировать теломеразы. Влияние EGCG на активность теломеразы и рост курса определялась с использованием двух различных типов опухолевых U937 monoblastoid лейкозных клеток и HT29 клеток аденокарциномы толстой кишки. Интересно, что лечение мышей с 1.2 мг EGCG в день в течение 80 дней подшипника теломераза-положительных ксенотрансплантатов рака толстой кишки (HCT-L2) привело к 50% ингибированию размера опухоли в то время как мышей, несущих теломераза-негативных опухолей той же родительской клеточной линии (HCT-S2R) показывает без ответа, EGCG лечения (119). Ингибирование рак-связанного фермента теломеразы является ключевым механизмом, участвующие в раке, ингибирование эпигаллокатехин галлат (ЭГКГ), основной полифенол чая. В здоровые клетки теломеры теряют до 300 bp ДНК на деление клеток, что в конечном итоге приводит к старение; хотя, большинство раковых клеток обходить это ограничение продолжительности жизни через экспрессию теломеразы. Теломеразы обладает каталитической субъединицы, hTERT, необходимых для его надлежащего функционирования и было показано, выраженный в примерно в 90% всех раковых заболеваний. EGCG-лечение репрессированных активности теломеразы и индуцированного апоптоза в гортани плоскоклеточный рак Hep-2 клетках (120). EGCG может подавлять рост клеток путем индукции апоптоза в MCF-7 клеток рака молочной железы, происходит из-за снижения транскрипции hTERT. Эти сделать вывод, что EGCG приводит к прогрессивному деметилирования из промотора hTERT в том числе и E2F-1 сайты связывания, что приводит к увеличению связывания этого репрессора. А промиелоцитарного лейкоза HL60 клеток при воздействии EGCG снижение клеточной пролиферации и апоптоза, но не снижение экспрессии мРНК hTERT (120). Длительное пероральное введение EGCG для ню моделей мышей подшипник как теломераза-зависимой и-независимой ксенотрансплантат опухоли клонированы от одного человека рак потомства показывает, что только теломеразы зависимая опухоль отвечает на лечение (121). 6.3. Опухолевого супрессора р53Генов-супрессоров опухолей, как правило, придерживаются двух-хит гипотезу о том, что если только один аллель Гена поврежден, второй по-прежнему можете производить правильный белок. р53 является опухолевый супрессорный белок, который в людях закодирован в TP53 ген. p53 мутации встречаются в почти всех типов опухоли, где они способствуют сложную сеть молекулярных событий, ведущих к образованию опухолей. (-)-Эпигаллокатехин-галлата (EGCG в частности, могут стабилизации р53, вызывая G1 фазы клеточного цикла и апоптоза (122-123). В другом аналогичном исследовании 80 мг/мл -(-) EGCG лечения в течение 8 часов в бычьей аорты гладкомышечных клеток показало увеличение ядерного белка р53 уровнях до 9 складки (124). EGCG индуцированной стабилизации р53, что вызвало up-регуляции в его транскрипционной активности, таким образом приводя к активации его вниз по течению целей, таких как p21WAF1 и Бакс и индукции апоптоза в опухоли предстательной железы LNCaP клеток. В erlotinib лечения активирует р53, который играет ключевую роль в синергического ингибирования роста erlotinib и EGCG через ингибирование NF~B сигнальный путь в плоскоклеточный рак головы и шеи (125). 6.4. Фактор роста эндотелия сосудов (VEGF)Одним из важных факторов ангиогенеза является фактор роста эндотелия сосудов (VEGF). Гиперэкспрессия VEGF можно увидеть в рака и позволяет опухоли расти и метастазировать. Нео-васкуляризации процесса, необходимых для роста опухоли за пределы нескольких миллиметров в диаметре, а также для опухолевой инвазии и метастазирования (126-127). Jung et al показали, что ангиогенез может быть вызвана EGCG через блокирует индукцию VEGF в клетках карцином человека. Эти результаты показали, что (-)-эпигаллокатехин-галлата (EGCG ингибировал объем опухоли на 61% по сравнению с (-)-EC лечения, а также уменьшение опухоли в сосуд подсчитывает и увеличение апоптоза после лечения (-)-EGCG (128). Чай полифенолы снижение сывороточного уровня простат-специфического антигена, фактор роста гепатоцитов, фактор роста эндотелия сосудов в рак предстательной железы. In vitro он также ингибирует продукцию фактора роста гепатоцитов и сосудистого эндотелиального фактора роста. Другое исследование показывает, что EGCG ингибирует экспрессию HIF-1-alpha, которая сильно активизирует экспрессии VEGF (129) как на уровне мРНК и белка в колоректальных раковых клеток. Ингибирование HIF-1-alpha связано с угнетением ERK и Akt фосфорилирования, потому что HIF-1-alpha синтез белка регулируется PI3K/Akt и MAPK/ERK пути активации. Поскольку заметное снижение клеточного HIF-1-alpha уровней произошло в течение 3 часов после того, EGCG и предшествует торможение VEGFR-2 фосфорилирования. Автор также пояснил, что EGCG ингибирует активацию VEGF/VEGFR оси, путем подавления экспрессии HIF-1-alpha и несколько основных факторов роста в пяти различных клеточных линий колоректального рака (130). 6.5. ПротеасомыПротеасомы-это мультикаталитических протеаз, ответственных за деградацию большинства клеточных белков и теперь признается как НОВЫЙ и перспективной мишенью для химиотерапии. Протеасомы регулирует рост клеток, выживаемость и метастазирование раковых клеток, что делает его привлекательной мишенью для новых лекарств. В эукариотических протеасомы содержит три каталитических бета-субъединиц ответственность за химотрипсина (CT)-(бета-5), трипсин (T)-(бета-1), и пептидил-пептид глутамил-гидролизуют (PHGH)-(бета-2) (131). И мы, и другие сообщили, что ингибирование КТ-активности связан с индукцией апоптоза в различных опухолей (132-133). Мы сообщали, что (-)-эпигаллокатехин-галлата (EGCG мощно и конкретно тормозило химотрипсин-подобную активность протеасомы in vitro (IC50 = 86-194 нм) и in vivo (1-10 мкм) в концентрациях обнаруживается в сыворотке крови зеленого чая, пьющие и индуцированного опухолевого роста клеток ареста в г1 фазе клеточного цикла, имея мало или вообще не влияет на нормальное, nontransformed клеток. Мы также сообщали, впервые с помощью in silico док-методы, которые сложноэфирной связи в пределах (-)-эпигаллокатехин-галлата (EGCG сыграли важную роль в его ингибиторная активность протеасомы. Мы обнаружили, что синтетический (-)-эпигаллокатехин-галлата (EGCG амидов и (-)-эпигаллокатехин-галлата (EGCG аналогов, с изменениями в кольцо, C-кольцо или сложноэфирной связи, ингибирует химотрипсин-подобную активность очищенной 20S протеасомы с измененной потенций, индуцированного роста ареста в г1 фазы клеточного цикла в лейкоза Jurkat Т-клеток, и подавил колонии формирования человеческого рака простаты LNCaP клеток (134). В попытке обнаружить более стабильным и мощным аналогам, мы синтезировали несколько (-)-эпигаллокатехин-галлата (EGCG аналогов с-ой группы выбывает из B - и/или D-кольца. Мы также синтезировали предполагаемыми пролекарства с-OH групп, защищенных ацетат, который может быть удален с помощью сотовой цитозольной эстераз. Затем мы осмотрели деятельности структурных отношений между соединениями, защищенными и не защищенными. Мы обнаружили, что уменьшение-ой группы из B - или D-кольца приводит уменьшить протеасомы-ингибиторная активность in vitro. Защищенные аналоги были способны ингибировать proteasomal химотрипсин-подобную активность на 97% в культивируемых опухолевых клеток. In vivo EGCG подвергается быстрой биотрансформации, такие как метилирование по катехол-O-метилтрансферазы (КОМТ), что ограничивает его действие. Проблема в развивающихся (-)-эпигаллокатехин-галлата (EGCG для профилактики рака и терапии является его низкая биодоступность, отчасти из-за его плохого усвоения и его нестабильность в нейтральных или щелочных условиях (например, физиологический рН) и отчасти из-за инактивации биологически процессов, таких как метилирование. Мы показали, что Pro-EGCG (1), как НОВЫЙ пролекарства, обращенных к сотовой протеасомного ингибитора и противоопухолевого агента в nude мышей после лечения в течение 31 дня. Наши последние исследования показывают, что про-препарат простой синтетический аналог 5, ацетат 6, повышенной цитотоксической активности 5 pro-EGCG (1) enhanced рост ингибирующей активности по отношению к EGCG. Еще более простой аналог 7, хотя и не таким мощным ингибитором очищенной протеасомы как EGCG или 5, был найден, чтобы быть лучше, ингибитор протеасом при инкубировали с MDA-MB-231 клеток экстракты (44) (Рис. 2). Эти результаты также позволяют предположить, что полиморфизм играет значительную роль как факторов, влияющих на анти-пролиферативной деятельности EGCG и его аналоги. жүктеу/скачать 1.88 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|