High-level expression, purification and production of the fungal immunomodulatory protein-gts in baculovirus-infected insect larva.
Wu TY, Chen HA, Li FY, Lin CT, Wu CM, Hsieh FC, Tzen JT, Hsieh SK, Ko JL, Jinn TR.
Source
Department of Science Technology, Chung Yuan Christian University, Chung Li, Taiwan 32023, Republic of China.
Fip-gts, a fungal immunomodulatory protein (Fip) isolated from Ganoderma tsugae (gts), has been reported to possess therapeutic effects in the treatment of cancer and autoimmune disease. To cost-effectively produce Fip-gts and bypass the bottleneck involved in its time-consuming purification from G. tsugae, in this study, we incorporated the SP(bbx) secretion signal into recombinant baculovirus for expressing glycosylated and bioactive rFip-gts in baculovirus-infected insect cells and Trichoplusia ni larva. This is the first study to employ the aerosol infecting T. ni larva with recombinant baculovirus for economical and high-level production of foreign proteins. In this study, one purification could yield 10 mg of rFip-gts protein merely from ∼100 infected T. ni larvae by aerosol inoculation, corresponding to 5 L (5 × 10⁹ cells) of the infected Sf21 culture. In addition, the rFip-gts purified from T. ni larvae could induce the expression of interleukin-2 in murine splenocytes with an immunoresponsive level similar to that induced by LZ-8 (a known potent immunomodulatory protein purified from Ling zhi, Ganoderma lucidum). Thus, our results demonstrated that the larva-based baculovirus expression system can successfully express rFip-gts with the assembling capability required for maintaining immunomodulatory and anticancer activity. Our approach will open a new avenue for the production of rFip-gts and facilitate the immunoregulatory activity of rFip-gts available in the future.
Mutat Res. 2013 мар 18;751(2):109-15. doi: 10.1016/j.mrgentox.2012.12.005. Epub 2012 дек 28.
Гриб бета-глюкан: потенциальный кандидат для послереакторных защиты.
Пиллаи TG, Ума Деви П.
Источник
Отдел научно-Исследовательской работы, Джавахарлал Неру онкологическая Больница и Исследовательский Центр, в штате Мадхья-Прадеш, Индия. thulasigpilla@yahoo.co.in
Аннотация
In vivo радиопротекторный эффект бета-глюкан (BG), изолированных из гриба Ganoderma lucidum, от радиации (РТ) индуцированного повреждения, был исследован принимая мыши выживания, гематологии, печени ГШ (восстановленного глутатиона), печени малонового диальдегида (МДА) и костного мозга хромосомных аберраций в качестве конечных точек. Молодой персонаж швейцарской мышей-альбиносов были все тело воздействию гамма-излучения. Для мыши выживания исследования, BG была перорально (250μg/кг массы тела или wt 500μg/кг живой вес) 15 мин. 5 мин до или после 8Gy экспозиции. Для других параметров BG был дан в устной форме 5 минут после того, 4Gy экспозиции. Радиопротекторный эффект BG сравнивалось с клинически используемый радиопротекторный препарат амифостин (WR-2721), по 300 мг/кг массы тела мас вводили внутрибрюшинно, 30мин до облучения. BG (500μg/кг живой вес), производимых (66%) мышь выживания на 30 дней, учитывая послереакторных, и 83% выживших на 30 дней с 300 мг/кг массы тела wt амифостин вводить непосредственно перед РТ РТ в то время как в одиночку произвела 100% смертность. BG не токсичен в радиопротекторный дозы. Значительное сокращение в число аберрантных клеток и различных видов аберрации был отмечен в BG и амифостин групп администрирования по сравнению с излучением в одиночку рассматривать группу. BG кажется, имеет потенциал для использования, защита от незапланированной облучения.
Mutat Res. 2013 Mar 18;751(2):109-15. doi: 10.1016/j.mrgentox.2012.12.005. Epub 2012 Dec 28.
Mushroom beta glucan: potential candidate for post irradiation protection.
Pillai TG, Uma Devi P.
Source
Department of Research, Jawaharlal Nehru Cancer Hospital and Research Centre, Madhya Pradesh, India. thulasigpilla@yahoo.co.in
Abstract
The in vivo radioprotective effect of a beta-glucan (BG) isolated from the mushroom Ganoderma lucidum, against radiation (RT) induced damage was investigated taking mouse survival, hematology, liver GSH (Reduced glutathione), liver Malondialdehyde (MDA) and bone marrow chromosomal aberrations as end points. Young adult swiss albino mice were whole body exposed to gamma radiation. For mouse survival study, BG was administered orally (250μg/kg body wt or 500μg/kg body wt) 15min before or 5min after 8Gy exposure. For other parameters BG was given orally 5min after 4Gy exposure. The radioprotective effect of BG was compared with that of clinically used radioprotective drug amifostine (WR-2721), at 300mg/kg body wt administered intraperitoneally, 30min before irradiation. BG (500μg/kg body wt) produced (66%) mouse survival at 30 days given post irradiation, and 83% survived at 30 days with 300mg/kg body wt of amifostine administered before RT while RT alone produced 100% mortality. BG is not toxic at the radioprotective dose. Significant reduction in number of aberrant cells and different types of aberration was observed in both BG and amifostine administered groups compared to radiation alone treated group. BG seems to have potential for use in protection against unplanned radiation exposures.
Последние Pat Противоопухолевого Препарата Открытиями. 2013 Sep;8(3):255-87.
Ganoderma lucidum: потенциал для биотехнологического производства противораковых и иммуномодулирующих препаратов.
Boh Б.
Источник
Университет Любляны, Факультет Естественных наук и Инженерии, Askerceva 12, Любляна, Словения. bojana.boh@kii.ntf.uni-lj.si
Аннотация
На основе анализа более чем 270 патенты и научные статьи, это государство-of-the-art review представлена Ganoderma lucidum, лекарственного базидиомицетов гриб с иммуномодулирующим и антираковым действием. Методы культивации для коммерческого производства G. lucidum плодовых тел и мицелием суммируются с основным активных соединений-тритерпеноидов, полисахаридов и белков, что часто встречается в формы или протеогликанов гликопептидов. Фармакологические эффекты с акцентом на противоопухолевым и иммуномодулирующим функции представлены отдельно для спор и сухой грибница, и для групп тритерпеноиды, полисахариды, белки и гликопротеины. Патенты, раскрывающие методы приготовления экстрактов и очищенной фармацевтической изоляты могут быть пересмотрены и приведены примеры анти-рак составов, используемых в качестве лекарственных препаратов или пищевых добавок. В обзоре отмечается, что согласно сегодняшнему пониманию, противоопухолевой активностью G. lucidum может быть обусловлено, по крайней мере, пять групп механизмов: (1) активация/модуляции иммунного ответа хозяина, (2) прямой цитотоксичность по отношению к раковым клеткам, (3) подавление опухоли вызванных ангиогенеза (4) подавление пролиферации раковых клеток и инвазивных метастазов поведение, и (5) канцерогенов деактивации защиты клеток. Хотя, по данным последних in vitro и in vivo исследования демонстрируют перспективы антираковым действием, выявлении необходимости дальнейшего (1) выделения и очистки веществ, и более глубокое понимание их индивидуальных и синергетический фармакологических эффектов, (2) молекулярном уровне исследования противоопухолевого и иммуно-взаимодополняющих механизмов, (3) хорошо разработаны тесты in vivo и контролируемых клинических исследований и (4) стандартизация и контроль качества G. lucidum штаммов, процессы обработки, выдержки и промышленных химикатов.
Recent Pat Anticancer Drug Discov. 2013 Sep;8(3):255-87.
Достарыңызбен бөлісу: |