J pineal Res Мелатонин как иммунорегулирующий агент
Inhibition of VEGF expression through blockade of Hif1α and STAT3 signalling mediates the anti-angiogenic effect of melatonin in HepG2 liver cancer cells
жүктеу/скачать 1.4 Mb.
|
- Бұл бет үшін навигация:
- BACKGROUND
- METHODS
- RESULTS
- CONCLUSION
- SIRT1 inhibition by melatonin exerts antitumor activity in human osteosarcoma cells.
Inhibition of VEGF expression through blockade of Hif1α and STAT3 signalling mediates the anti-angiogenic effect of melatonin in HepG2 liver cancer cells.Carbajo-Pescador S, Ordoñez R, Benet M, Jover R, García-Palomo A, Mauriz JL, González-Gallego J. BACKGROUND:Hepatocellular carcinoma (HCC) growth relies on angiogenesis via vascular endothelial growth factor (VEGF) release. Hypoxia within tumour environment leads to intracellular stabilisation of hypoxia inducible factor 1 alpha (Hif1α) and signal transducer and activator of transcription (STAT3). Melatonin induces apoptosis in HCC, and shows anti-angiogenic features in several tumours. In this study, we used human HepG2 liver cancer cells as an in vitro model to investigate the anti-angiogenic effects of melatonin. METHODS:HepG2 cells were treated with melatonin under normoxic or CoCl2-induced hypoxia. Gene expression was analysed by RT-qPCR and western blot. Melatonin-induced anti-angiogenic activity was confirmed by in vivo human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) tube formation assay. Secreted VEGF was measured by ELISA. Immunofluorescence was performed to analyse Hif1α cellular localisation. Physical interaction between Hif1α and its co-activators was analysed by immunoprecipitation and chromatin immunoprecipitation (ChIP). RESULTS:Melatonin at a pharmacological concentration (1 mM) decreases cellular and secreted VEGF levels, and prevents HUVECs tube formation under hypoxia, associated with a reduction in Hif1α protein expression, nuclear localisation, and transcriptional activity. While hypoxia increases phospho-STAT3, Hif1α, and CBP/p300 recruitment as a transcriptional complex within the VEGF promoter, melatonin 1 mM decreases their physical interaction. Melatonin and the selective STAT3 inhibitor Stattic show a synergic effect on Hif1α, STAT3, and VEGF expression. CONCLUSION:Melatonin exerts an anti-angiogenic activity in HepG2 cells by interfering with the transcriptional activation of VEGF, via Hif1α and STAT3. Our results provide evidence to consider this indole as a powerful anti-angiogenic agent for HCC treatment. Ингибирование экспрессии VEGF через блокаду Hif1α и STAT3 сигнализации опосредует анти- ангиогенный эффект мелатонина в HepG2 клетках рака печени. Carbajo - Пескадор S , Ордоньес R , Бенет М, Jover R , Гарсия- Palomo, Mauriz JL , Гонсалес - Гальего Дж. Предпосылки : Гепатоцеллюлярной карциномы ( ГЦК) рост зависит от ангиогенеза с помощью фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) выпуска . Гипоксия в среде опухоли приводит к внутриклеточной стабилизации индуцируемого гипоксией фактор 1 альфа ( Hif1α ) и преобразователя сигнала и активатора транскрипции ( STAT3 ) . Мелатонин индуцирует апоптоз в ГЦК , и показывает антиангиогенные особенности в некоторых опухолей . В этом исследовании мы использовали человеческие HepG2 раковые клетки печени в качестве модели в пробирке для исследования антиангиогенные эффекты мелатонина . МЕТОДЫ : HepG2 клетки обрабатывали мелатонина при нормоксических или CoCl2 - индуцированной гипоксии. Экспрессия генов анализировали RT- КПЦР и вестерн-блоттинга . Мелатонин -индуцированной антиангиогенная активность была подтверждена в естественных пупочной вены человека эндотелиальных клеток ( HUVECs ) формирование трубки анализа. Выделяется VEGF измерялась ELISA. Иммунофлуоресценции осуществляли анализировать клеточную локализацию Hif1α . Физическая взаимодействие между Hif1α и его коактиваторов анализировали иммунопреципитацией и иммунопреципитации хроматина (чип) . РЕЗУЛЬТАТЫ: Мелатонин в фармакологической концентрации (1 мм) уменьшается клеточные и выделяемые уровни VEGF , а также предотвращает образование HUVECs трубки в условиях гипоксии , связанный со снижением экспрессии белка Hif1α , ядерной локализации и транскрипционной активности . В то время как гипоксия повышает фосфорно - STAT3 , Hif1α и CBP/p300 вербовку как транскрипционный комплекса в VEGF промотора , мелатонин 1 мМ уменьшает их физическое взаимодействие . Мелатонин иселективным ингибитором STAT3 Stattic показать синергический эффект на Hif1α , STAT3 , и выражения VEGF . ЗАКЛЮЧЕНИЕ : Мелатонин оказывает антиангиогенную активность в клетках HepG2 , вмешиваясь в активации транскрипции VEGF , через Hif1α и STAT3 . Наши результаты свидетельствуют рассмотреть этот индол в качестве мощного антиангиогенного средства для лечения ГЦК . Eur J Pharmacol. 2013 Sep 5;715(1-3):219-29. doi: 10.1016/j.ejphar.2013.05.017. Epub 2013 May 29. SIRT1 inhibition by melatonin exerts antitumor activity in human osteosarcoma cells.Cheng Y, Cai L, Jiang P, Wang J, Gao C, Feng H, Wang C, Pan H, Yang Y. Melatonin, the main secretory product of the pineal gland, has potent antitumor activity against various types of cancer. However, the molecular mechanisms underlying the effects of melatonin remain largely unknown. SIRT1, a conserved nicotinamide adenine dinucleotide (NAD(+))-dependent deacetylase, has been implicated in modulating transcriptional silencing and cell survival and plays a key role in carcinogenesis through the deacetylation of important regulatory proteins. In this study, we assessed the antitumor activity of melatonin against human osteosarcoma cells (9607 cell line) and explored the role of SIRT1 in the activity of melatonin. Melatonin treatment resulted in strong antitumor activity, as evidenced not only by reductions in tumor cell vitality, adhesion ability, migration ability and glutathione (GSH) levels but also by increase in the apoptotic index and reactive oxygen species. Additionally, melatonin treatment down-regulated SIRT1 and up-regulated acetylated-p53. Sirtinol (a known SIRT1 inhibitor) and SIRT1 siRNA further enhanced the antitumor activity of melatonin, while SRT1720 (a known SIRT1 activator) attenuated the antitumor activity of melatonin. In summary, melatonin is a potent inhibitor of osteosarcoma cell growth that targets SIRT1 signaling, and the inhibition of SIRT1 signaling is a novel mechanism of action for melatonin during therapeutic intervention in osteosarcoma. SIRT1 ингибирование мелатонина оказывает противоопухолевую активность в клетках остеосаркомы человека.
жүктеу/скачать 1.4 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|