Научные разработки ниу рамн практическому здравоохранению

Показана эффективность использования метода тока короткого замыкания (ТКЗ), разработанного в НИИОПП РАМН, для изучения нарушений всасывания у больных с целиакией, синдромом раздраженного кишечника, синдромом абдоминальной ишемии.

Клинические испытания метода ТКЗ проведены в ЦНИИ гастроэнтерологии Департамента здравоохранения Правительства Москвы.

1.4. Гематология и трансфузиология
1.4.1. Гематология
Акустические эффекты при свертывании крови в интенсивных потоках (Гематологический научный центр)

Построена физико-математическая модель процессов внутрисосудистого свертывания крови и в определении диапазонов параметров, ключевым образом влияющих на формирование в кровотоке акустически детектируемых фибриновых сгустков, с помощью которой установлено, что при интенсивном развитии воспалительных процессов в прилегающих к сосуду тканях формирование внутрисосудистых фибриновых микротромбов подчиняется законам подобия. Установлено соотношение подобия, связывающее размер тканевого очага воспаления с характерным расстоянием от рассматриваемого очага до акустически детектируемой в кровотоке области, занятой фибриновыми микросгустками.

Для изучения процессов формирования микросгустков создана система одновременного детектирования акустического и оптического сигналов при свертывании крови/плазмы крови в интенсивном потоке. Установлены достоверные акустические признаки появления в кровотоке микроэмболов на ранних этапах внутрисосудистого свертывания крови. Обнаружено значительное усиление амплитуды акустического сигнала при начале свертывания крови/плазмы крови. По данным акустических измерений удалось установить стадийный характер формирования тромбов в кровотоке. Определен перечень ранних акустических предвестников развития массивного внутрисосудистого диссеминированного свертывания.

Созданы теоретические предпосылки для создания прибора для ранней диагностики тромбообразования.

Принципы разработанного метода используются при ультразвуковой диагностике в ГНЦ РАМН.

Скрытые повреждения мембран эритроцитов при действии перфторана и его компонентов, миорелаксантов и ионизирующих излучений на цельную кровь и ее суспензию в клиническом и биофизическом экспериментах (НИИ общей реаниматологии; ММА им. И.М.Сеченова Росздрава; МГУ им. М.В.Ломоносова Минобрнауки России)

Разработан метод калиброванной электропорации для оценки скрытых повреждений биологических наноструктур (мембран эритроцитов) при действии на кровь пациента внешних агентов: фармхимпрепаратов в различных концентрациях, ионизизрующих излучений в широком диапазоне доз. Метод позволяет детектировать скрытые повреждения мембран в первые 10-30 минут после воздействия.

С помощью разработанного метода проведены исследования действия на кровь антиоксидантов, миорелаксантов, кровозаменителей. Показано, что в зависимости от концентрации фармпрепараты могут вызывать скрытые повреждения мембран или оказывать «закрепляющее» действие на них. Детектированы скрытые повреждения биологических наноструктур при действии гамма-излучения в диапазоне доз от 1 до 600 Гр в течение первых 30 минут после воздействия (такие повреждения могут проявляться через месяцы и даже годы).

Метод предназначен для применения в клинической медицине, в системе доклинических испытаний фармхимпрепаратов, в системе профилактики и контроля персонала, работающего в условиях повышенной радиоактивности и химического загрязнения.

Создан лабораторный комплекс аппаратуры для раннего детектирования скрытых повреждений мембран эритроцитов при действии на кровь внешних агентов. Для создания серийного аппаратурного комплекса необходимы инвестиции 1.000.000 рублей в год. Потенциальный объём продаж 100-500 в год. Стоимость одного комплекса ≈ 100.000 рублей. Окупаемость – 1 – 2 года.

Имеются патенты РФ на изобретения: «Способ определения степени повреждения мембран эритроцитов» (№ 2269127 от 27 января 2006 г.) - патентообладатель - ММА им. И.М. Сеченова; «Способ защиты мембран эритроцитов крови от воздействия пробойным импульсным электрическим полем» (№ 2283096 от 10 сентября 2006 г.) - патентообладатель - ГУ НИИ общей реаниматологии РАМН.

Подготовлен пакет документов на новую технологию и медицинскую аппаратуру для получения разрешения к применению в практике.
Роль плазменных фосфолипидных поверхностей в пространственной динамике свертывания крови (Гематологический научный центр)

Исследовано влияние фосфолипидных поверхностей крови на пространственную динамику свертывания и выявлены механизмы этого воздействия. Показано, что максимальная концентрация тромбина, эндогенный тромбиновый потенциал, а также скорость пространственного роста сгустка при повышении концентрации фосфолипидной поверхности сначала увеличивается, а затем выходят на плато; при этом прокоагулянтная активность одной везикулы практически равна активности одного тромбоцита. Установлено, что активация тромбоцитов АДФ, не вызывающая существенной экспрессии прокоагулянтных поверхностей и везикуляции, тем не менее, приводит к прокоагулянтным изменениям в тесте генерации тромбина.

Результаты исследования позволяют объяснить причины ряда тромботических осложнений и служат основой для разработки методов их коррекции.
Исследование деформируемости и плотности эритроцитов при заболеваниях системы крови, массивных кровопотерях и стресс-воздействиях (Гематологический научный центр)

Показано, что фильтрационно-осмотический метод исследования деформируемости эритроцитов (ФИОМ) и фталатный метод исследования распределения эритроцитов по плотности (РЭПП) могут применяться для скрининговой диагностики анемий и для контроля за эффективностью терапии. Внедрение РЭПП и ФИОМ в практику здравоохранения позволит сократить количество дорогостоящих анализов для диагностики анемий, уменьшить количество ошибочных диагнозов, прогнозировать обострение заболевания и оценить полноту ремиссии. Наиболее перспективным представляется применение РЭПП для скрининговой диагностики мембранопатий, а ФИОМ – для дифференциальной диагностики железодифецитной анемии и гетерозиготной формы ß-талассемии.

Проведены клинические испытания.

Подготовлены методические рекомендации по клиническому применению фильтрационно-осмотического метода исследования деформируемости эритроцитов.

Разработана математическая модель расчета остаточных рисков трансфузионного инфицирования больных, описывающая связь между нагрузкой трансфузионной терапии и риском заболевания гепатитом. Выявлено, что основными факторами риска инфицирования гематологических больных вирусами гепатита В и С являются инвазивные вмешательства, в особенности связанные с трансфузионной терапией.

Разработана система рекомендаций, направленных на снижение риска заражения вирусами гепатита:

- необходимо создание индивидуальных (а не множественных) донорских пулов для пациентов с большим количеством трансфузий;

- для иммунокомпрометированных гематологических больных, которым проводится цитостатическое и иммунологическое лечение, требуется проводить дополнительные процедуры по тестированию трансфузионных сред (с использованием высокочувствительных тест-систем и молекулярных методов ДНК/РНК-тестирования).
Стандартизация методов амбулаторного лечения гемофилии и болезни Виллебранда (Гематологический научный центр)

Разработаны и внедрены в клиническую практику:

- протоколы ведения больных «Гемофилия» и «Болезнь Виллебранда»;

- стандарты по амбулаторной медицинской помощи больным с наследственным дефицитом факторов VIII, IX, болезнью Виллебранда и амбулаторно-поликлиническому и скоропомощному лечению больных гемофилией и болезнью Виллебранда;

- схемы лечения различных по локализации геморрагических проявлений при гемофилии, наличии ингибиторов к факторам свертывания крови VIII/IX и болезни Виллебранда.

Разработана и внедрена профилактическая программа «Домашнее лечение» для больных гемофилией и болезнью Виллебранда, проживающих в Москве и Московской области, состоящих на диспансерном учете в ГНЦ РАМН. Больные гемофилией и болезнью Виллебранда, состоящие на учете в ДНМОГ, но проживающие в России, получают концентраты факторов VIII/IX по месту жительства. Определение потребности и расчет дозы производится в ДНМОГ каждому больному индивидуально. Это привело к уменьшению обострений и более легкому течению заболевания. В результате - достигнуто снижение инвалидности данных пациентов со 100% до 40%.

Создан и пополнен Национальный регистр больных гемофилией (5239 пациентов).
Новые методы лечения заболеваний макрофагальной системы и хронических заболеваний печени, ассоциированных с гематологической патологией (Гематологический научный центр)

Разработаны и внедрены в клиническую практику:

- протокол обследования и лечения пациентов с болезнью Гоше, включающий энзимодиагностику, радиологическое обследование, мониторинг клинико-лабораторных показателей на фоне проведения заместительной ферментной терапии;

- алгоритм обследования больных с внепеченочной портальной гипертензией, развившейся в результате тромбоза портальной системы, который включает комплекс клинических и лабораторных тестов для оценки состояния гемопоэза и функциональной активности макрофагальной системы, оценку состояния гемостаза и молекулярный анализ полиморфизмов генов системы свертывания крови. Определены основные подходы к лечению этих больных, включающие профилактическую и антикоагулянтную терапию;

- протокол обследования и лечения больных с хроническими заболеваниями печени (вирусной и невирусной этиологии), ассоциированными с цитопеническими синдромами.

Внедрено в практику работы отделения абдоминальной хирургии РНЦХ РАМН.

Разработаны и стандартизированы диагностические критерии железодефицитной анемии, наследственной гемолитической анемии, приобретенных гемолитических анемий, идиопатической тромбоцитопенической пурпуры. Сформулированы алгоритмы дифференциальной диагностики указанных заболеваний с использованием современных методов диагностики (генетические, кариологические, молекулярные, иммунофенотипические, иммунохимические и др.).

Унифицированы и стандартизованы программы диагностики железодефицитной анемии, наследственной гемолитической анемии, приобретенной гемолитической анемии, идиопатической тромбоцитопенической пурпуры в амбулаторных условиях.

Программы диагностики внедрены в практику работы гематологических центров Москвы, Московской, Воронежской, Курской, Орловской и областей России.

Сформулирована новая концепция тромбофилического состояния – гиперкоагуляционный синдром. Определены клинические (синдром Рейно, парастезии верхних и нижних конечностей, упорные головные боли) и лабораторные признаки данного синдрома (укорочение АЧТВ, тромбинового времени, повышение уровня РФМК, угнетение фибринолиза). Выделен ряд новых форм гиперкоагуляционного синдрома: полиглобулическая, эндотелиопатическая, посттромботическая и ряд др.

Разработан алгоритм терапии гиперкоагуляционного синдрома при различных формах гематогенных тромбофилий и у больных с хроническими миелопролиферативными заболеваниями (комплексная терапия, включающая медикаментозную коррекцию и использование методов экстракорпорального очищения крови).

Выявлена частота нарушений гемостаза при сепсисе и септическом шоке. Определено место лечебного плазмафереза и объема трансфузий свежезамороженной плазмы в терапии септического шока.

Установлены критерии отличия гиперкоагуляционного синдрома от гиперкоагуляционной фазы ДВС-синдрома: при гиперкоагуляционном синдроме XII-а зависимый фибринолиз менее 50 минут, более 100 минут – гиперкоагуляционная фаза ДВС-синдрома, уровень РФМК более 10 г/л ∙ 10^-2 , число тромбоцитов менее 150 тыс. в мкл; при гиперкоагуляционном синдроме отсутствует полиорганная недостаточность.

Разработаны протоколы диагностики и терапии гиперкоагуляционного синдрома у больных гематологической клиники.

Реализовано в практике работы ГНЦ РАМН.
Создание программ скрининговой диагностики и мониторинга лечения больных гемолитическими анемиями (Гематологический научный центр)

Усовершенствован алгоритм скрининговой диагностики гемолитических анемий: введены параметры автоматизированной гемограммы (гистограммы, RDW), оценка фильтруемости и деформируемости эритроцитов и количества в них креатина. Начато внедрение методов диагностики редких причин гемолиза, таких как «шунтовая гипербилирубинемия», тромботическая тромбоцитопеническая пурпура, а также генетическая детекция бета-талассемии, гемоглобиноза S и тромбогенного риска при аспленических тромбоцитозах и ПНГ.

Разработан метод оценки фильтруемости и деформируемости эритроцитов для: 1) дифференциального диагноза анемии и, прежде всего, ЖДА, талассемии и ПНГ; 2) мониторинга стабильности ремиссии при АИГА; 3) определения угрозы гемолитического криза АИГА. Показана дифференциально-диагностическая значимость отсутствия экспрессии на мембране эритроцитов CD 55 и CD59 для выявления ПНГ-клона эритроцитов. Подготовлены методические рекомендации «Значение плотности и деформируемости эритроцитов в дифференциальной диагностике различных форм анемий».

Разработан метод определения гомоцистенина сыворотки, позволяющий подтверждать сопутствующий дефицит фолиевой кислоты при длительно протекающих гемолитических анемиях и выявлять больных с повышенным генетически обусловленным тромбогенным риском. Тест генерации тромбина является предпосылкой для обоснования принципов контроля антикоагулянтной терапии, используемой в условиях высокого тромбогенного риска при некоторых гемолитических анемиях (АИГА, ПНГ).

Разработаны схемы лечения АИГА: при остром гемолизе – пульс терапия метилпреднизолоном; при рефрактерных АИГА – ритуксимаб. Установлено, что ритуксимаб вызывает 50% клинических ремиссий у бесперспективного контингента больных, продолжительностью 6-8 месяцев, не требует поддерживающей терапии и может применяться повторно для предупреждения рецидива гемолитических кризов.

Внедрено в практику работы Московского гематологического центра.

Разработана анкета для станций переливания крови, позволяющая проследить процесс заготовки, карантинизации и переработки крови доноров. Собраны и обработаны данные со 109 станций переливания крови (СПК). Установлен низкий уровень (не более 23%) внедрения процедуры карантинизации на СПК. Выявлены причины медленного введения процедуры карантинизации: слабое оснащение СПК холодильным оборудованием (обеспеченность СПК оборудованием, в том числе и не предназначенном для хранения плазмы крови, составляет около 45%) и большом числе первичных доноров. Не прошедшая карантинизацию плазма частично переливается, но большая ее часть направляется на производство препаратов крови, что приводит к увеличению риска распространения ВИЧ-инфекций при гемотрансфузиях.

Подготовлены: проект нормативного документа в виде медицинской технологии по заготовке донорской крови и проведению ее карантинизации и проект методических рекомендаций «Карантинизация свежезамороженной плазмы» (изменения к Временному порядку карантинизации свежезамороженной плазмы). В субъекты Российской Федерации направлено информационное письмо с предложениями по оптимизации работы Службы крови.
Требования к сбору, хранению и транспортировке образцов сыворотки (плазмы) крови для создания банка (НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи; Станция переливания крови Департамента здравоохранения г. Москвы)

Разработаны методические рекомендации, в которых подробно анализируется значение преаналитического этапа в лабораторной диагностике, рассмотрено значение различных факторов, влияющих на процесс сбора биологического материала. Большое внимание уделено технологическому процессу подготовки пациента к лабораторным исследованиям. Рассмотрен технологический процесс первичной обработки образцов биологического материала, подчеркнута важность правильной идентификации образцов от определенных пациентов и идентификация видов образцов биологического материала. Специальный раздел посвящен описанию технологического процесса транспортировки и хранения биологического материала на преаналитическом этапе. Представлены данные о длительности сохранения проб до и после определения для наиболее распространенных биохимических показателей.

Материалы направлены в Росздравнадзор для утверждения.

Гемостазиологическое обследование доноров (Гематологический научный центр)

В результате исследования функций тромбоцитов и 11 параметров свертывающей, противосвертывающей и фибринолитической систем у кадровых доноров установлена необходимость исследования функциональной активности тромбоцитов, а также активности фактора VIII и содержания фибриногена у доноров перед первой процедурой цито- и плазмафереза. Это позволит, во-первых, значительно повысить качество таких компонентов крови, как тромбоконцентрат, свежезамороженная плазма и криопреципитат и, во-вторых, позволит своевременно выявлять доноров с нарушениями в системе гемостаза.

Данное заключение будет включено в «Порядок обследования доноров».
Рабочие стандартны образцов факторов VIII и IX свертывания крови (Гематологический научный центр)

Созданы рабочие стандартные образцы (РСО) коагулологической активности факторов VIII и IX свертывания крови с аттестованной активностью по соответствующим международным стандартам. Внедрение данных РСО в отечественную практику производства антигемофильных препаратов обеспечит контроль специфической активности факторов VIII и IX на уровне производства полупродуктов и конечных антигемофильных препаратов без применения дорогостоящих международных стандартов.

Имеется патент РФ на изобретение «Способ получения препарата фактора VIII».

РСО факторов VIII и IX испытаны при получении препаратов Агемфил А и Агемфил В. Имеется разрешение на применение созданных РСО при пилотном производстве антигемофильных факторов.

Созданные РСО реализованы в ГНЦ РАМН при производстве антигемофильных препаратов.
Разработка условий вирусной инактивации концентрата фактора IX с помощью сольвент-детергента (Гематологический научный центр, Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П.Чумакова)

Создана технологическая схема получения вирусобезопасного препарата плазмы, концентрата фактора IX, Агемфила В, полностью соответствующая международным требованиям (GMP). Эффективность разработанной технологической схемы вирусной инактивации подтверждена в экспериментах in vivo с использованрем суррогатной модели гепатита В уток «УФА-04», сходного по своей структуре и свойствам с вирусом гепатита В человека.

Разработан пакет нормативно-технической документации в соответствии с требованиями ГОСТ Р 52249-2004 «Правила производства и контроля качества лекарственных средств»: Стандартные операционные процедуры (СОП), Пусковой регламент, Фармакопейная статья предприятия (ФСП).

Результаты работы внедрены на пилотном производстве ГНЦ РАМН (лицензия на производство лекарственных средств №64/180-Л/03) и вошли в состав Пускового регламента «Производство концентрата фактора IX» и Фармакопейной статьи предприятия на препарат Агемфил В.

Разработаны методики обработки донорской плазмы инактивирующими агентами, хроматографичекого удаления инактиваторов из донорской плазмы после ее обработки с целью вирусной инактивации и контроля остаточного содержания инактиваторов. Аналогичные методики применяются за рубежом, но в работе использованы новые отечественные сорбенты, позволяющие упростить технологический процесс удаления инактиваторов.

Разработаны и апробированы методы контроля препарата, позволяющие оценить его качество, эффективность и безопасность.

Подготовлены проект лабораторной технологической инструкции получения препарата «Плазма для переливания» со сниженным риском передачи ВИЧ, гепатит-инфекций, включающий стадии обработки донорской плазмы химическими инактиваторами и хроматографическое удаление инактиваторов после обработки, и перечень методов контроля качества препарата «Плазма для переливания» со сниженным риском передачи ВИЧ, гепатит инфекций.

Завершены лабораторные экспериментальные испытания.
Противошоковый плазмозаменитель на основе гидроксиэтилированного крахмала и технология его производства (Гематологический научный центр; Ассоциация «Общество энтерального и парентерального питания»; ООО «Синтвита»)

Проведены клинические испытания высокоэффективного противошокового плазмозаменителя на основе гидроксиэтилированного крахмала (ГЭК). Для подтверждения заявленного срока годности препарата проведено изучение стабильности субстанции и препарата при хранении. На основании полученных результатов проведена корректировка документации, выпущены опытно-промышленный регламент и фармакопейная статья предприятия. Подготовлены, согласованы и утверждены: отчет по клиническим испытаниям; итоговые таблицы стабильности ГЭК, субстанции и препарата; ФСП на субстанцию и препарат; ТУ на ГЭК, опытно-промышленные регламенты на ГЭК, субстанцию и препарат.

Пакет документов на препарат направлен в Росздравнадзор для получения разрешения на применение в практике.
Исследование возможности получения альбумина человека рекомбинантным способом (Гематологический научный центр; ИБХ РАН; Ассоциация «Общество энтерального и парентерального питания»)

Разработан способ выделения и очистки рекомбинантного альбумина из сырца. Оптимизированы способ выделения рекомбинантного альбумина из сырца, процесс выделения рекомбинантного альбумина из культуральных сред, процесс ультрафильтрации продуктов рекомбинантного синтеза альбумина, процесс лиофилизации продуктов рекомбинантного синтеза альбумина. Отработаны процессы очистки рекомбинантного альбумина методом осаждения и хроматографическими методами. Показана перспективность такого производства относительно вирусной безопасности.

Разработана методика определения одного из важнейших показателей качества альбумина – его молекулярно массового распределения с помощью высокоэффективной эксклюзионной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Отработаны условия ВЭЖХ анализа, колонки, содержащие сорбенты, специфичные для данных объектов. Экспериментальная проверка данной методики подтвердила ее эффективность на образцах альбумина, содержащих различные примеси, в том числе и имеющие разное содержание мономеров, димеров, полимеров и агрегатов.

Результатом работы явился дизайн и сборка пилотной установки, проведение цикла очистки по разработанной схеме и наработка 100 мг препарата ЧСА для подхода к анализу контаминаций с последующим выходом на доклинические испытания.

Способ оценки гемостатического эффекта жидких кровоостанавлиявающих средств осуществляется следующим образом: после проведения коагулологических анализов в 1 мл стабилизированной цитратом натрия в соотношении 1 : 9 крови пациентов по каплям вводят (0,1-0,2 мл) кровоостанавливающее средство и при помощи стеклянной палочки перемешивают; включают секундомер и отмечают, в случае наличия гемостатического эффекта, образование сгустков крови за время не более 1 минуты.

Преимущества разработанного способа заключается в том, что оценка гемостатического эффекта жидкого кровоостанавливающего средства проводится в лабораторных условиях на стабилизированной крови пациентов после коагулологических анализов, а не на крови животного в ходе эксперимента; значительно сокращается время оценки гемостатического эффекта за счет исключения процедуры экспериментов на животных; результат оценки более корректен, т.к. биохимический состав крови человека отличается от такового у животных.

Имеется патент РФ (№2286569 от 27.10.06 г.).

Способ оценки гемостатического эффекта жидких кровоостанавлиявающих средств используется в НЦССХ им. А.Н.Бакулева при разработке рецептур медицинских клеев.
Биотехнология получения клеток-биореакторов для переработки эндогенного аммиака на основе эритроцитов человека (Гематологический научный центр)

Проведено исследование кинетики ферментов, принимающих участие в метаболизме аммиака, и предложена методика введения ферментов метаболизма аммиака в систему базового энергетического метаболизма эритроцитов человека. Разработана биотехнология введения ферментов глутаматдегидрогеназы и аланиндегидрогеназы в эритроциты с помощью метода осмотического диализа, основанного на специфических свойствах мембраны эритроцита; определены условия введения ферментов в клетку, которые позволяют эритроциту длительное время оставаться в кровотоке, выполняя функции биореактора.

Создана экспериментальная лабораторная установка для введения в эритроциты человека ферментов метаболизма аммиака методом гипоосмотического диализа.

Результаты исследования предполагается использовать для снижения концентрации аммиака в крови.

5. 
   Дерматология
   

Разработан метод оценки результативности лечения атопического дерматита (дерматологических заболеваний) с использованием макроморфометрической оценки площади патологически измененной кожи. Способ включает наложение на тело пациента метрической сетки на прозрачном пластичном носителе, измерение до и после лечения пациента площади очага высыпаний или средней плотности диссеменированных высыпаний по двум и более участкам по принципу морфометрической оценки.

Имеется решение о выдаче патента РФ на «Способ оценки эффективности лечения дерматологических заболеваний» (заявка № 2006101661/14 (001794) от 20.01.2006 г.).

Проведены клинические испытания.

Разработан метод получения постнатальных культур фибробластов кожи человека, который включает три этапа: забор биоптата кожи человека, получение клеточной культуры фибробластов и хранение клеточной культуры. Первичную клеточную культуру фибробластов получают посредством обработки биоптата кожи протеолитическими ферментами с последующим культивированием в специально подобранных средах и условиях, способствующих выделению большого количества пролиферативно-активных, жизнеспособных фибробластов. После получения необходимого количества клеток часть из них криоконсервируют для дальнейшего хранения с возможным последующим использованием в эстетической медицине.

Имеется разрешение Росздравнадзора на применение разработанной технологии в практике (регистрационное удостоверение № ФС-2006/137 от 22 июня 2006 года).

1.6. Иммунология
Способ диагностики дефектов функции адгезии лейкоцитов периферической крови к эндотелиальным клеткам (НИИ экспериментальной медицины, НИИ акушерства и гинекологии им. Д.О.Отта)

Сущность способа состоит в том, что в лунки, содержащие однородный монослой эндотелиальных клеток перевиваемой линии эндотелиальных клеток человека (ЕА.Ну926) вносят предварительно окрашенные витальным флуоресцентным красителем (CFSE) мононуклеары периферической крови и культивируют в течение 30 мин. Адгезированные клетки вместе с монослоем эндотелиальных клеток переводят в суспензию путем 5-минутной экспозиции в растворе Версена. Полученную смесь клеток подвергают анализу при помощи проточного цитофлюориметра, что позволяет отличать окрашенные мононуклеары периферической крови от неокрашенных клеток линии ЕА.Ну926. Техническим результатом является количественная оценка степени адгезии мононуклеаров, выраженная подсчитанным соотношением мононуклеаров периферчиеской крови и клеток линии ЕА.Ну926.

Предлагаемый способ в отличие от известных аналогов позволяет проводить комплексную оценку процесса, выявлять нарушения адгезионной функции разных субпопуляций мононуклеаров, обладает высокой чувствительностью и воспроизводимостью результатов.

Проведенные клинико-лабораторные испытания доказали, что способ может быть использован для клинико-лабораторных диагностических исследований с целью выявления врожденных и приобретенных дефектов функции адгезии мононуклеаров крови у больных с различной патологией.

Определены тенденции и молекулярно-генетические основы возникновения вирулентных и слабопатогенных штаммов вирусов гриппа А, их эволюция в процессе взаимодействия вирусных популяций от диких птиц и домашних животных и формирование потенциальных, высоко эпидемических штаммов. Осуществлены изоляция, вирусологический и молекулярно-генетический анализ высоко патогенных вариантов вируса гриппа птиц H5N1; изучены их эволюционные связи с прототипными штаммами.

Полученные данные легли в основу для разработки научного прогноза развития возможной эпидемии гриппа в нашей стране и проведения своевременных противоэпидемических мероприятий. Сведения о выделенных штаммах и их биологической и генетической характеристиках были представлены в Национальный Институт медицинских исследований (Лондон, Великобритания), Центр по борьбе и профилактике заболеваемости (Атланта, Джорджия, США), а также в ВОЗ.

Картирование антигенных участков гемагглютинина вируса гриппа H5 (НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского)

На основании определения первичной структуры гена гемагглютинина (ГА) и компьютерного моделирования структуры белка ГА штаммов вируса гриппа птиц H5N1, депонированных в Государственную коллекцию вирусов, были впервые прокартированы антигенные участки ГА вируса гриппа H5 в трехмерной структуре молекулы, ответственные за связывание нейтрализующих антител. Установлена роль конформационных изменений нуклеокапсидного белка NP вируса гриппа в репродукции вируса. Показано, что гибель клеток при гриппе развивается по типу апоптоза или некроза.

Сведения об изменении иммунодоминантных эпитопов гемагглютинина вируса гриппа оперативно представляются в службу Госсанэпиднадзора Роспотребнадзора.

Это позволяет следить за эволюцией патогенности и чувствительности к лекарственным препаратам циркулирующих на территории РФ штаммов вирусов гриппа, а также за возможностью появления пандемических штаммов.

Определены распространенность и причины аутоиммунных реакций у ВИЧ-1-инфицированных к CD4 - главному рецептору вируса иммунодефицита. Методами фагового дисплея и мутационного анализа при помощи специального алгоритма выявлен конформационно-зависимый аутоэпитоп CD4. Показано, что аутоантитела образуются на измененную конформацию D4-домена CD4. Таким образом, впервые расшифрована этиология и показана возможность возникновения аутоиммунной агрессии в отношении конформационно- измененного участка собственного белка CD4.

Выявлена основа для разработки рациональной терапии данной патологии.
Цитомегаловирусная инфекция: выявление вируса и лечение (НИИ вирусологии им. Д.И.Ивановского)

Установлено, что активная цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) является фактором риска у женщин с невынашиванием беременности и подлежит лечению иммунокорригирующими препаратами. Показано, что лечение иммунокорригирующими препаратами (иммуноглобулин, т-активин, циклоферон и др.) активных форм ЦМВИ у женщин с невынашиванием беременности является одним из резервов уменьшения частоты акушерской патологии и перинатальных осложнений.

Изучена противовирусная активность восьми мембранотропных соединений, модифицированных адамантановыми и норборненовыми фармакоформами, в отношении цитомегаловируса человека. Показано, что два соединения Аs 688 и Аs 504 обладают способностью подавлять развитие ЦМВ инфекции в профилактической схеме и характеризуются низкой токсичностью для клеток человека.

Разработан комплекс лабораторных и клинических методов для повышения эффективности ранней диагностики и терапии цитомегаловирусной инфекции у недоношенных и маловесных новорожденных детей и детей раннего возраста.

Проведены клинические испытания.
Перспективные противогерпетические соединения (НИИ вирусологии им. Д.И.Ивановского)

На модели экспериментальной герпесвирусной инфекции, обусловленной вирусом простого герпеса 1 и 2 типов, в культуре клеток VERO определена противовирусная активность препарата Мирамистин ЗАО «Инфамед», а также противовирусная активность этого препарата в сочетании с препаратами Фоскарнет и Зовиракс. Препарат Мирамистин в моноварианте обладал вирулицидным действием при ВПГ 1 и ВПГ 2 инфекциях, а также противовирусной активностью как при профилактическом, так и (в меньшей степени) при лечебной схеме применения. Сочетанное применение препарата Мирамистин с препаратами Фоскарнет и Зовиракс позволило сделать вывод, что они могут быть успешно использованы для профилактики ВПГ-инфекции в меньших концентрациях, чем каждый из использованных препаратов в отдельности.

Показано, что новые отечественные препараты Фуллевир и Киллевир в чувствительных клеточных культурах, инфицированных вирусом герпеса, угнетают репродукцию вируса герпеса 1 типа.
Методические рекомендации «Герпес-вирусные инфекции» (НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи)

В методических рекомендациях освещены вопросы эпидемиологии, патогенеза, клинической и лабораторной диагностики и лечения герпес- вирусных инфекций. Подробно изложены вопросы влияния герпетической и цитомегаловирусной инфекций на беременность, плод, новорожденного, тактика ведения беременных, инфицированных этими возбудителями. Приводится информация о современных методах специфической диагностики этих инфекций. В разделе лечения широко представлены данные о противовирусных и иммунотропных средствах, применяемых для терапии заболеваний, вызванных герпес- вирусами.

Методические рекомендации утверждены Комитетом здравоохранения г. Москвы.

Реализовано в практике работы Инфекционной клинической больницы № 1 г. Москвы.

Установлено, что Суперлимф, предназначенный в качестве иммунотропного препарата для лечения гнойно-воспалительный процессов, подавляет цитопатическое действие вируса простого герпеса 1 и 2 типов в культуре клеток Vero. Препарат способен: блокировать вирусную инфекцию на клеточном уровне путем снижения синтеза вирусной ДНК и угнетения экспрессии гликопротеида вирусной оболочки gH, в результате чего происходит нарушение проникновения вирусного потомства в клетку-мишень; увеличивать экспрессию вирусной тимидинкиназы, которая принимает непосредственное участие в активации Ацикловира, таким образом может повышать активность Ацикловира при комбинированной терапии.

С помощью электронной микроскопии был продемонстрирован прямой противовирусный эффект препарата, который проявлялся образованием дефектных вирусных частиц, лишенных вирусной оболочки (нуклеокапсидов). Обнаружено пятикратное увеличение количества нуклеокапсидов в опыте (вируссодержащий материал, обработанный препаратом) относительно контроля.

Противовирусное действие препарата и эффективность его использования для лечения генитального герпеса подтверждены клинически.

Предложены экспериментальные модели острой и хронической ВГС- инфекции в культурах клеток и на животных для разработки эффективных тест-систем и вакцин против гепатита С (ВГС), а также для скрининга и изучения активности противовирусных лекарственных соединений и препаратов. Проверено более 10 соединений разной химической структуры. Созданные модели расширили возможности испытания новых противовирусных соединений, в том числе создаваемых на основе методов генной инженерии и нанотехнологий. Показана способность рекомбинантных ДНК-плазмид, кодирующих белки core и NS5А ВГС, вызывать клеточный и гуморальный ответы (на модели лабораторных мышей). Выявление спектра В- и Т-клеточных эпитопов, стимулированных ДНК-плазмидами, проводили с помощью ВГС-специфических антигенов: 11 синтетических пептидов и 13 рекомбинантных белков. Установлено, что ДНК-иммунизация мышей плазмидами стимулировала интенсивный клеточный иммунный ответ, направленный к широкому диапазону эпитопов белков core и NS5А ВГС. Методом ИФА у иммунизированных животных был выявлен также гуморальный иммунный ответ на суррогатные белки ВГС.

Охарактеризована роль хронической инфекции гепатита С на модели лабораторных животных, позволяющей испытывать противовирусные лекарственные препараты «ин виво».
Новые методы комбинированной терапии вирусных гепатитов (НИИ вирусологии им. Д.И.Ивановского)

Проведено клиническое исследование терапевтической эффективности комбиниро-ванной противовирусной и иммунокорригирующей терапии (рекомбинантный интерферон-α + ламивудин + альфетин) гепатита В. Установлено, что комбинация противовирусных и иммунокорригирующих средств является эффективной у больных с HBeAg-позитивным гепатитом.

Проведена оценка терапевтической эффективности пегилированных интерферонов в сравнении с рекомбинантными альфа-интерферонами «короткого действия» у больных хроническим гепатитом С. Показано, что при применении пегилированного интерферона в сочетании с рибавирином в течение 6-10 месяцев (в зависимости от генотипа HCV) полная вирусологическая и биохимическая ремиссия при 1в генотипе HCV была достигнута у 65% больных ХГС, в то время как у пациентов, получавших только рекомбинантный интерферон альфа, полная ремиссия после окончания лечения наступала в 2 раза реже (30-32%).

Рекомендации по использованию комбинированной терапии вирусных гепатитов представлены в Росздравнадзор.

Предложены новые схемы лечения гепатита С, основанные как на комбинации традиционных препаратов, используемых для лечения гепатита С с лекарственным препаратом «Фосфоглив», так и только на использовании препарата «Фосфоглив» (капсулы и лиофизат для приготовления раствора для в/в введения). Разработка новых схем лечения обусловлена тем, что больным с заболеваниями сердечно-сосудистой системы и почек терапия интерфероном противопоказана, а у ряда пациентов при терапии интерфероном и рибавирином наблюдается развитие побочных явлений.

Подготовлены методические рекомендации для врачей «Фосфоглив: применение в клинике», которые утверждены Департаментом здравоохранения г. Москвы (№ 22 – 2006 г.)

Внедрено в практику работы ИКБ № №3, Медико-санитарной части №1 АМО ЗИЛ (г. Москва).

Показано, что любое заболевание, возникшее после укуса иксодовых клещей, следует рассматривать как потенциальную микст инфекцию (группа иксодовых клещевых боррелиозов, моноцитарный анаплазмоз и гранулоцитарный эрлихоз человека и др.). Это требует принципиально нового подхода к дифференциальной диагностике и терапии моно- и микст- инфекций данной группы.

Подготовлены методические рекомендации «Инфекции, передающиеся иксодовыми клещами в Пермском крае (этиология, патогенез, клиника, диагностика, лечение и профилактика)».
1.7.2. Бактериальные и паразитарные инфекции
Диагностика и прогноз развития острых кишечных инфекций (НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи)

Разработан метод ультраструктурного анализа микроорганизмов в различных материалах, получаемых от больных кишечными инфекциями. Отличительными особенностями предложенного метода являются: возможность визуализировать бактерии-возбудители в биологическом материале при отсутствии их роста на питательных средах; возможность выявить в образцах бактерии с измененными ростовыми свойствами (Л-формы и некультивируемые формы); возможность определить состав бактериальной микрофлоры в образцах, представленных смешанными бактериальными сообществами, выявить состав смешанных микробных сообществ (вирусно-бактериальных, грибково-бактериальных и т.д.). Особое внимание уделено морфо-функциональным изменениям циркулирующих в крови возбудителей кишечных инфекций, соответствующих периодам заболевания.

Полученные данные о характере морфофункциональных изменений бактерий возбудителей в динамике острого инфекционного циклического процесса позволяют обосновать рациональные подходы к лечебной тактике.

Проведены клинические испытания.

Технология утверждена Департаментом здравоохранения Правительства Москвы (Протокол №6, февраль 2006 г.)

Способ моделирования кандидозной инфекции у экспериментальных животных (Научный центр клинической и экспериментальной медицины; Новосибирский ГМУ Росздрава)

Способ моделирования кандидозной инфекции у экспериментальных животных основан на введение in vivo животному клеток возбудителя кандидозной инфекции. Беременным самкам вводят наркотическое вещество, применяемое при внутриполостных операциях, делают разрез брюшной стенки в области матки, вводят в плаценту каждого плода не менее 0,5*10⁶ клеток возбудителя кандидозной инфекции в изотоническом растворе, затем зашивают брюшную стенку.

Имеется патент РФ (№2289853 20.12.2006 г.).

Используется в научном процессе как биологическая модель в НЦКЭМ СО РАМН и на кафедре патологической анатомии Новосибирского ГМУ.

Установлен характер минерализации костной ткани у подростков в период формирования пиковой костной массы. Выявлен значимый вклад не только факторов, определяющих генетический вариант индивидуума (рост, вес, индекс массы тела, мышечная сила, возраст начала менструаций (для девочек), но и вклад факторов, способных модифицировать генетический вариант (адекватное потребление кальция с пищей и физические нагрузки). Выявлены особенности минерализации различных участков скелета в зависимости от пола. Обоснована диагностика «сниженной плотности кости относительно хронологического возраста» у подростков обоего пола в возрасте до 20 лет. Выявлены значимые различия в средних значениях возрастных показателей величины костного минерала и минеральной плотности кости популяционной выборки московских подростков и референтной педиатрической базой используемого остеоденситометра, что требует создание адаптированной национальной базы для остеоденситометров.

Показана социальная значимость остеопороза (ОП) для практического здравоохранения: выявлена высокая частота остеопороза и его осложнений – переломов позвоночника и периферических костей. Представлены данные о факторах риска ОП, среди которых наибольшее значение имеют возраст, вес и индекс массы тела (ИМТ), а также семейная предрасположенность и переломы в анамнезе, что может служить основой для выделения групп риска с целью организации профилактических программ.

На основе проведенного длительного наблюдения за пациентами с естественной динамикой МПКТ и в ходе назначения профилактических мероприятий, как с использованием лекарственных препаратов, так и рекомендаций по изменению двигательной активности и питанию, получены объективные доказательства эффективности и безопасности применения препаратов кальция и витамина D для первичной профилактики ОП.

Результаты изучения эффективности новых лекарственных препаратов класса бисфосфонатов (алендронат, ибандронат) для вторичной профилактики ОП показали, что эти препараты могут использоваться в практическом здравоохранении для выработки минимального курса лечения и показаний для длительной терапии.
Клинико-психологичекая оценка эффективности структурно-резонснсной электромагнитной терапии (СРЭМ) в комплексном лечении больных остеоартрозом (НИИ клинической и экспериментальной ревматологии; Волгоградский ГМУ Росздрава)

Показана высокая эффективность метода лечения больных остеоартрозом, включающего применение СРЭМ терапии. Установлено, что СРЭМ терапия оказывает выраженные анальгетический и противовоспалительный эффекты, способствует нормализации клинико-лабораторных и психологических показателей, создает условия для самоорганизации функциональных комплексов, активизирует адаптационные механизмы.

Внедрено в практику работы Клинической больницы скорой медицинской помощи № 25 г. Волгограда.
Клинико-патогенетическое значение исследования активности дигидрооротатдегидрогеназы в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови при ревматических заболеваниях суставов (НИИ клинической и экспериментальной ревматологии; Волгоградский ГМУ Росздрава)

У больных ревматоидным артритом, остеоартрозом и подагрическим артритом выявлены существенные изменения активности дигидрооротатдегидрогеназы в лимфоцитах, эритроцитах и плазме крови, зависящие от нозологической формы, клинических особенностей заболеваний. Выявленные изменения энзимной активности способствуют уточнению отдельных метаболических звеньев патогенеза ревматических заболеваний суставов, свидетельствуют об участии их в патогенезе изменений в ферментных системах обмена пиримидиновых нуклеотидов. Предложены энзимные тесты для диагностики активности патологического процесса при ревматоидном артрите, остеоартрозе и подагрическом артрите.

Проведены клинические испытания.

Внедрено в практику работы Клинической больницы скорой медицинской помощи № 25 г. Волгограда.

Проведена оценка возможности использования методов функциональной диагностики (Лазер Допплер флоуметрия (ЛДФ), поток-зависимая вазодилатация плечевой артерии) для диагностики сосудистых нарушений и дифференцированного подбора и контроля эффективности проводимой терапии. Установлено, что у пациентов с системной красной волчанкой (СКВ) и системной склеродермией (ССД) выявляются нарушения регуляции сосудистого тонуса, как на уровне микроциркуляции, так и на уровне артерий среднего калибра.

Лазерная Допплеровская флоуметрия выявляет изменения местной регуляции у пациентов с ССД, что подтверждает наличие нейро-эндотелиальных нарушений в ее патогенезе, определяется их слабая ассоциация с выраженностью сосудистого синдрома и неспецифичность при разных вариантах синдрома Рейно. Отсутствие тесных клинических корреляций, в том числе и в динамике, требуют уточнения возможности использования ЛДФ в оценке эффективности проводимой терапии сосудистых нарушений. Вазомоторная активность сосудов среднего калибра снижена в большей степени у пациентов с ССД, чем при СКВ в отсутствии традиционных факторов риска сердечно-сосудистых заболеваний. Тенденция к системной эндотелиальной дисфункции у пациентов с ССД (подтверждаемая нарушением эндотелиального звена механизмов регуляции кровотока) ассоциируется как с «болезнь-опосредованными» сосудистыми нарушениями (дигитальные язвы, легочная гипертензия), так, в большей степени, с маркерами сердечно-сосудистых заболеваний.

При СКВ процент прироста диаметра плечевой артерии ассоциируется преимущественно с классическими факторами риска атеросклероза и, возможно, является его ранним субклиническим признаком.

Оценка поток-зависимой дилатации плечевой артерии с помощью ультрасонографии внедрена в клиническую практику и используется для ранней диагностики атеросклероза у больных ССД и СКВ, а также для оценки воздействия противоревматических препаратов на сердечно-сосудистую систему.

С целью уточнения практической значимости и экономической целесообразности исследования продолжаются на больших группах больных.

Разработанный способ включает прием пациентом витамина В6 и магния. Дополнительно пациент ежедневно принимает витамины А, Е, С, D, В1, В2, В12, пантотеновую кислоту, фолиевую кислоту в комплексе с кальцием. Прием всех витаминов и микроэлементов осуществляется в дозах, не превышающих суточной потребности организма, в течение 2-4 недель; курс лечения повторяют не менее двух раз в год.

Имеется патент РФ на изобретение «Способ коррекции недифференцированной дисплазии соединительной ткани» (№ 2290175 от 27.12.06 г.).

Проведены клинические испытания.

Внедрено в практику работы Поликлиники Новосибирского ГТУ; Городской проликлиники №16 (г.Новосибирск).
Комплексная оценка исходов ревматоидного артрита и системной красной волчанки (Институт ревматологии)

Проведено долговременное когортное исследование по комплексной оценке исходов заболеваний 620 пациентов с ревматоидным артритом (РА) и 200 пациентов с системной красной волчанкой (СКВ) со средней длительностью болезни 10-15 лет.

При РА 77,5% больных потеряли трудоспособность, 10-летняя выживаемость составила 94,3%, 15-летняя – 61,7%, 20-летняя – 34,5%. Главной причиной смерти больных были кардиоваскулярные катастрофы (ОИМ и НМК), летальный исход был ассоциирован с активностью болезни, деструкцией мелких и крупных суставов, системными проявлениями, наличием осложнений (остеонекроз, остеопороз, амилоидоз). Выявлена ассоциация с возрастом начала болезни ≥50 лет осложнений РА: остеопороза с компрессией позвонков и переломами периферических костей, остеонекрозов. Доказано, что патогенетическая терапия улучшает отдаленный исход РА при соблюдении основных принципов: 1) начало базисной терапии на 1 году болезни; 2) последовательное проведение с планомерной сменой препаратов («пилообразная» стратегия).

При СКВ рецидивирующее течение наблюдалось у 115 (57,5%), стойкая ремиссия ≥5 лет - у 54 (27%) больных, 29 (13,5%) больных – в ремиссии без поддерживающей терапии. Умерли 11 (5,5%) больных, основные причины: кардиоваскуляные катастрофы, инфекции, активность СКВ. Выявлены признаки резистентности к терапии при СКВ: генерализованный васкулит, антифосфолипидный с-м, тромбоцитопения. Основным методом преодоления резистентности является проведение интенсивной терапии (включая синхронную программную интенсивную терапию).

Результаты работы способствуют оптимизации методов ведения больных, снижению стойкой нетрудоспособности и летальности.

Конкурентоспособность работы обеспечивается большими размерами когорт больных и длительностью проспективного наблюдения, соответствием примененных методик лучшим международным стандартам когортных исследований.

Изучена активность аденозиндезаминазы, адениндезаминазы, АМФ-дезаминазы, гуаниндезаминазы, гуанозиндезаминазы, гуанозинфосфорилазы, ксантиндегидрогеназы, ксантиноксидазы, 5'-нуклеотидазы, пуриннуклеозидфосфорилазы в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных ревматоидным артритом, остеоартрозом, подагрическим артритом, анкилозирующим спондилоартрозом, системной красной волчанкой, системной склеродермией. Выявлены существенные изменения активности энзимов пуринового метаболизма при ревматических заболеваниях, зависящие от их клинических особенностей (степени активности патологического процесса, характера течения, клинико-анатомической формы, стадии), которые позволили уточнить некоторые биохимические звенья патогенеза ревматических заболеваний суставов и диффузных болезней соединительной ткани. Предложены энзимные тесты, способствующие ранней и дифференциальной диагностике ревматических заболеваний.

Проведены клинические испытания.

Внедрено в практику работы Клинической больницы скорой медицинской помощи № 25; Клинической больницы № 28; больницы № 18; Областного клинического госпиталя ветеранов войн (г. Волгоград).

Разработан способ снижения содержания ДНК-содержащих циркулирующих иммунных комплексов путем пропускания крови через оригинальный гранулированный магнитоуправляемый препарат с иммобилизированной ДНКазой I на основе полиакриламидных гранул с магнитными свойствами, полученный методом эмульсионной полимеризации в потоке газообразного азота.

Предложенный способ обеспечивает увеличение эффективности и уменьшение расхода препарата по сравнению с прототипом (ДНКаза I, иммобилизированная на нейлоновых шариках диаметром 1 мм) за счет более высокой удельной активности и возможности эффективной многократной регенерации, упрощения манипуляций с препаратом и возможности поддержания взвешенного состояния гранул препарата в процессе сорбции, что повышает рабочую площадь сорбции, а также снижает травматизацию форменных элементов перфузируемой крови.

Предложенный способ очистки крови может быть использован в качестве дополнительного метода экстракорпоральной терапии системной красной волчанки.

Подана заявка на изобретение (№ 2007105420/15(005879).

Завершены экспериментальные исследования.

Разработаны:

1. Алгоритм выявления неблагоприятных реакций на лекарственные препараты, заключающийся в диагностике и регистрации возникающих неблагоприятных явлений в карте стационарного больного, и при обнаружении не менее двух из перечисленных ниже признаков:

- поддающейся оценке вредной или неблагоприятной реакции, возникшей в период применения препарата;

- прогнозируемого риска дальнейшего назначения этого препарата;

- показаний для профилактического или специфического лечения проявлений неблагоприятной реакции лекарства;

- оснований для изменения дозового режима;

- оснований для отмены препарата

заполняется специальная карта с целью анализа достоверности причинно-следственной связи применения лекарственного препарата и исхода лечения.

Антиревматические препараты:

- базисные противовоспалительные (метотрексат, лефлуномид, делагил, плаквенил, азатиоприн, хлорбутин, циклофосфан, циклоспорин);

- нестероидные противовоспалительные (диклофенак, мовалис, нимесулид, напроксен, бруфен, пироксикам, целебрекс);

- глюкокортикоиды (преднизолон, метипред)

2. Специальный опросник фармакологического анамнеза.

На основании использования алгоритма выявления, оценки причинно-следственной связи, фармакологического анамнеза установлено, что возникновение неблагоприятных реакций, обусловлено как фармакологическими механизмами действия антиревматических препаратов, так и медикаментозными ошибками. Это позволило оптимизировать не только выявление, но и предупреждение неблагоприятных реакций у больных ревматическими заболеваниями. В целом неблагоприятные реакции выявляются у 7% стационарных больных ревматическими заболеваниями в период их госпитализации, а в поликлинических условиях антиревматические препараты отменяются из-за неблагоприятных реакций у трети больных.

Выявлены не только неблагоприятные реакции на антиревматические препараты, но и установлены их характер и частота возникновения.

Реализовано в практике работы клиники Института ревматологии.
1.8.1. Травматология и ортопедия
Способ определения нестабильности позвоночно-двигательных сегментов в пояснично-крестцовом отделе позвоночника (Научный центр реконструктивной и восстановительной хирургии Восточно-Сибирского НЦ)

Медицинская технология определения нестабильности позвоночно-двигательных сегментов (ПДС) в пояснично-крестцовом отделе позвоночника осуществляется методом функциональной спондилографии с отягощением. Новым в предлагаемой технологии является то, что разработанный способ, основанный на комбинации методов биомеханики и рентгенографии, позволяет верифицировать нестабильность ПДС и выявлять смещения позвонков на ранних этапах формирования дегенеративного процесса позвоночника. Измерение у пациентов расстояния от остистого отростка С_VII до S_I и веса необходимо для расчета смещения тел позвонков с учетом индивидуальных особенностей телосложения.

Способ позволяет объективно выявить скрытую патологическую подвижность в позвоночно-двигательных сегментах пояснично-крестцового отдела позвоночника. Установлено, что чем больше угол наклона туловища в сагиттальной плоскости, тем большее давление испытывает межпозвоночный диск и тем выше риск развития нестабильности. Способ позволяет своевременно определить тактику лечения и предупредить развитие нежелательных осложнений. Для реализации данной технологии используется рентгеновский аппарат, угломер, весы медицинские.

Получено решение о выдаче патента РФ (заявка № 2006117625/14(019184) от 30.10.2007 г.).

Проведены клинические испытания.

Технология направлена в Росздравнадзор для получения разрешения на применение в практике.

Разработан новый метод стабилизации позвоночного сегмента при хирургическом лечении дегенеративных заболеваний позвоночника путем имплантации в межпозвонковое пространство раздвигающихся кейджей собственной конструкции. Выполнение межтелового спондилодеза после декомпрессирующего этапа операции показано в следующих случаях: дегенеративной нестабильности позвоночного сегмента, подтвержденной функциональными пробами, и стабильном спондилолистезе I степени; лицам молодого возраста, ведущим активный образ жизни; пациентам с избыточным весом. После проведения операций по вышеописанной методике активизация больных происходит значительно быстрее, внешняя иммобилизация не проводилась даже в раннем послеоперационном периоде.

Предложенный способ малоинвазивного межтелового спондилодеза обладает следующими преимуществами: установка кейджей в межтеловое пространство происходит через междужковое пространство; после внедрения имплантатов в межтеловое пространство нет необходимости в установке транспедикулярных и других фиксирующих систем, т.к. стабильность сегмента обеспечивается самими кейджами; восстановление поясничного лордоза, что достигается за счёт возможности углового дозированного раскрытия кейджей в межпозвонковом промежутке; возможность образования спондилодеза благодаря размещению в полости кейджа аутокости или синтетического биоматериала.

Опыт применения раздвигающихся кейджей данной конструкции показал, что метод является простым в исполнении, не связан с техническими трудностями, инструмент для их установки удобен и прост при использовании и, что немаловажно, метод не связан с большими финансовыми затратами.

Имеется патент РФ на изобретение «Устройство для восстановления высоты межпозвонкового промежутка и фиксации позвонков и инструмент для его установления» (№ 2210 343 от 20.08.2003 г.).

Проведены клинические испытания

Внедрено в практику работы РНЦХ РАМН.
Технология оценки хирургического лечения дегенеративных поражений межпозвонковых дисков пояснично-крестцового отдела позвоночника (НИИ нейрохирургии им. Н.Н.Бурденко)

Разработанная технология объективной оценки эффективности хирургического лечения дегенеративных поражений межпозвонковых дисков пояснично-крестцового отдела позвоночника основана на использовании специально разработанной шкалы клинического обследования. На основании данных, получаемых после заполнения шкалы, оптимизирован подход к выбору тактики лечения пациентов.

Внедрение данной методики в клиническую практику минимизирует временные затраты на лечение, так как имеется возможность динамически наблюдать за состоянием пациента до и после начала лечения.

Реализовано в практике работы НИИ нейрохирургии РАМН.

Разработана технология получения радиофармпрепарата (РФП) «¹⁸⁸ Re-КОЭДФ», которая предусматривает производство набора генераторов, позволяющих получать РФП в клинических условиях непосредственно перед инъекцией больному для паллиативного лечения метастазов в скелет.

Полученный ¹⁸⁸ Re-КОЭДФ не уступает по качеству аналогам (⁸⁹Sr –хлорид и ¹⁵³Sm-оксибифор) для лечения метастазов в скелет.

¹⁸⁸Re имеет оптимальные ядерно-физические характеристики для получения сцинтиграфического изображения и создания терапевтической поглощенной дозы ß-частицами с минимальным повреждающим эффектом здоровых органов и тканей. Одним из важных его достоинств является отсутствие необходимости централизованной поставки. Преимущество ¹⁸⁸Re состоит также в удобстве и доступности для применения в условиях клиники, так как он является генераторным радионуклидом. Генератор ¹⁸⁸Re позволяет получать элюат ¹⁸⁸Re для приготовления РФП ежедневно в течение 8 месяцев.

Применение разработанного РФП расширяет спектр препаратов для лечения онкологических заболеваний, что позволит отказаться от закупки зарубежных дорогостоящих аналогов. Технология приготовления и применения РФП в условиях клиники является экологически чистой, так как отсутствуют радиоактивные отходы.

На РФП «¹⁸⁸ Re-КОЭДФ» подготовлена нормативно-техническая документация. Проведены доклинические испытания.
Лечение поздних лучевых повреждений стволовыми клетками (Медицинский радиологический научный центр)

Разработан метод получения культур мезенхимальных стволовых клеток и кардиомиоцитов из аутологичного костного мозга человека (имеется лицензия Росздравнадзора ФС-2006/206), с помощью которого производятся стволовые клетки для проведения клеточной терапии.

Разработан метод лечения поздних лучевых повреждений различных тканей путем системной трансплантации пациентам мезенхимальных своловых клеток. Разработанный метод лечения может применяться у пациентов, у которых после курса лучевой терапии по поводу злокачественных новообразований развились радиационный пневмофиброз, поражение спинного мозга, радиционный ректит, радиационный цистит и т.д.

Имеется патент РФ на изобретение «Кондиционная среда, обладающая лечебным эффектом» (№ 2292212 от 27.01.07 г.).

Проведены клинические испытания.

Технология направлена в Росздравнадзор для получения разрешения на применение в практике.

Разработан новый подход в решении проблемы воздействия низко интенсивного облучения на здоровье человека, новизна которого заключается в прогнозировании последствий облучения на основе прямых оценок радиационного риска.

Установлено, что группу повышенного радиационного риска представляют ликвидаторы, дозы облучения которых превышает 150 мЗв.

Выявлена зависимость радиационного риска лейкозов от времени. В период с 1988 по 1996 гг. риск положителен и статистически значим. За период с 1997 по 2001 гг. радиационный риск лейкозов не выявлен. Сделано предположение, что проблема индукции радиогенных лейкозов среди ликвидаторов в настоящее время не имеет той остроты, какой она была в первые 5-8 лет после облучения.

На основании проведенного статистического анализа заболеваемости раком щитовидной железы (ЩЖ) за период наблюдения с 1991 по 2001 гг. среди детей и подростков Брянской области сделаны выводы:

1. Заболеваемость раком ЩЖ среди населения Брянской области, которая была у детей и подростков (0-17 лет) на момент облучения в 1986 году, выше, чем по России в целом за тот же период. Стандартизованное отношение заболеваемости за период наблюдения равно 4.9 (4.2; 5.8 95% ДИ) для девочек и 8.8 (6.6; 11.5 95% ДИ) – для мальчиков.

2. Статистически значимый радиационный риск выявлен только для детей на момент облучения (0-14 лет). Избыточный относительный риск на единицу дозы 1 Зв равен 9.4 (3.0; 25.4 95% ДИ) и 29.6 (7.2; 74.6 95%) соответственно для девочек и мальчиков. Значение стандартизированного отношения заболеваемости за период наблюдения с 1991 по 2001 гг. равно 5.6 (4.6; 6.8 95% ДИ) и 10.2 (4.6; 13.6 95% ДИ) соответственно для девочек и мальчиков.

3. Анализ динамики коэффициентов риска (ERR на 1 Зв) за периоды наблюдения с 1991 по 1996 гг. и с 1997 по 2001 гг. показал, что радиационный риск уменьшается во времени для девочек и возрастает для мальчиков.

4. На основании прогноза заболеваемости раком ЩЖ с использованием разработанных коэффициентов риска можно ожидать, что в рассматриваемой популяции заболеваемость раком ЩЖ будет наблюдаться до 2050 года. За весь период с 1991 по 2060 гг. ожидается 2822 случая заболеваний среди женщин, из них 1293 радиогенные и 1529 – спонтанные раки. Для мужчин это число соответственно равно 392 и 147 случаев. Полное ожидаемое число радиогенных заболеваний равно 11685, спонтанных – 1676. Максимальный показатель заболеваемости (число случаев заболеваний за год) следует ожидать в период 2025-2030 гг.

На основании разработанного подхода сформированы контингенты населения, имеющие повышенную вероятность индукции радиогенных раков. При наличии индивидуальных демографических и дозиметрических данных (данные Российского Медико-дозиметрического Регистра) сформированы персональные группы повышенного онкологического и радиационного риска среди ликвидаторов – жителей России.

Сформированы группы населения, имеющие повышенный радиационный риск индукции рака ЩЖ, представлена их численность на уровне крупных населенных пунктов и ее картографическое представление. В группы риска в основном включены дети возраста 0-4 года на момент аварии.

Результаты исследования представлены в МЧС и Минздравсоцразвития России и были использованы при разработке нормативов радиационной безопасности и оценки медицинских последствий радиационных аварий.

Персональные списки групп повышенного радиационного риска направлены органам здравоохранения для проведения углубленных диспансеризаций для выявления заболеваний на ранних стадиях.

1.10. Наркология
Способ лечения наркозависимых подростков в остром периоде (НИИ экспериментальной медицины)

Разработан метод функциональной коррекции и лечения подростков с наркоманией в остром периоде на основе метода биоуправления, который показал высокую эффективность при лечении подростков с алкоголизмом, аддиктивными нарушениями, в том числе игровой зависимостью.

Имеется патент РФ «Способ лечения наркозависимых подростков с ЭЭГ-БОС» (2003 г.).

Внедрено в практику работы ГБ №3 им. Скворцова-Степанова, НИИ им. Бехтерева (г. Санкт-Петербург).

Разработка направлена на повышение качества оценки двигательного восстановления больных, перенесших инсульт, за счет того, что на фоне восстановительного лечения выполняется исследование с оценкой локализации очагов активации по данным функциональной МРТ. Исследование включает нервно – мышечную электростимуляцию в определенном режиме, вызывающую пассивное сокращение мышц конечности. Данный метод позволяет выявлять зоны мозговой активности конкретного больного, поскольку их локализация и размеры коррелируют с тяжестью неврологического дефицита. Это позволяет использовать данную разработку для прогнозирования и выработки тактики индивидуальных реабилитационных мероприятий.

Имеется патент РФ (№ 2 303 952 от 17.01.2007 г.).

Проведены клинические испытания.