Дифференцированный подход к диспансерному наблюдению детей и подростков из очагов туберкулезной инфекции (ЦНИИ туберкулеза)

Дифференцированный подход к диспансерному наблюдению детей и подростков из очагов туберкулезной инфекции (ЦНИИ туберкулеза)

Предложен метод комплексной оценки эпидемической опасности очага инфекции с учетом факторов риска и дифференцированный подход к превентивной химиотерапии с учетом эпидемической опасности очага (умеренная – степень опасности до 0,3; высокая – степень опасности 0,3-0,6; очень высокая – степень опасности выше 0,6). Актуальными являются данные по изучению генетической характеристики возбудителя в очагах методом сполиготипирования, однако для однозначной идентификации источника распространения туберкулезной инфекции необходимо использовать метод с большим разрешением: метод штаммового генотипирования по ПДРФ. Применение дифференцированных схем превентивной химиотерапии с учетом эпидемической опасности инфекции позволит снизить заболеваемость детей и подростков в очагах инфекции.

Имеется патент РФ на изобретение «Способ оценки эпидемической опасности очага туберкулезной инфекции для контактных детей и подростков» (№2307594 от 10 октября 2007г.).
1.21. Хирургия
Родственная трансплантация печени в педиатрии (Российский научный центр хирургии им. акад. Б.В.Петровского)

Разработана методика выбора вида и размера печеночного трансплантата при родственной трансплантации фрагментов печени детям различных возрастных групп в соответствии с возрастными и антропометрическими особенностями реципиента. Предложен протокол дооперационной диагностики у донора и реципиента с целью выяснения анатомического соответствия будущего трансплантата возрастным и антропометрическим особенностям реципиента и возможности его адекватной реваскуляризации, разработана программа вычисления КТ-объема требуемого фрагмента печени, позволяющая с высокой точностью прогнозировать его размер. Предложены безопасные методики операции у доноров по получению различных видов печеночных трансплантатов.

Имеется патент РФ на изобретение «Способ пересадки правой доли печени от живого родственного донора» (№2174826 20.10.2001г.).

Проведены клинические испытания.

Внедрено в практику работы РНЦХ РАМН.
Анестезиологическое обеспечение донорского этапа родственной трансплантации печени (Российский научный центр хирургии им. акад. Б.В.Петровского)

Разработан новый подход прецизионной адаптации метода обезболивания к характеру хирургического вмешательства, реализованный в виде рационального сочетания компонентов анестезиологического пособия. Предложены различные схемы оптимального применения компонентов анестезии соответственно этапам операции, что привело к минимизации интраоперационных осложнений, улучшению качества трансплантата и результатов хирургического вмешательства.

Клиническая апробация разработанной технологии анестезиологии позволила уменьшить количество послеоперационных осложнений, включая вопросы наведенной гипотермии, адекватной инфузионной терапии и послеоперационного обезболивания.

Предложенный алгоритм действий анестезиолога значительно укорачивает время нахождения пациента после оперативного вмешательства на ИВЛ.

Внедрено в практику работы Отделения трансплантации органов РНЦХ при проведении правосторонних гемигепатэктомий у живых родственных доноров.
Способ диагностики острого отторжения трансплантата почки по результатам исследования белкового состава мочи (Российский научный центр хирургии им. акад. Б.В.Петровского)

Установлено, что исследование белкового состава суточной мочи, проводимое в различные сроки после операции, у реципиентов аллопочки не только позволяет определять уровень и степень поражения нефрона, но и является информативным для дифференциальной диагностики острого отторжения трансплантата почки и хронической трансплантационной нефропатии, а также для определения причин ухудшения функции трансплантированных почек. Данное исследование является неинвазивным и безопасным для пациента, и, в отличие от пункционных биопсий, может проводиться достаточно часто, что важно для оптимизации режима иммуносупрессии в посттрансплантационном периоде.

Имеется патент РФ.

Проведены клинические испытания.

Внедрено в практику работы РНЦХ РАМН.
Метод реваскуляризации аваскулярных костных фрагментов васкуляризированными надкостнично-кортикальными аутотрансплантатами (Российский научный центр хирургии им. акад. Б.В.Петровского)

Предложен принципиально новый подход к реваскуляризации костной ткани на основе применения васкуляризированных надкостнично-кортикальных аутотрансплантатов. В основу разработанного метода положен принцип перестройки аваскулярной костной ткани в условиях хорошего кровоснабжения и наличия живых остеогенных клеток. Разработаны способы забора свободного реваскуляризируемого надкостнично-кортикального аутотрансплантата, а также способы формирования ложа, расположения его фиксации надкостнично-кортикального аутотрансплантата в реципиентной зоне. Данная технология может использоваться для реваскуляризации костной ткани при реконструкции костных фрагментов метаэпифизарной локализации, включающих суставную поверхность, реваскуляризации аваскулярных костных аутотрансплантатов, замещающих сложно-рельефные дефекты боковых стенок кости, реваскуляризации аваскулярных костных аутотрансплантатов и фрагментов реконструируемой кости при замещении протяженных дефектов длинных трубчатых костей.

Имеются патенты РФ (№ 2206287 от 20.06.2003г.; № 2210998 от 27.08.2003 г.; № 2207056 от 27.07. 2003 г.; № 2207078 от 27.07.2003 г.; №2231324 от 27.06.2004 г.; №2231326 от 27.06.2004 г.; № 2240069 от 20.11.2004 г.).

Проведены клинические испытания.

Внедрено в практику работы РНЦХ РАМН.
Метод формирования преддверия неовлагалища и малых половых губ при восстановительных операциях в урогенитальной области (Российский научный центр хирургии им. акад. Б.В.Петровского)

Разработан новый метод пластики преддверия неовлагалища с исполъзованием свободного расщепленного уротелиалъного лоскута и определены показания к его использованию при восстановительных операциях в урогенитальной области. Предложенная техника исключает развитие уретральных кровотечений в области преддверия и снизить риск нежелательных осложнений со стороны уротелиального листка в послеоперационном периоде, в то же время эстетический результат сопоставим с техникой, использующей полнослойный уретральный лоскут.

Имеется патент РФ на изобретение «Способ вагинопластики при лечении мужского транссексуализма» (№2269307 от 10.02.2006г.).

Проведены клинические испытания

Внедрено в практику работы РНЦХ РАМН.

1.22. Эндокринология
Способ дифференциальной диагностики фолликулярной аденомы, фолликулярной атипической аденомы, фолликулярного рака и фолликулярного варианта папиллярного рака щитовидной железы (Научный центр клинической и экспериментальной медицины; ООО «Микромед»)

Разработанный способ основан на морфологическом анализе, с помощью которого выявляют фолликулярные и папиллярные структуры, образуемые опухолевыми клетками, определяют наличие пролиферации эпителия, клеточной атипии, полиморфизма клеток и ядер, оптически «пустых» ядер, борозд ядер и внутриядерных цитоплазматических включений, направление распространения инвазивного роста опухоли. Определяют наличие соединительно-тканной капсулы, степень выраженности клеточной атипии и полиморфизма клеток и ядер, средние величины внешнего и внутреннего диаметров фолликула, величину относительной площади сосудов и фиброзирования. В зависимости от полученных данных проводят дифференциальную диагностику фолликулярной аденомы, фолликулярного рака и фолликулярного варианта папиллярного рака щитовидной железы.

Имеется патент РФ (№2300319 от 10.06.2007г.).

Проведены клинические испытания.

Реализовано в практике работы Дорожной клинической больницы на станции Новосибирск-Главный ОАО «Российские железные дороги».

Способ дифференциальной диагностики фолликулярной аденомы и фолликулярного рака щитовидной железы (Научный центр клинической и экспериментальной медицины; ООО «Микромед»)

Разработанный способ основан на оценке качественных цитологических признаков – наличия атипичных фолликулов, наслоения ядер клеток, наличия неравномерной структуры хроматина; определяется суммарная частота встречаемости каждого качественного цитологического признака в мазках щитовидной железы пациента. Анализ величин качественных цитологических признаков проводится с помощью компьютерной программы типа «нейронные сети», предварительно обученной различать фолликулярный рак и фолликулярную аденому щитовидной железы.

Имеется патент РФ (№2293524 20.02.2007 г.).

Проведены клинические испытания.

Реализовано в практике работы НУЗ Дорожная клиническая больница на станции Новосибирск-Главный ОАО «Российские железные дороги».
Комплексное лечение синдрома диабетической стопы (НИИ клинической и экспериментальной лимфологии)

Разработан комплекс технологий лечения больных с синдромом диабетической стопы (СДС) с использованием лимфоцитафереза, внутриартериального или местного введения модифицированных аутолимфоцитов и межостистых лимфотропных лимфостимулирующих инъекций.

Лимфоцитаферез выполняется на сепараторе клеток крови «Haemonetics MSC+», США или AS-TEС.204 фирмы «Fresenius» с выделением аутолимфоцитов, которые затем подвергаются инкубации in vitro с иммуномодулятором (глутоксим 3%-1 мл или полиоксидоний 6 мг) в течение 45 минут при температуре 37-37,5С в термостате ТС 1/20. После окончания времени инкубации производится реинфузия обработанных аутолимфоцитов внутривенно капельно.

Для регионарного введения аутолимфоцитов выбирается артериальный сосуд пораженной нижней конечности – бедренная артерия соответствующей стороны. Местное применение аутолимфоцитов осуществляется в виде ежедневных аппликаций в составе сорбционной композиции на поверхность язвы.

Лимфотропная терапия представляет собой межостистые инъекции лекарственной смеси (лидаза, лидокаин, кетанов) на уровне 1-5 поясничных позвонков.

Предложенный комплекс терапии позволяет качественно корригировать нарушения гемолимфоциркуляции, явления хронического воспаления и эндотоксикоза, усиливать процессы репарации при СДС.

Имеются патенты РФ на изобретения: «Способ лечения трофических язв на фоне синдрома диабетической стопы» (№2228204 от 10.05.2004 г.); «Способ лимфостимуляции при нарушениях гемолимфоциркуляции нижних конечностей у больных с синдромом диабетической стопы» (№2294767 от 10.03.2007 г.). Подана заявка на изобретение «Способ лечения трофических язв и гнойных ран на фоне синдрома диабетической стопы» (№ 2005126649 от 2007 г.).

Проведены клинические испытания.

Материалы на новую медицинскую технологию направлены в Росздравнадзор для получения разрешения на применение в практике.
Способ лечения гипоталамического синдрома (Научный центр медицинской экологии Восточно-Сибирского научного центра)

Основу предложенного метода лечения гипоталамического синдрома пубертатного периода (ГСПП) составляет последовательное применение электромагнитного излучения КВЧ-диапазона на рефлексргенные точки, направленное на нормализацию процессов перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты, а также гормонального и неврологического статуса. При воздействии КВЧ-волны оказывают нормализующее действие на гипоталамо-гипофизарную область.

В процессе лечения с помощью разработанной методики наблюдается существенный регресс клинической симптоматики, биофизических и лабораторных данных у больных с ГСПП.

Имеется патент РФ (№ 2299721 от 27.05.07 г.).

Внедрено в практику работы Иркутской областной детской клинической больницы, клинику НИИ педиатрии НЦМЭ ВСНЦ.
Способ лечения гипоталамического синдрома у девушек и женщин (Научный центр медицинской экологии Восточно-Сибирского научного центра)

Основу предложенного метода лечения составляет последовательное воздействие гомеопатических препаратов плацента-композитум, тонзила-композитум, церебрум-композитум, овариум-композитум на акупунктурные точки.

Клиническая апробация разработанной методики показала существенное улучшение клинической симптоматики и лабораторных данных при хорошей переносимости лечения.

Имеется патент РФ (№ 2306919 от 27.09.07 г.).

Разработанная технология может быть использована врачами-рефлексотерапевтами в эндокринологических, гинекологических, неврологических отделениях ЛПУ (амбулаторных и стационарных) и санаторно-курортных учреждениях.

Внедрено в практику работы Иркутской областной детской клинической больницы, клинику НИИ педиатрии НЦМЭ ВСНЦ.

Набор «Тех-Фибриноген-тест» предназначен для определения концентрации фибриногена в плазме крови человека при использовании коагулометров разных конструкций. Определение концентрации фибриногена применяется для диаг­ностики приобре­тенной недостаточности этого белка (ДВС-синдром, тяжелые заболевания печени, ле­чение фибринолитиками), а также врожденной а/гипо/дисфибриногенемии. Увеличение концентрации фибриногена отмечается при инфек­цион­ных заболе­ва­ниях, злока­чест­венных новообразованиях, хронических воспа­лительных процессах, во время беременности.

Набор «Тех-Фибриноген-тест» можно использовать для диагностики большого спектра заболеваний и патологических состояний организма человека. Данный набор применяется для определения концентрации фибриногена по методу Clauss, заменяя собой устаревшую методику определения данного белка гравиметрическим способом по Рутберг. Это значительно повышает точность определения фибриногена, увеличивает диагностическую значимость метода и снижает трудозатраты персонала лабораторий. Одним из основных преимуществ выпускаемого ИМН является его сравнительно низкая для российского рынка стоимость при высоких аналитических характеристиках, сопоставимых с известными диагностическими наборами известных зарубежных фирм-производителей. В РФ зарегистрирован один аналог данного ИМН: “Фибриноген-тест”, производства НПО «Ренам» (г. Москва).

Имеется регистрационное удостоверение Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения и социального развития (№ ФСР 2007/00788. Приказ ФС от 01.10.07 № 2922-Пр/07).

Внедрено в практику работы клинико-диагностических лабораторий ЛПУ России и стран СНГ.
Рекомбинантная плазмидная ДНК для обнаружения агентов, повреждающих генетический аппарат клетки (варианты) (НИИ биохимии)

Разработан цельноклеточный биосенсор pRTGFP, включающий рекомбинантную плазмидную ДНК, обеспечивающую синтез флуоресцирующего мутантного белка GFP из медузы Aequorea victoria в Rec + штаммах E.coli под контролем регуляторной области гена recA Proteus mirabilis. При воздействии мутагенов химической или физической природы, вызывающих повреждение ДНК, происходит индукция экспрессии репортерного гена, кодирующего флуоресцирующий мутантный белок GFP из медузы Aequorea victoria. Наличие индукции определяют по интенсивности флуоресценции.

С помощью биосенсора можно оценить повреждающее воздействие мутагенов различной природы, например, противоопухолевых антибиотиков, ксенобиотиков, экотоксикантов на геном живой клетки. Биосенсор может быть использован в пищевой, фармацевтической и химической промышленности для оценки мутагенного воздействия различных синтезируемых химических соединений, разрабатываемых лекарственных препаратов и продуктов их метаболизма в организме, а также для мониторинга загрязнений окружающей среды.

Имеется патент РФ на изобретение «Рекомбинантная плазмидная ДНК для обнаружения агентов, повреждающих генетический аппарат клетки (варианты)» (№2311459 от 27.11.2007 г.)

Проведена доклиническая апробация.
Тест-система для определения вредных внешнесредовых влияний, вызывающих геномные мутации (НИИ медицинской генетики Томского научного центра)

Разработана унифицированная тест-система, предназначенная для оценки физических, химических и биологических (бактерии и вирусы) мутагенных влияний внешней среды на предмет индукции числовых хромосомных нарушений.

Тест-система повышает точность и информативность исследований на мутагенность, направлена на определение числовых хромосомных нарушений, которые обычно не исследуются в генотоксикологических тестах, однако индукторами таких нарушений являются широко распространенные в окружающей среде и в производственных условиях вредные агенты химической природы. Аналоги – метафазный анализ, микроядерный тест, молекулярно-цитогенетическое выявление моно- и трисомии не позволяют в полной мере оценить уровень числовых хромосомных нарушений из-за высокой вероятности артефактов и особенностей в механизмах возникновения данного класса мутаций.

Преимущество предлагаемого способа, по сравнению с аналогами, заключается в существенном повышении чувствительности определения аномалий и индивидуализации определения мутагенного воздействия на клетки отдельных лиц, поскольку в качестве контроля к культивированным клеткам выступают некультивированные клетки тех же самых индивидов.

Имеется патент РФ (№ 2223494 от 10.02.2004г.).

Технология направлена в Росздравнадзор для получения разрешения на применение в практике.

Созданы гибридомы, продуцирующие моноклональные антитела (мкАт) к хорионическому гонадотропину. На основе моноклональных антител разработаны тест-системы:

- Набор реагентов для иммуноферментного определения хорионического гонадотропина человека в сыворотке крови (ХГЧ-ЭКО-ТЕСТ).

- Набор реагентов для иммуноферментного определения хорионического гонадотропина человека в сыворотке крови (ХГЧ-ЭКО-ТЕСТ- Ультра).

Наборы реагентов позволяют осуществлять определение хорионического гонадотропина у пациентов с патологией беременности, плода и новорожденного, при эндокринологических формах бесплодия. Тест-системы конкурентоспособны при сравнении с существующими отечественными и зарубежными аналогами; стоимость их ниже аналогичных отечественных на 25 % и импортных - на 35-40 %.

Проведены клинические испытания. Результаты одобрены Комитетом по новой медицинской технике Минздравсоцразвития России. Получены регистрационные удостоверения Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения и социального развития (2006 г.)

Производство наборов налажено ООО «Диатех-ЭМ».

Внедрено в практику работы клинико-диагностических центров, женских консультаций, клинических больниц, кафедр акушерства и гинекологии медицинских вузов, антидопинговых центров страны.

В основе метода определения антиовариальных антител в крови лежит твердофазный иммуноферментный анализ (ТИФА). В качестве антигена использована микросомальная фракция гранулёзных клеток яичников. Метод предназначен для диагностики аутоиммунного оофорита. Характеристики метода: возможность количественного определения антиовариальных аутоантител в крови. Может использоваться в динамике для оценки влияния проводимой терапии на активность аутоиммунного процесса. Может применяться в качестве скринингового метода при обследовании по бесплодию и у больных с нарушениями гормональной функции яичников.

Внедрено в практику работу лечебно-диагностических учреждений Санкт-Петербурга.

Выявление аутоантител к тиреоглобулину в реакции латекс-агглютинации (НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова; Московская государственная академия тонкой химической технологии им. М.В.Ломоносова)

В результате исследования свойств различных полимерных микросфер как основы для создания экспрессных (бесприборных) латексных диагностикумов предложен тест для полуколичественного определения антител к тиреоглобулину (Ат к ТГ)-РЛА-Ат-ТГ в сыворотке крови человека.

В состав набора для детекции Ат к ТГ входят все необходимые ингредиенты для проведения анализа: «положительная» и «отрицательная» контрольные сыворотки, конъюгат тиреоглобулина, ковалентно связанного с полимерными микросферами. Все реагенты готовы к использованию. Диагностикум сохранял свои свойства в течение 6 месяцев хранения при температуре 4-8⁰С.

При исследовании образцов сывороток здоровых лиц титр Ат к ТГ не превышал 1/100; у больных аутоиммунными заболеваниями щитовидной железы титр варьировал от 1/200 до 1/101200. Полученные результаты совпадали с данными ИФА в 95,8% случаев, что согласуется с показателями, регистрируемыми другими исследователями при детекции аутоантител к ТГ. Апробация диагностикума показала совпадение результатов анализа с помощью РЛА и РНГА в 96%.

Методические подходы создания набора РЛА-Ат-ТГ могут быть использованы при конструировании других латексных диагностикумов.

Приготовлены лабораторные серии диагностической тест-системы.

При изучении связывающей способности рекомбинантного альбумин-связывающего рецепторного белка стрептококка человека группы G (альбуминовый рецептор), полученного в НИИЭМ СЗО, была доказана его способность связываться с единственным белком плазмы человека – альбумином. Данное свойство белка позволило предположить возможность его использования в качестве реагента с альбумином в диагностических тест-системах, позволяющих определять концентрации альбумина в различных биологических жидкостях. Основываясь на принципах иммуноферментного анализа, заменяя антитела к альбумину на альбумин-связывающий рецептор, создан принципиально новый метод рецепторно-ферментного анализа (РФА) для диагностики микроальбуминурии. Данная замена создает определенные преимущества, поскольку позволяет избегать трудоемкости процесса приготовления антител и стандартизовать используемый альбуминовый рецептор, тем самым, стабилизируя всю систему анализа.

Отечественных конкурентов нет. Представленные на рынке диагностикумы различных западных производителей (“Albu Screen”, “Albusure” – “Cambrige Life Science” UK; “Micral-test” Boehringer Mannheim, Germany и др.) представляют собой тест-системы иммуноферментного анализа, преимущественно для полуколичественного определения альбумина в моче, и являются весьма дорогими для выполнения программы скрининга и мониторинга диабетической нефропатии в полном объеме.

Себестоимость компонентов предлагаемой тест-системы на 80 определений составляет не более 10 $, что позволяет, как минимум вдвое снизить стоимость одного исследования.

При цене одного исследования минимум 1.00 $ полный объем рынка составляет 2000000 $/год (25000 наборов/год на 80 определений каждый). Сегодня в крупных административных центрах данным исследованием охвачено не более 15% всех нуждающихся больных.

Реализация данного проекта может быть начата сразу, так как в настоящее время имеется запас основного реагента – альбумин-связывающего рецептора в количестве, достаточном для выпуска минимум 4000 наборов.

Для производственной наработки альбуминового рецептора может потребоваться закупка оборудования на сумму 20000 $.

Имеется патент РФ на изобретение «Рекомбинантный HSA-рецептор стрептококка группы G.» (№ 2065746 27 августа 1996 года).

Проведены клинические испытания.

Технология направлена Росздравнадзор для получения разрешения на применение в практике.

Создана иммуноферментная (ИФА) система для мониторинга антител к антигенам 14 видов условно патогенных бактерий. Тест-система позволяет дать более широкую оценку терапевтической эффективности антител гипериммунных плазм и препаратов внутривенного иммуноглобулина, изготовленных из плазмы крови доноров. Внедрение тест-системы в отечественную практику здравоохранения обеспечит контроль специфической активности иммунобиологических препаратов без применения дорогостоящих импортных диагностикумов.

Имеется патент РФ на изобретение «Способ одновременного выявления IgG антител к антигенам условно патогенных бактерий в сыворотке крови человека для определения состояния гуморального иммунитета» ( № 2213972 от 24.12.03 г.).

Имеется разрешение на применение в практике здравоохранения.

Тест-система реализована в практике работы ГНЦ и НИИВС им. И.И.Мечникова РАМН.

Тест-системы для диагностики нарушений гемостаза (Гематологический научный центр)

Получены разрешения Росздравнадзора на применение в медицинской практике разработанных диагностических наборов для определения факторов свертывания крови:

- Набор реагентов для исследования агрегационной активности тромбоцитов (Регистрационное удостоверение № ФС 01012006/518706);

- Набор реагентов для обпределения активности VIII фактора свертывания крови (Регистрационное удостоверение № ФСР 2007/010113);

- Набор реагентов для определения активности IX фактора свертывания крови (Регистрационное удостоверение № ФСР 2007/010114);

- Набор реагентов для определения протромбинового времени, протромбинового отношения, протромбинового индекса, протромбина по Квику и МНО в капиллярной крови (Регистрационное удостоверение № 2007/00699). Имеется патент РФ на изобретение «Способ определения международного нормализованного отношения (МНО) по величине протромбинового времени капиллярной крови» (№ 2271004 С1 от 27.02.06 г.);

- Набор реагентов для определения фибринолитической активности плазмы крови человека (Регистрационное удостоверение № ФСР 2007/00700);

- Набор реагентов для определения растворимых фибрин-мономерных комплексов в плазме крови человека о-фенантролиновым методом (Регистрационное удостоверение № ФСР 2007/00204).

Практическое использование разработанных диагностических тест-систем значительно повысит качество диагностики тромбофилии, гемофилии, инфарктов, инсультов и других нарушений гемостаза.

Указанные разработки являются чрезвычайно актуальными, так как зарубежные аналоги дороже в 10-20 раз и малодоступны для отечественного потребителя.

Требуемый объем инвестиций – 5 млн. руб., потенциальный объем продаж – 30 тыс. наборов/год, срок окупаемости – 2 года.

Серийный выпуск наборов проводится в НПО «РЕНАМ» МБООИ «Общество больных гемофилией».

Доказана высокая корреляция экспрессии липопротеинлипазы (LPL ) с мутационным статусом генов IgVH, особенно на ранних стадиях заболевания. На основании этих данных создана новая тест-система: определение уровня мРНК LPL методом ПЦР в реальном времени. Этот метод экономнее и менее трудоемкий, чем определение мутационного статуса IgVH.

Завершены экспериментальные испытания.
Радиоиммунологическе наборы для анализа простат-специфического антигена (ПСА) и альфа-фетопротеина (АФП) (Российский онкологический научный центр им. Н.Н.Блохина)

Наработаны и выделены моноклональные антитела (МКА) к АФП (Н12 и МБС-01), к ПСА (ICO 168 и ICO 204 ) и опухоль-ассоциированные антигены (Аг), проведена их очистка, контроль качества, определена пригодность полученных МКА для создания наборов. Созданы наборы реагентов для проведения иммунорадиометрического анализа (РИА-наборы) по определению уровня простата-специфического антигена (ПСАобщ) и альфа-фетапротеина (АФП) в сыворотке крови человека.

В результате радиоиодирования данных МКА на основании предварительных расчетов получена эффективная радиоактивная метка, хорошо согласующаяся по своим основным характеристикам с теоретическим прогнозом. Оптимизированы условия мечения МКА и откорректированы буферные системы для каждого типа РИА-наборов. Набран обширный клинический материал по определению уровня Аг в сыворотке крови здоровых людей и у больных с доброкачественными и злокачественными опухолями.

Результаты исследования являются базой для создания отечественного производства РИА-наборов для проведения иммунорадиометрического анализа по определению уровня ПСАобщ и АФП в сыворотке крови человека в диапазоне концентраций 0 – 350 (нг/мл) для АФП и 0,15 – 50 (нг/мл) для ПСАобщ.

Сравнительная оценка диагностической значимости созданных наборов в сравнении с зарубежными аналогами показала, что они не уступают последним, однако их стоимость ниже зарубежных аналогов в 1,5 раза.

Завершены экспериментальные испытания.

Получены гибридомы, продуцирующие моноклональные антитела к термолабильному энтеротоксину эшерихий (Escherichia coli). На основе полученных моноклональных антител разработана иммуноферментная тест-система для качественного определения термолабильного энтеротоксина эшерихий в исследуемых образцах.

Подана заявка на изобретение (№ 2007104958 от 09.02.2007г.).

Тест-система прошла лабораторные (доклинические) испытания.

Разработан метод на основе ИФА с использованием моноклональных антител к антигенам Н.pylori в копрофильтратах для диагностики и оценки эффективности эрадикационной терапии у подростков и взрослых с хроническими Н.pylori ассоциированными заболеваниями желудочно-кишечного тракта.

В ходе клинико-иммунологического исследования больных с гастропатологией проведено сравнение двух диагностических методов выявления Н.pylori: дыхательный уреазный тест и определение антигенов Н.pylori в копрофильтратах методом ИФА. Разработанный метод показал высокую чувствительность (92%) и специфичность (95%).

Показано, что в группе исследуемых больных с наличием гастропатологии аллергические заболевания встречались в 32% и в 50% из них сочетались с выявленными IgG антителами к Н.pylori. Сделано предположение, что помимо общеизвестных патологических процессов, развивающихся с участием Н.pylori в слизистой желудка и двенадцатиперстной кишки, имеется связь развития этой инфекции с аллергическими заболеваниями.

Получены экспериментальные образцы ИФА-тест-системы.
Способ обнаружения эндотоксинов грамотрицательных бактерий (НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи)

Суть способа заключается в обнаружении липосахаридов грамотрицательных бактерий метода электропунктурного вегетативного резонансного теста с использованием резонансно-частотного эффекта электромагнитных излучений путем применения спектра частот 37,9; 39,5; 42,6 и 44,2 Гц, характерного для гликолипида хемотипа Re из бактерий Salmonella Minnesota R595, который входит в состав липросахаридов большинства грамотрицательных бактерий. От лучших мировых образцов способ отличается специфичностью и высокой чувствительностью (0,1 пикограмма ЛПС в 1 мл) и может быть использован для выявления эндотоксина в образцах крови и препаратах для парентерального введения. Для использования способа в практике медицинских учреждений необходимы аппарат «Мини –Эксперт-ДТ» производства Центра интеллектуальных медицинских систем «Имедис» (стоимость 70000 руб.) и подготовка специалистов, владеющих технологией проведения электропуктурного резонансного теста.

Имеется патент РФ (2317001 от 23.06.2006 г.).

Способ обнаружения эндотоксинов грамотрицательных бактерий апробирован в ООО «Редикор-Био» (г. Москва).

Разработаны метод и тест-система, позволяющие выявлять ДНК возбудителя коклюша с помощью ПЦР.

Установлено, что один из возможных механизмов перехода бактерий B.pertussis в авирулентное состояние состоит в инактивации оперона bvgAS, ответственного за регуляцию транскрипции генов вирулентности, за счет перемещения IS481. Предложенный метод позволяет регистрировать события инсерционной инактивации оперона bvgAS и определять наличие авирулентных бактерий B.pertussis в изучаемом материале.

Проведены лабораторные испытания и клинические испытания.

Подготовлены фармакопейная статья и инструкция по применению «Тест-системы для экспресс-индикации возбудителя коклюша методом полимеразной цепной реакции».
Тест-система на основе моноклональных антител для выявления дифтерийного токсина (НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова; Институт биохимии им. А.Н.Баха РАН)

Разработан экспресс-метод на основе протективных моноклональных антител для выявления дифтерийного токсина в иммунохроматографическом анализе. Система позволяет установить наличие токсина через 5-7 минут после погружения тест-полоски в жидкую среду подращивания исследуемых бактерий без необходимости выделения чистой культуры, а также дифференцировать токсигенные штаммы С.diphteriae с абсолютной специфичностью и высокой чувствительностью.

Разработанный латекс-агглютинационный тест на основе моноклональных антител, как высокочувствительный экспресс-метод отличается рядом преимуществ от применяемой в практическом здравоохранении общепринятой реакции иммунодиффузии; определение осуществляется без выделения чистой культуры, значительно уменьшено время постановки реакции и получения результатов (1 час); количество определяемого дифтерийного токсина ведется в системе титрования.

Полученные данные подтверждены при испытании диагностикума на предприятии Пермского НПО «Биомед».

Реакция латекс-агглютинации (РЛА) по сравнению с ИФА дает более объективную характеристику токсигенности штаммов и может быть рекомендована для определения токсигенности коринебактерий дифтерии.

На основе использования моноклональных антител разработан второй вариант диагностикума для выявления дифтерийного токсина в иммунохроматографическом анализе, позволяющий установить наличие токсина в концентарции от 2 нг/мл и выше через 5-7 минут после погружения тест-полоски в жидкую среду подращивания без необходимости выделения чистой культуры возбудителя.

Приготовлены лабораторные серии латексного диагностикума и оценена его стабильность (срок годности 1 год).

Разработана тест-система иммуноферментная (ПневмоцистСтрип) для выявления антител к антигену Pneumocystis carinii в сыворотках крови, которая представляет собой набор реагентов для проведения ИФА на твердом носителе. Предназначена для выявления пневмоцистных антител в сыворотке крови больных людей с подозрением на пневмоцистоз и у здоровых при проведении эпидемиологических исследований.

Имеется патент РФ (№ 2186390 от 21.02.02 г.).

Тест-система находится на экспертизе в ЗАО «Вымпел-медцентр».

Разработана тест-система иммунофлюоресцентная (ПневмоцистоФлюоАТ) для выявления к антигену Pneumocystis carinii в сыворотках крови, которая представляет собой набор реагентов для проведения непрямой иммунофлюоресцентной реакции (НРИФ). Предназначена для выявления пневмоцистных антител в сыворотке крови больных людей с подозрением на пневмоцистоз и у здоровых при проведении эпидемиологических исследований.

Имеется патент РФ (№ 2186390 от 21.02.02 г.).

Тест-система находится на экспертизе в ЗАО «Вымпел-медцентр».

Разработана тест-система иммунофлюоресцентная (ПневмоцистоФлюоАГ) для выявления пневмоцист и трофозоитов в биологическом материале (биоптате, бронхо-альвеолярном лаваже и индуцированной мокроте), которая представляет собой набор реагентов для проведения непрямой иммунофлюоресцентной реакции (НРИФ). Предназначена для выявления всех форм пневмоцист в биологических материалах от больных бронхо-легочными заболеваниями с подозрением на пневмоцистоз.

Имеется патент РФ (№ 2186390 от 21.02.02 г.).

Тест-система находится на экспертизе в ЗАО «Вымпел-медцентр».

Разработана «Тест-система иммуноферментная для выявления антител (АТ) класса G к респираторно-синцитиальному вирусу (РСВ) – «ИФТС - РС- IgG», предназначенная для серодиагностики респираторно-синцитиальной вирусной инфекции (РСВИ) по обнаружению антител класса G. Тест-система характеризуется высокой чувствительностью, превышающей в десятки раз РСК при определении титров специфических антител; возможностью использования микроколичеств сывороток (0,5-1 мкл) для определения антител.

Государственные испытания показали, что ИФТС – РС- IgG по своим диагностическим параметрам не уступает одному из лучших зарубежных аналогов – тест-системе RSV-IgG-ELISA фирмы «NovaTec Immundiagnostica GmbH» (Германия). При выявлении сероконверсий РСВ-специфичных антител класса G чувствительность ИФТС-РС- IgG в сравнении с указанным зарубежным аналогом составила 94,4%, специфичность – 95%, при общем совпадении результатов в 94,7% случаев.

Использование тест-системы ИФТС-РС-IgG позволило повысить частоту диагностирования РСВИ в 1,2-2 раза по сравнению с традиционно используемым в практике методом РСК.

Экономические показатели от внедрения: требуемый объем инвестиций – 300 тыс. руб.; потенциальный объем продаж -150 тест-систем в год; срок возможной окупаемости – 1 год.

Фармакопейная статья на препарат утверждена Фармакопейным государственным комитетом 8.06.2007г. (№ 8653-07).

Изготовлены опытные серии «ИФТС-РС-IgG».