11
ды как лекарственные средства. Первичная структура белков.
Общая стратегия определения структуры белков. Анализ ами-
нокислотного состава. Определение N- и С-концевых амино-
кислотных остатков. Фрагментация полипептидной цепи.
Ферментативные методы гидролиза.
Ограниченный протео-
лиз. Химические методы расщепления полипептидной цепи
по остаткам метионина, триптофана, цистеина и по связям
Asn-Gly и Asp-Pro. Последовательная деградация пептидов по
методу Эдмана с идентификацией фенилтиогидантоинов и
дансиламинокислот. Определение аминокислотной последо-
вательности белка с помощью жидкофазного, твердофазного и
газофазного
секвенаторов.
Анализ
расположения
сульфгидрильных групп и дисульфидных связей. Использова-
ние масс-спектрометрии при определении первичной структу-
ры пептидов. Сложные белки: глико-, липо-, нуклео-, хромо-,
фосфо- и металлопротеины. Химическая модификация белков.
Задачи, решаемые c помощью химической модификации.
Специфическая модификация a- и eаминогрупп в белках. Мо-
дификация остатков гистидина, метионина, тирозина, трипто-
фана, цистеина. Бифункциональные реагенты.
Введение флу-
оресцентных, спиновых и фотоаффинных меток. Методы
идентификации модифицированных аминокислотных остат-
ков. Биоспецифическая модификация белков. Посттрансляци-
онная модификация белков. Ферментативная посттрансляци-
онная модификация с расщеплением полипептидной цепи.
Понятие о сигнальных пептидах и процессинге. Сортировка
белков в клетке. Импорт белков в клеточные органеллы. Ко-
валентная посттрансляционная модификация -амино- и -
карбоксильных групп, функциональных групп боковых цепей
аминокислот (метилирование, гидроксилирование, введение
дополнительной
карбоксильной группы, фосфорилирование,
гликозилирование, ADP-рибозилирование). Пространственная
структура белков. Понятие о вторичной, третичной и четвер-
тичной структурах. Электронное строение и конфигурация
пептидной связи. Углы f, j, w. Карты Рамачандрана. Типы вза-
имодействий, определяющие пространственную структуру
полипептидов. Связь пространственной структуры белка с
последовательностью аминокислотных остатков.
Роль моле-
кулярных шаперонов. Вторичная структура пептидов и бел-
ков. a-Спираль, 310-спираль, параллельная и антипараллель-
ная -структуры, -изгиб, другие типы регулярных структур
полипептидной цепи. Круговой дихроизм и дисперсия оптиче-
ского вращения как методы определения вторичной структу-
ры. Сверхвторичная структура белков. Понятие о доменах.
Третичная структура белков. Рентгеноструктурный анализ как
метод изучения пространственного строения белков. Ядерный
магнитный резонанс как метод исследования конформации
пептидов и белков в растворах. Денатурация и ренатурация.
Четвертичная структура белков.
Примеры субъединичных
12
структур. Методы исследования четвертичной структуры.
Биологическая роль белков. Ферменты. Классификация. Пред-
ставление о биокатализе. Принципы ферментативной кинети-
ки. Ингибиторы и активаторы ферментов. Факторы, влияю-
щие на ферментативную активность. Понятие об активном
центре. Фермент-субстратный комплекс. Функциональные
группы активных центров ферментов на примере химотрип-
сина, лизоцима, карбоксипептидазы А. Причины высокой ка-
талитической активности и механизм действия ферментов.
Белки-гормоны. Механизм действия пептидно-белковых гор-
монов. Структура и свойства аденилатциклазной системы.
Инсулин, гормоны роста. Гликопротеиновые гормоны адено-
гипофиза. Белки системы гемостаза.
Система свертывания
крови. Интегрины. Антикоагулянты и фибринолитики. Двига-
тельные и структурные белки. Белки мышц и соединительных
тканей. Актомиозиновый комплекс. Тропонины. Белки бакте-
риальной системы подвижности. Флагеллин. Цитоскелетные
белки. Коллаген, кератин, фиброин шелка. Рецепторные бел-
ки. Бактериородопсин. Зрительный родопсин. Ацетилхолино-
вый рецептор постсинаптических мембран. Транспортные
белки. АТФазы. Цитохром С, гемоглобин и миоглобин, сыво-
роточный альбумин. Белки-токсины микробного и раститель-
ного происхождения. Зоотоксины. Нейротоксины как инстру-
менты изучения механизмов нервной проводимости.
2
Достарыңызбен бөлісу: