Методическое пособие к малому практикуму по биохимии и молекулярной биологии
жүктеу/скачать 1.21 Mb. Pdf көрінісі
|
| а) Специфичность действия амилазы и сахаразы. Источником ами-
лазы служит слюна, разведенная в 5 раз. Источником сахаразы – дрожже- вые клетки. Для получения препарата сахаразы дрожжи (0,5 г) растирают с окисью алюминия в ступке в течение 5 мин, затем добавляют 3 мл воды и перемешивают дрожжи с водой в течение 5 мин. При этом сахараза пере- ходит в раствор. Полученный гомогенат фильтруют, а фильтрат использу- ют как источник сахаразы. Ход исследования В первую и третью пробирки наливают по 1 мл 0,1 %-ного раствора крахмала, во вторую и четвертую – по 1 мл раствора сахарозы. Затем в первую и вторую пробирки прибавляют по 1 мл фильтрата, содержащего сахаразу, а в третью и четвертые пробирки – по 1 мл разведенной в 5 раз слюны, содержащей амилазу. Содержимое пробирок перемешивают и ста- вят в термостат с температурой 37 ºС на 10 мин. Затем из первой и третьей пробирки отбирают по 20 капель смеси и ставят реакцию Люголя. Во всех пробирках проводят реакцию Троммера (см. работу 13). Сделайте вывод о специфичности исследуемых ферментов. Результаты работы запишите в таблицу. № № пробирок Субстрат Фермент Контрольные реакции с J 2 Троммера 1 2 3 4 б) Специфичность действия уреазы. Субстратом для уреазы являет- ся мочевина, которая расщепляется с образованием аммиака и углекислого газа. 31 N H 2 NH 2 O + H 2 O 2NH 3 + CO 2 урeaза Тиомочевина отличается от мочевины только тем, что атом кислоро- да в ее молекуле заменен на атом серы. Но даже такое незначительное из- менение в структуре субстрата приводит к тому, что фермент уже не ока- зывает действия на субстрат. Ход исследования Фермент уреаза в большом количестве содержится в семенах сои, поэтому в эксперименте используется 2 %-ная суспензия соевой муки. В 2 пробирки наливают по 2 мл суспензии соевой муки, содержащей фермент, затем в первую – 2 мл мочевины, во вторую – 2 мл тиомочевины. В обе пробирки добавляют по 5 капель фенолфталеина. Содержимое про- бирок перемешивают, и пробирки оставляют стоять 15 мин при комнатной температуре. Опишите и объясните полученные результаты. Сделайте вы- воды. жүктеу/скачать 1.21 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|