Тема: Основы рационального питания
Изолирование фенилалкиламинов из биологического материала
жүктеу/скачать 1.35 Mb. Pdf көрінісі
|
- Бұл бет үшін навигация:
- Исследование на фенилалкиламины методом газовой и
| Изолирование фенилалкиламинов из биологического материала. При
исследовании на фенилалкиламины в подавляющем большинстве случаев объектом является моча, поэтому изолирование фенилалкиламинов проводят: 1) методом ЖЖЭ – при значении рН 10-11, для создания которого применяют концентрированный раствор аммиака, или 1 М раствор натрия гидроксида; экстрагенты – диэтиловый эфир, толуол, бензол, хлороформ; 2) методом ТФЭ – в патронах С 18 и их аналогах; элюирование с колонки осуществляют смесью этилацетат - аммиак (98:2). Полученный органический экстракт подвергают упариванию при комнатной температуре инертного газа или воздуха. Представители группы фенилалкиламинов в виде оснований являются достаточно летучими, поэтому для снижения неконтролируемых потерь на стадии упаривания их необходимо перевести в солевую форму. Для этого используются 5% раствор соляной кислоты в метаноле или 1% раствор уксусной кислоты в этаноле. Типовая методика изолирования фенилалкиламинов из мочи включает следующие стадии: 1) Подщелачивание мочи до значения рН 10-11; 2) Экстракция методами ЖЖЭ (диэтиловый эфир, толуол, бензол, хлороформ) или ТФЭ; 3) Центрифугирование для разделения органической и водной фаз (в варианте ЖЖЭ); 4) Упаривание экстракта. Исследование на фенилалкиламины методом газовой и высокоэффективной жидкостной хроматографии. Хроматографическое разделение фенилалкиламинов без предварительной дериватизации, осуществляют с применением ПИД на кварцевых капиллярных колонках с полярными или слабополярными неподвижными фазами: 5% фенил- 42 диметилсиликон (фаза HP-5 или HP-5MS). Разделение можно проводить как при программировании температуры колонки: от 130 0 С до 200 0 С со скоростью 15 0 С/мин при дальнейшем выдерживании в течение 12 мин, так и в изотермическом режиме 130 0 С. ВЭЖХ-анализ также используется при исследовании на фенилалкиламины. В таблице 9 приведены пределы обнаружения некоторых фенилалкиламинов, полученные на хроматографе «Миллихром». жүктеу/скачать 1.35 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|