Биоиндикация фенольного загрязнения реки Енисей правобережья города Красноярска

Задачи:

2. Определить видовой состав выделенных организмов.

3.Определить соотношение фенолустойчивых и фенол-разрушающих микроорганизмов в полученных пробах воды.

4.Установить причинно-следственные связи между выделенными организмами и источником загрязнения.

Исследования я начала с отбора проб, так как нужно было установить присутствие фенольных загрязнений в реке. Для отбора проб использовался простейший прибор, позволяющий отбирать воду как с поверхности, так и с определённой глубины — батометр. Его можно сделать из обыкновенной бутылки (рис.1, а). (2). Батометр крепился к концу деревянного шеста (длинной 3 метра) на веревке – это позволило отбирать пробы на расстоянии 3м от берега.

Рис. 1. Бутылочный батометр(а) и диск Секи (б) (по А.С. Боголюбову).

I. Устье реки Лалетино (Свердловский район юго-западная часть)

II. Остров отдыха- городской пляж. (Свердловский район)

III. Хим. комбинат «Енисей». (Кировский район).

Были выделены следующие микроорганизмы:

1. Кандида тропикалис (дрожжи)

2. Псевдомонас флуоресценс (бактерии)

3. Родококки (бактерии)

4. Ралстония (бактерии)

5. Трихоспорон (дрожжи)

6. Родоторула (дрожжи)

В контрольных точках произошли следующие распределения:

Таблица №1

Распределение микроорганизмов в контрольных точках

правобережья реки Енисей

№1. устье реки Лалетино	Кандида тропикалис Трихоспорон
№2 Остров отдыха- городской пляж	Кандида тропикалис Ралстония Трихоспорон
№3 Хим. комбинат «Енисей»	Кандида тропикалис Псевдомонас флуоресценс Родококки Ралстония Трихоспорон Родоторула

Выделение устойчивых к фенолу микроорганизмов проводила с помощью высева полученных проб на чашки Петри - на плотную питательную среду содержащую фенол. В качестве плотной питательной среды для высевов использовала стандартный питательный агар (30 г порошка на 1 л дистиллированной воды).

Ферментативный гидролизат кормовых дрожжей……….12.0

Агар………………………………………………………….12.5

Натрия хлорид……………………………………………….5.5

рН = 7.2 ± 0.1
При исследовании получила следующие результаты:

К фенолразрушающим были отнесены:

1. Кандида тропикалис (дрожжи)

2. Псевдомонас флуоресценс (бактерии)

5. Трихоспорон (дрожжи)

6. Родоторула (дрожжи)
К фенолустойчивым отнесены:

3. Родококки (бактерии)

4. Ралстония (бактерии)
Для определения способности разрушать фенол и для использования его как субстрат каждый выделенный штамм выращивала в отдельной колбе на качалке в жидкой среде с фенолом 7 суток при температуре +15^оС.

9

Состав жидкой среды (г/л):

NH₄Cl……………………………………………………..1

Na₂HPO₄^.12H₂O………………………………………….14.32

NaCl………………………………………………………0.5

CaCl₂……………………………………………………...0.05

MgSO₄…………………………………………………….0.5

KH2PO4………………………………………………….2.72

FeSO₄……………………………………………………..0.05

Фенол……………………………………………….……0.3

1. Если среда становилась мутной – значит штамм способен разрушать фенол и использовать его как субстрат.

2. Если среда оставалась прозрачной – значит данный штамм только устойчив к фенолу, а разрушать и использовать его не может.

Из таблицы можно сделать следующие выводы:

В контрольной точке №1 «устье реки Лалетино», микроорганизмы: кандида тропикалис (дрожжи), трихоспорон (дрожжи)- разрушающие, так как вода в колбе помутнела. В контрольной точке №2 «Остров отдыха» микроорганизмы : ралстония (бактерии)- устойчивы к фенолу, вода в колбе светлая и два микроорганизма не устойчивы: кандида тропикалис (дрожжи), трихоспорон (дрожжи).

В контрольной точке №3 «хим. комбинат «Енисей» большое сочетание микроорганизмов: кандида тропикалис (дрожжи), псевдомонас флуоресценс

(бактерии), трихоспорон (дрожжи), родоторула (дрожжи)- фенолразрушающие и два организма фенолустойчивы: родококки (бактерии), ралстония (бактерии).

Выделенные микроорганизмы способные разрушать фенол, можно выращивать в субкультурах и применять для очистки речных участков реки Енисей.

В результате исследований я выяснила, что промышленные предприятия оказывают огромное влияние на загрязнение реки Енисей, так как самым фенольным загрязнением была контрольная точка №3 «Хим.комбинат «Енисей». Это промышленное предприятие сбрасывает через очистные сооружения отходы анилинкрасочного производства, в которых и присутствует фенол. Фенол, на этом участке содержится в растворенном состоянии в виде фенолятов и имеет резкий запах хлора.

В контрольной точке№1 «устье реки Лалетино», фенолы присутствуют «благодаря» выбросам ЗАО «ДОК». Предприятие выбрасывает отходы лесохимической промышленности содержащие фенолы. Но, так как этот участок удален от центра города, в нем еще остались микроорганизмы способные разрушать фенол.

Присутствие фенольных соединений в зоне «Остров Отдыха» обязано газодымовым выбросам, смывами загрязняющих веществ ливневыми осадками, так как здесь проходит крупная транспортная артерия соединяющая левый и правый берег города Красноярска.
Цель, которую я ставила в своей работе удалось реализовать в полной мере. Я не только провела исследования по определению, выделению микроорганизмов способных к воздействию фенола, мне удалось также определить визуально в каком состоянии фенол присутствует в водной экосистеме реки Енисей ( растворенном или в виде свободных фенолов). Удалось установить причину появления фенолов в контрольных точках, это следствие нахождения близлежащих промышленных предприятий, особенно химической промышленности.

Мои исследования могут быть интересны учащимся, которые хотят более качественно оценить загрязнения реки Енисей. Микроорганизмы как индикаторы, способны изменить характер загрязнения реки Енисей, в положительную сторону. Очищая, таким образом, водную среду реки, можно колоссально способствовать очистки реки. Эксперименты, которые я проводила, осуществляются только в научных лабораториях, но выращенные субкультуры, можно с успехом применять на практических работах в школах. После практической работы, можно увидеть, как очистилось водное пространство, тем самым способствовать экологической безопасности реки. Конечно, выполненные исследования трудны для обычного школьника, но они помогут не только углубить знания по биологии, но и расширить кругозор по экспериментальной микробиологии. Также исследования можно применять работникам СЭС для проведения работ по определению загрязнения водоемов.