ПРАВИЛА ВЗЯТИЯ ПАТОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА, КРОВИ, КОРМОВ И ПЕРЕСЫЛКИ ИХ ДЛЯ ЛАБОРАТОРНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ
(Утверждены Главным управлением ветеринарии
Министерства сельского хозяйства СССР 24 июня 1971г.)
Общие положения
1. При необходимости определить или подтвердить причину заболевания или гибели животных (включая птиц, зверей, пчел, рыб) при подозрении на инфекционную или инвазионную болезнь или на отравление необходимо взять соответствующий патологический материал и направить его в ветеринарную лабораторию для исследования.
Кроме того, в лабораторию направляют корма для различных видов исследований, а также кровь и другой материал от животных для биохимических анализов.
Во всех случаях взятия и пересылки материала необходимо руководствоваться изложенными ниже правилами, а также соответствующими инструкциями по борьбе с болезнями животных.
Взятие и пересылка патологического материала для бактериологического и вирусологического исследований
2. Патологический материал необходимо брать стерильными инструментами в стерильную посуду. Поверхность органа (ткани), от которого берут патологический материал, на месте разреза следует обжечь над пламенем или прижечь нагретой металлической пластинкой.
3. Патологический материал должен быть взят как можно раньше после смерти животного, особенно в теплое время года. Начавшееся разложение трупа может сделать его негодным для исследования.
Патологический материал отправляют в лабораторию в неконсервированном виде; в том случае, если невозможно доставить его в лабораторию в течение ближайших 24-30 часов, патологический материал посылают только в консервированном виде.
4. Для бактериологического исследования патологический материал (органы или их части) консервируют 30%-ным водным раствором химически чистого глицерина. Воду предварительно стерилизуют кипячением или автоклавированием в течение 30 минут. Материал можно консервировать также в стерильном вазелиновом масле. Материал заливают консервирующей жидкостью в количестве, в 4-5 раз превышающем его объем.
5. Материал, направляемый для вирусологических исследований, консервируют 30-50%-ным раствором химически чистого глицерина на физиологическом растворе поваренной соли. Физиологический раствор предварительно стерилизуют в автоклаве при 120° в течение 30 минут.
6. Небольшие трупы павших животных (поросят, ягнят, телят), а также трупы мелких животных лучше посылать целыми в непроницаемой таре.
7. Трубчатые кости посылают на исследование в целом виде, с неповрежденными концами, тщательно очистив их от мышц и сухожилий.
Кости завертывают в марлю или полотно, смоченное дезинфицирующей жидкостью (5%-ным раствором карболовой кислоты). Кости можно также посыпать поваренной солью и завернуть в полотно или марлю.
8. Кишечник перед посылкой для бактериологического и вирусологического исследований освобождают от фекальных масс, а концы кишечника перевязывают. На исследование посылают части кишечника с наиболее характерными патологическими изменениями. Кишечник помещают в банки с 30-40%-ным водным раствором глицерина или насыщенным водным раствором поваренной соли. Объем консервирующей жидкости должен превышать объем взятого материала в 5-7 раз.
9. Кал для исследования отправляют в стерильных стаканах, пробирках или банках, которые хорошо закрывают пергаментной бумагой.
От трупов животных кал можно послать в отрезке невскрытого кишечника, завязанного с обоих концов. Кал в лабораторию должен быть доставлен не позднее 24 часов после его взятия.
10. При посылке для исследования участков кожи берут наиболее пораженные кусочки ее размером 10×10 см. Кусочки кожи посылают в стерильной, герметически закупоренной посуде.
11. Кровь, гной, слизь, экссудат, мочу, желчь и другой жидкий патологический материал для бактериологического и вирусологического исследований посылают в запаянных пастеровских пипетках, стерильных пробирках или во флаконах, хорошо закрытых стерильными резиновыми пробками.
12. Кровь, гной, выделения из различных полостей, естественных отверстий и др. посылают для микроскопического исследования (для обнаружения в них микробов, кровепаразитов и для определения лейкоцитарной формулы) в виде мазков.
Предметные стекла предварительно кипятят в течение 10-15 минут в 1-2%-ном водном растворе соды, затем хорошо промывают чистой водой и насухо вытирают. Сухие стекла помещают в раствор спирт-эфира, взятых в равных частях, где и хранят до употребления.
У животных кровь берут из вены ушной раковины или края верхушки уха, у птиц — с поверхности гребня или подкрыльцовой вены. Шерсть на месте взятия крови выстригают или выбривают, кожу тщательно протирают ватными тампонами, смоченными сначала спиртом и затем эфиром.
Инструменты (иглы, скальпель) должны быть стерильными.
Первую каплю крови удаляют стерильной ватой (исключение делается при исследовании крови на гемоспоридиозы, когда берут для мазка первую каплю крови), а следующую свободно выступившую каплю крови берут на предварительно подготовленное предметное стекло путем быстрого и легкого прикосновения к капле поверхностью стекла. Затем стекло быстро поворачивают вверх каплей и удерживают между пальцами левой руки в горизонтальном положении. К левому краю капли прикасаются под углом 45°С шлифованным краем другого предметного (или покровного) стекла.
Как только капля равномерно распределится по ребру этого стекла, его быстро проводят по поверхности предметного стекла слева направо, не доводя его до края на 0,5-1 см. Ширина мазков должна быть уже предметного стекла. Для каждого нового мазка берут свежую каплю крови.
Готовые мазки крови высушивают на воздухе; подсушивать их над пламенем или на солнце не рекомендуется. В холодное время года мазки делают в теплом помещении или на стеклах, подогретых на крышке теплого стерилизатора.
Метод фиксации мазков зависит от цели исследования (см. специальную часть Правил).
Правильно приготовленные мазки крови должны быть тонкими, равномерными и достаточной длины. На высушенных мазках и отпечатках острым предметом делают надпись с указанием номера или клички животного и даты приготовления мазка.
Мазки из тканей, гноя, органов и различных выделений готовят путем размазывания материала на предметном стекле стерильной палочкой или ребром другого предметного стекла до тонкого слоя. Частицы органов плотной консистенции, твердые узелки, а также вязкий материал целесообразно заключать между двумя предметными стеклами. После растирания помещенного между ними материала стекла разъединяют в
противоположные стороны в горизонтальном направлении, в результате чего получаются два довольно тонких мазка. Иногда получают так называемые препараты-отпечатки. Для этого вырезанный острым скальпелем кусочек органа захватывают пинцетом и свободной поверхностью кусочка делают на стекле несколько тонких отпечатков.
Взятие крови для серологического исследования
13. У лошадей, крупного рогатого скота, овец и коз кровь берут из яремной вены в верхней трети шеи.
Иглы перед взятием крови от каждого животного обязательно стерилизуют кипячением. Шерсть на месте взятия крови тщательно выстригают, и кожу дезинфицируют спиртом: или 3%-ным раствором карболовой кислоты. Нужно следить, чтобы кровь стекала по стенке в пробирку струей, а не каплями. Кровь, взятая каплями и вспененная, скорее гемолизуется и часто дает неправильные результаты показаний при исследовании. Нельзя допускать, чтобы кровь попадала на землю. Для этого надо пользоваться тазиком с дезинфицирующей жидкостью, куда спускают первую порцию крови.
У свиней кровь берут из уха (иглой или шприцем) или из кончика хвоста. Хвост предварительно обмывают водой с мылом и дезинфицируют спиртом или 3%-ным раствором карболовой кислоты, а затем кончик отрезают ножницами. После взятия крови кончик хвоста обрабатывают йодом, перевязывают или прижигают.
У птиц кровь берут из вены крыла или из гребешка.
Брать кровь надо по возможности утром, до кормления животных. Для серологического исследования от крупного рогатого скота, лошадей и других крупных животных, овец, свиней кровь берут в количестве 7-10 мл.
Взятую кровь выдерживают около часа при 30-35°С для свертывания, а затем выносят в прохладное помещение для отстаивания. Через 10-12 часов отстоявшуюся сыворотку переливают в другие пробирки. Если сыворотка недостаточно отстоялась или верхний слой сгустка плотно прилегает к стенкам пробирки и отстаивание начинается снизу, то сгусток отделяют от стенок пробирки тонкой предварительно прокаленной и остывшей проволокой.
Сыворотка крови должна быть доставлена в лабораторию в течение первых суток и в исключительных случаях не позднее третьего дня после взятия крови.
При пересылке сыворотки на большое расстояние, особенно летом, её необходимо консервировать 5%-ным раствором карболовой кислоты на физиологическом растворе из расчета на каждые 9 мл сыворотки 1 мл раствора карболовой кислоты или 1-2 капли раствора на 1 мл сыворотки.
Раствор карболовой кислоты необходимо подливать по каплям при постоянном встряхивании пробирки с сывороткой.
Сыворотку или кровь можно консервировать также борной кислотой (в порошке) из расчета 0,05-0,07 г (на кончике скальпеля) на одну пробирку с кровью (сывороткой). Сыворотку можно консервировать также высушиванием.
Для высушивания сыворотку наносят на фильтровальную бумагу размером 5×5 см в количестве 0,4 мл и выдерживают в комнате при рассеянном свете до полного высыхания. После этого на каждой бумаге с высушенной сывороткой делают соответствующие записи простым карандашом и завертывают в пергаментную бумагу (каждую пробу отдельно), а затем упаковывают в конверт и в таком виде отсылают в лабораторию.
В лаборатории каждую пробу сухой сыворотки помещают в пробирку, заливают 2 мл физраствора, помещают в термостат на 6-10 часов или оставляют в комнате на 24 часа и затем исследуют. Сухие сыворотки сохраняют свои антигенные свойства от 40 до 130 дней.
Для серологического исследования в лабораторию можно отправлять и цельную кровь, не отделяя сыворотку, но при условии, что в пути ее не будут встряхивать и она не подвергнется гемолизу.
На каждой пробе сыворотки или крови указывают ее номер или кличку животного или фамилию владельца животного. Пробы направляют с описью в двух экземплярах (см. Приложение 2).
Пробирки с сыворотками плотно закрывают стерильными пробками и устанавливают для пересылки в строго вертикальном положении.
Зимой сыворотки упаковывают и пересылают так, чтобы они не замерзали.
Взятие материала для патологогистологического исследования
14. Для патологогистологического исследования материал берут от свежих трупов или убитых животных. Нужно брать те органы и ткани, где обнаружены те или иные патологические изменения. Из разных участков патологически измененных органов (тканей) вырезают тонкие, небольшие кусочки, но не более 1- 2 см толщиной. Вместе с пораженными участками ткани захватывают и граничащую с ней нормальную ткань.
При иссечении кусочка учитывают микроскопическое строение того или иного органа и ткани. Так, кусочки из почки берут с таким расчетом, чтобы попадали оба слоя — корковый и мозговой. Из органов, имеющих во всех частях одинаковое строение, при иссечении необходимо захватывать и их капсулы.
После взятия материал тотчас помещают в фиксирующую жидкость, объем которой должен в 10 раз превышать объем взятого материала. В качестве фиксирующей жидкости лучше всего использовать 10%-ный водный раствор продажного формалина. За неимением формалина можно использовать в качестве фиксирующей жидкости 96%-ный чистый спирт. При применении спирта толщина кусочков ткани не должна превышать 0,5 см.
Фиксирующую жидкость во всех случаях через сутки необходимо заменить свежей.
Патологический материал фиксируют в стеклянной посуде. Головной, спинной мозг и другие нервные ткани лучше фиксировать в 10%-ном нейтральном формалине. Нейтрализуется формалин прибавлением в продажный формалин сухого мела или углекислой магнезии до 1/10-1/20 его объема. Для фиксации кусочков мозга можно использовать также 96%-ный спирт, жидкость Карнуа или смесь Буэн-Дюбоска (см. пункт 112).
В холодное время года во избежание промерзания при пересылке материал, профилированный в формалине, как указано выше, перекладывают в 30-50%-ный раствор глицерина, приготовленный на 10%-ном формалине, или в 70%-ный спирт, или в насыщенный раствор поваренной соли.
На банку с кусочками органов и тканей наклеивают ярлык с указанием номера или клички животного, а внутрь ее опускают этикетку из плотной бумаги или картона с написанным на ней простым (не химическим) карандашом номером животного.
Помещать в одну посуду несколько объектов исследования от разных животных можно только при том условии, если каждый из них завязывают в марлю вместе с отдельной этикеткой.
Упаковка и пересылка патологического материала
15. Трупы мелких животных, части трупов крупных животных и отдельные органы в свежем (нефиксированном) виде отправляют для исследования в лабораторию только с нарочным. Посылаемый материал, особенно от животных, подозрительных по заболеванию инфекционной болезнью, должен быть тщательно упакован в плотный деревянный или металлический ящик, чтобы предупредить возможность рассеивания
инфекции в пути. Перед упаковкой материал необходимо завернуть в холст или мешковину, смоченную дезинфицирующим раствором (фенольного креолина, лизола, известкового молока), и уложить в ящик со стружками, мякиной или опилками.
16. Части органов, жидкости, отправляемые в лабораторию почтой в фиксированном или консервированном виде, должны быть помещены в герметически закупоренную стеклянную посуду с притертой стеклянной, пластмассовой, резиновой или корковой пробкой. Пробка должна быть закреплена проволокой или бечевкой и залита менделеевской замазкой (сургучом, смолкой, парафином или воском), чтобы укупорка была непроницаемой для жидкости. Укупоренную посуду вкладывают в прочный плотный ящик и хорошо обкладывают ватой, паклей, стружками, опилками или другими упаковочными материалами.
Кости обертывают целлофаном, полиэтиленовой пленкой или смоченными в дезрастворе марлей или полотном и также упаковываются в ящики.
17. При пересылке почтой или с нарочным патологического материала от животных, подозрительных по заболеванию инфекционной болезнью, или явно инфицированного материала упаковка должна гарантировать доставку материала в целости и исключить возможность рассеивания возбудителей инфекции. На лицевой стороне посылки вверху должна быть надпись: «Осторожно — стекло» и «Верх».
18. Стеклянную посуду, в которой заключен посылаемый материал с подозрением на наличие особо опасных болезней (сап, сибирская язва, эмфизематозный карбункул, бруцеллез, туляремия, перипневмония крупного рогатого скота, чума крупного рогатого скота, чума свиней, псевдочума птиц, ящур, бешенство), обязательно упаковывают в металлическую коробку, которую запаивают, пломбируют, или опечатывают, а затем упаковывают еще в деревянный ящик.
Если такой материал доставляют с нарочным, можно отправлять его в стеклянной, герметически закупоренной посуде, без металлической коробки, но в деревянном ящике.
19. На взятый патологический материал составляют сопроводительный документ (см. пункт 142).
Если при вскрытии посылки в лаборатории будут установлены несоответствие сопроводительному документу или порча патологического материала, об этом обязательно составляют акт, копию которого отправляют ветеринарному врачу, направившему материал в лабораторию.
Взятие и пересылка патологического материала при отдельных инфекционных болезнях
20. Сибирская язва. При подозрении на сибирскую язву вскрывать трупы запрещается. Для исследования от трупа животного берут кровь из надреза уха, периферических сосудов или отрезают и отсылают в лабораторию ухо.
Если подозрение на сибирскую язву появилось в процессе вскрытия трупа, вскрытие тотчас же приостанавливают и для исследования посылают ухо, как указано ниже.
Подозрение на заболевание сибирской язвой свиней обычно возникает при наличии опухоли в области шеи. Если подозрение возникло во время вскрытия трупа свиньи, то дальнейшее вскрытие прекращают, а для бактериологического исследования берут участки отечной соединительной ткани, заглоточные лимфатические узлы.
Место надреза предварительно тщательно дезинфицируют и после взятия крови прижигают огнем или раскаленным металлическим предметом.
Кровь наносят на стекло толстым слоем и высушивают на воздухе без дополнительной фиксации.
Ухо отрезают с той стороны, на которой лежит труп. Предварительно его туго перевязывают шпагатом у основания в двух местах и отрезают между перевязками. Не снимая шпагата, отрезанное ухо завертывают в чистую тряпочку или марлю, пропитанную 3%-ным раствором карболовой кислоты, а затем обертывают целлофаном, полиэтиленовой пленкой или пергаментной бумагой и помещают в герметически закрытую посуду. Место отреза уха на трупе прижигают огнем.
Для исследования на сибирскую язву кожевенного сырья реакцией преципитации посылают кусочки кожи величиной 5×5 см.
21. Эмфизематозный карбункул и злокачественный отек. Для бактериологического исследования посылают в запаянных пипетках экссудат из воспаленного крепитирующего отека, а также препараты-отпечатки на предметных стеклах из пораженных частей мышц больных животных.
От трупов животных посылают кусочки печени, селезенки, почек и пораженных мышц в растворе глицерина (см. пункт 5) или же пересыпанные солью.
22. Брадзот овец. Для бактериологического исследования посылают кусочки печени, селезенки, мышц, подкожной клетчатки (если имеются отеки), содержимое тонких кишок, кусочки пораженных частей тонкого кишечника, сычуга и трубчатую кость.
Материал для бактериологического исследования берут только от свежих трупов.
23. Инфекционная энтеротоксемия овец. Для бактериологического и биологического исследований направляют содержимое тонкого отдела кишечника, перитонеальную жидкость, мезентериальные лимфатические узлы, паренхиматозные органы.
Материал для исследования следует брать сразу после гибели животного. От больных животных для исследования на наличие токсина направляют фекалии (150-200 г).
24. Анаэробная дизентерия ягнят. Для бактериологического и биологического исследований посылают свежий труп ягненка или свежие неконсервированные пораженные части кишечника с содержимым, кровь из сердца и паренхиматозные органы.
25. Некробактериозы (некротические поражения конечностей, слизистой полости рта, внутренних органов). Для бактериологического и биологического исследований посылают омертвевший участок ткани, тщательно обмытый кипяченой теплой водой и высушенный ватным тампоном.
Пораженную ткань соскабливают стерильной острой ложечкой вплоть до неизмененных слоев ткани, захватывая несколько и последние. Из пораженных органов и тканей вырезают некротические участки вместе с прилегающей здоровой тканью.
26. Столбняк. Для бактериологического исследования из мест глубоких ранений берут кусочки ткани и раневой секрет.
27. Ботулизм. Для бактериологического и биологического исследований в лабораторию направляют содержимое желудка в объеме 100-200 мл и части паренхиматозных органов, а также пробы подозрительных кормов (силос, зерно, отруби, мясные и рыбные отходы и т. п.). Корма отбирают по нескольку проб из разных мест. Вес пробы не менее 100 г.
Патологический материал доставляют в термосе со льдом. Консервировать пробы нельзя.
Пробы кормов доставляют в светонепроницаемой таре, предохраняя от высыхания.
28. Туберкулез. При подозрении на туберкулез легких для бактериологического исследования берут мокроту из трахеи путем введения в нее стерильного ватного тампона на проволоке через трахеотубус.
При подозрении на туберкулез вымени для исследования берут молоко. При этом руки должны быть тщательно вымыты, продезинфицированы спиртом.
После предварительного обмывания и дезинфекции вымени 70%-ным спиртом первые порции молока (из подозрительной четверти вымени) сдаивают, а затем берут порции молока в начале, в середине и в конце дойки общим количеством 150-250 мл. Бутылку закрывают стерильной пробкой или стерильным ватным тампоном.
Для бактериологического исследования на туберкулез от убитых или павших животных посылают кусочки измененных органов и тканей со свежими, еще неинкапсулированными и необызвествленными поражениями.
Взятый материал консервируют в 30% -ном стерильном водном растворе глицерина.
Трупы павших или убитых птиц для исследования на туберкулез направляют целиком.
Для гистологического исследования посылают кусочки пораженных органов и лимфатических узлов, фиксированные в 10%-ном растворе нейтрального формалина.
29. Паратуберкулез. Для прижизненной бактериологической диагностики паратуберкулезного энтерита берут кал от больных животных и извлекают из него обрывки слизистой оболочки, кусочки с кровью или комочки слизи. Отобранный материал помещают в стерильные пробирки или банки, закрытые корковыми, резиновыми или притертыми пробками. С той же целью у подозрительных по заболеванию (поносящих) животных берут соскобы со слизистой оболочки прямой кишки. Материал пересылают в лабораторию в пробирках.
Для посмертной бактериологической диагностики от трупа павшего или убитого животного в лабораторию направляют кусочки пораженного кишечника и измененные брыжеечные лимфатические узлы.
Для гистологического исследования другую часть того же материала консервируют в 10%-ном растворе нейтрального формалина (см. пункт 15).
Для серологической диагностики в лабораторию направляют кровь или сыворотку крови.
30. Бруцеллез. Для бактериологического исследования в лабораторию посылают: абортированный плод целиком с плодовыми оболочками или в исключительных случаях желудок плода с содержимым, перевязанный со стороны пищевода и двенадцатиперстной кишки, паренхиматозные органы плода и плодовые оболочки. В крайнем случае, на исследование можно послать слизь и другие выделения из матки абортировавшего животного.
Кроме того, в лабораторию направляют содержимое гигром (бурситов), абсцессов, влагалищную слизь, молоко.
От убитых с диагностической целью животных направляют паренхиматозные и половые органы, вымя, мочевой пузырь, а также паховые, надвымянные, парааортальные, гипогастральные, подвздошные, аксилярные, предлопаточные, заглоточные, подчелюстные и мезентериальные лимфатические узлы. Если узлы парные, то направляют правый и левый.
Для серологического исследования в лабораторию посылают кровь или сыворотку крови, а также молоко в количестве 5-7 мл.
31. Инфекционный эпидидимит. Для бактериологического исследования направляют: от баранов — гноеподобное содержимое секвестров придатков, при вскрытии — измененные участки семенников; от овец — выделения из половых органов (в первые дни после аборта), при вскрытии — содержимое полости матки, измененные некротические участки рогов матки, яичники, глубокие тазовые лимфатические узлы и абортированные плоды.
Для серологического исследования направляют в лабораторию кровь или сыворотку крови.
32. Вибриоз. Для бактериологического исследования в лабораторию направляют:
а) от коров, нетелей и овцематок: абортированный плод (целиком с плодовыми оболочками или от крупных плодов — голову, желудок, печень, селезенку, легкие), плаценту (или часть ее), а также стерильно взятую слизь шейки матки;
б) от быков и баранов: препуциальную слизь, сперму и секрет придаточных половых желез, взятые с соблюдением стерильности;
в) от животных, убитых с диагностической целью, — влагалище, матку, лимфатические узлы тазовой полости.
Для исследования по реакции агглютинации (РА) берут цервиковагинальную слизь неоднократно перегуливающих коров и телок, не имеющих выделений из влагалища (гноя, крови и т. д.).
Материал для исследования на вибриоз берут в соответствии с утвержденной инструкцией о мероприятиях по диагностике, профилактике и ликвидации вибриоза крупного рогатого скота и овец.
Патологический материал доставляют в лабораторию в закрытой таре со льдом.
При отправке абортированных плодов следует иметь в виду, что они пригодны для исследования лишь в первые 10-12 часов после аборта. При необходимости плоды замораживают и отправляют не позже чем через двое суток после аборта.
Пробы спермы, секрета, препуциальной и влагалищной слизи, полученные от животных, транспортируют в термосе со льдом и доставляют в лабораторию в течение 6 часов после взятия.
33. Сап.
Для серологического исследования методом реакции связывания комплемента в лабораторию посылают сыворотку крови или цельную кровь подозрительного по заболеванию сапом животного.
Для гистологического исследования от павших и убитых животных посылают пораженные участки (узелки) кожи, легких и других паренхиматозных органов и лимфатические узлы, законсервированные в 10%-ном растворе нейтрального формалина.
34. Лептоспироз.
Для бактериологического исследования в лабораторию направляют цитрированную кровь, ликвор, мочу, кусочки свежих неконсервированных органов (печени, почки и др.).
Для гистологического исследования на наличие лептоспир от павших животных берут кусочки печени, почек, лимфатических узлов и мышц сердца.
При подозрении на заболевание животных лептоспирозом посылают мазки периферической крови от больных и павших животных для исследования с целью исключения пироплазмоза.
При необходимости серологического исследования посылают кровь или сыворотку ее в пробирках.
35. Рожа свиней.
Для бактериологического и биологического исследований лучше послать свежий труп с целью исключения чумы, пастереллеза, паратифа и других болезней.
При невозможности переслать весь труп для бактериологического исследования направляют:
а) трубчатую кость и пораженные суставы, очищенные от мышц;
б) кусочки пораженной кожи, селезенку, почку и сердце.
36. Листериоз.
Для бактериологического и биологического исследований посылают: свежие трупы поросят (не позднее 24 часов после их смерти) или паренхиматозные органы и голову; от трупов лошадей, крупного рогатого скота и овец — головной мозг и части всех паренхиматозных органов.
Для серологического исследования направляют кровь или сыворотку в пробирках, а при наличии маститов — молоко из пораженных долей вымени.
В случае абортов в лабораторию направляют абортированный плод.
37. Пастереллез (геморрагическая септицемия) крупного рогатого скота, овец, свиней, кроликов, птиц. Для бактериологического исследования посылают:
а) от больных животных — кровь, стерильно взятую из вены в пробирку;
б) от трупов — кровь из сердца (в запаянных пипетках), части паренхиматозных органов и трубчатую кость;
в) целые трупы птиц, кроликов и других мелких животных.
38. Псевдотуберкулез овец.
Для бактериологического исследования в лабораторию направляют пораженные внутренние органы и увеличенные в объеме лимфатические узлы.
39. Туляремия.
Для бактериологического исследования направляют кусочки селезенки, увеличенные лимфатические узлы, законсервированные в растворе глицерина или в смеси стерильного вазелинового масла (25 мл) с парафином (2,5 мл). Трупы мелких животных направляют в лабораторию целиком.
40. Сальмонеллезы.
Для бактериологического исследования в лабораторию направляют свежие трупы мелких животных или паренхиматозные органы (печень с желчным пузырем и лимфатическими узлами, селезенку, почку), мезентериальные лимфатические узлы, трубчатую кость, а в случае аборта — плод с плодовыми оболочками и околоплодной жидкостью.
В целях выявления бактерионосителей направляют фекалии для бактериологического исследования и кровь или сыворотку крови для серологического исследования по РА.
Не рекомендуется брать материал в период применения антибиотиков.
Для обнаружения сальмонелл отбор проб кала следует делать после дефекации из последней порции испражнений. При наличии в фекалиях крови, слизи, гноя, пленок их необходимо включить в пробу.
Если невозможно быстро доставить фекалии в лабораторию, их помещают в пробирку с консервирующим раствором. В качестве консерванта лучше всего применять глицериновую смесь или буферный раствор фосфорнокислых солей (рН 8,0). Количество помещенных фекалий должно составлять 1/3 объема консерванта.
41. Колибактериоз.
Для посмертной диагностики в лабораторию направляют свежий труп или патологический материал (сердце, паренхиматозные органы, трубчатую кость, голову и мезентериальные лимфатические узлы).
Для прижизненной бактериологической диагностики направляют фекальные массы от больных животных, взятые из прямой кишки в стерильные пробирки.
42. Колисептицемия птиц.
Для исследования в лабораторию направляют больных птиц.
43. Диплококковая септицемия.
Для бактериологического исследования направляют свежий труп или патологический материал: кровь из сердца (в запаянных пипетках), селезенку, печень, лимфатические узлы, пораженный сустав, трубчатую кость, головной мозг.
При заболевании коров, овец, свиней метритами направляют в стерильных пробирках ватные тампоны с истечением из половых органов, при маститах — молоко из пораженных долей вымени.
Зимой материал можно посылать замороженным. Необходимо иметь в виду, что в материале, сохраняемом в теплом месте (при 16-20°С), диплококки лизируются в течение 24-30 часов.
44. Мыт.
Материалом для исследования служит гной из невскрывшихся абсцессов лимфатических узлов. Гной берут стерильно при помощи шприца после обработки места прокола. В лабораторию гной доставляют в стерильной пробирке в неконсервированном виде. Если абсцессы уже вскрылись, то гной берут из носового истечения и вскрывшихся абсцессов ватным тампоном, увлажненным 25%-ным водным раствором глицерина.
В случае гибели лошадей направляют голову, кровь из сердца, кусочки селезенки, легких и других пораженных органов.
45. Респираторный микоплазмоз птиц.
В лабораторию направляют 5-6 свежих трупов или больных птиц или 5-6 погибших эмбрионов.
46. Инфекционная плевропневмония коз.
Для серологического исследования по РСК направляют сыворотку крови.
Для биологического исследования — пораженные участки легких или экссудат.
47. Маститы.
Для прижизненного бактериологического исследования направляют в стерильной посуде три порции молока, которое берут из пораженной доли вымени (первую в начале, вторую — в середине, третью — в конце доения), не менее 2 мл в каждой порции, а при наличии абсцессов — гной из них (путем пункции) и гнойные выделения из пораженных частей вымени.
Для посмертного исследования посылают пораженные части: лимфатические узлы вымени, легких; гной, взятый из абсцессов в кишечнике, печени; суставах, грудной полости и т. д.
48. Инфекционная агалактия.
Для бактериологического исследования направляют молоко, выделения из пораженного глаза, жидкость из суставов и отеков. От трупов павших или вынужденно убитых животных берут паренхиматозные органы и лимфатические узлы.
49. Бешенство.
Для исследования направляют в лабораторию с нарочным: свежий труп или голову собаки (кошки, лисицы, песца, овцы, теленка и др.), от крупных животных — голову или головной мозг — свежий (для серологического исследования неконсервированный) или консервированный в 30-50%-ном растворе глицерина.
50. Ящур.
Для исследования с целью определения типа (или варианта) возбудителя посылают патологический материал (стенки ящурных афт) от 2-3 больных в количестве не менее 5 г. Афты берут свежие, созревшие, непрорвавшиеся, плотной консистенции, не издающие гнилостного запаха.
51. Болезнь Ауески.
Для биологического исследования посылают: голову, головной мозг или же часть его (продолговатый мозг), кусочки селезенки, печени, легкого в стерильном чистом глицерине или в насыщенном растворе поваренной соли.
52. Ку-лихорадка.
Для исследования по реакции связывания комплимента (РСК) направляют: пораженные легкие, селезенку, плаценту в глицерине (см. пункт 6), а также кровь и секреты животных.
53. Оспа.
Для исследования направляют: снятые оспенные поражения, а от трупов — части пораженной кожи, оспенную лимфу, полученную из оспенных поражений кожи.
54. Инфекционная анемия лошадей.
Для гистологического исследования направляют кусочки печени, селезенки, легких, почек, сердца (предсердий и желудочков) размером 2×2 см, заключенных в пластмассовую, стеклянную или глиняную посуду; для гематологического исследования — стабилизированную оксалатом или цитратом натрия кровь и мазки крови (для выведения лейкограммы).
55. Инфекционный энцефаломиелит лошадей.
Для гистологического исследования направляют отдельные участки головного мозга (амониева рога, мозжечка, четыреххолмия, продолговатого мозга), кусочки печени, селезенки, почек, стенки предсердия и желудочка сердца. Материалы берут от свежих трупов и посылают в стеклянной посуде (не металлической).
56. Грипп лошадей.
Направляют легкие, трахею, бронхиальный экссудат, смывы из носовой полости больных животных для постановки биопробы и выделения вируса в культуре клеток с помощью реакции гемадсорбции.
57. Африканская чума однокопытных.
Для исследования с целью исключения возбудителей бактериальных инфекций направляют: кусочки паренхиматозных органов, а также кровь (на РСК), молоко, мочу и тканевые жидкости (экссудат) от больных и подозрительных по заболеванию животных.
58. Чума крупного рогатого скота.
Для исследования по реакции диффузионной преципитация направляют: предлопаточные и мезентериальные лимфатические узлы, селезенку, печень павших или убитых животных, а для исследования по РСК — кровь от больных и подозрительных по заболеванию животных.
59. Контагиозный пустуллезный стоматит овец (контагиозная эктима).
Для биологического исследования направляют: везикулы, корки, струпья, некротические участки кожи, слизистых оболочек, паренхиматозных органов в глицерине (см. пункт 6) и содержимое везикул.
60. Вирусный (энзоотический) аборт овец и коз.
Для биологического исследования направляют: пораженные участки плаценты, паренхиматозные органы абортированных плодов и выделения из половых органов, а для серологического исследования кровь или сыворотку крови от больных животных.
61. Чума свиней.
Для исследования с целью исключения возбудителей бактериальных инфекций направляют: трупы поросят, паренхиматозные органы, мезентериальные, подчелюстные, бронхиальные лимфатические узлы, трубчатые кости, толстый отдел кишечника, а также от больных животных для гематологического исследования мазки крови или стабилизированную кровь.
62. Африканская чума свиней.
Для исследования с целью исключения возбудителей бактериальных инфекций направляют: селезенку, лимфатические узлы от павших или убитых животных. От больных животных — стабилизированную кровь (для исследования по реакции гемадсорбции).
63. Инфекционный энцефаломиелит свиней (болезнь Тешена).
Для исследования направляют: трупы поросят, головной и спинной мозг, паренхиматозные органы в 30%-ном растворе глицерина на физиологическом растворе — для биологического исследования и в спирт-ацетоне (поровну) — для гистологического.
64. Вирусная пневмония свиней. Направляют пораженные участки легких, регионарные лимфатические узлы для биопробы и такой же материал, зафиксированный в формалине, для гистологических исследований.
65. Болезни птиц (псевдочума, оспа-дифтерит, нейролимфоматоз, спирохетоз, лейкоз).
Для исследования направляют свежие трупы птиц.
При спирохетозе — от больных и подозрительных по заболеванию направляют тонкие, нефиксированные мазки крови.
66. Орнитоз птиц.
Для исследования направляют: трупы птиц, паренхиматозные органы, экскременты и содержимое кишечника.
Для серологического исследования — кровь или сыворотку.
67. Инфекционный ларинготрахеит птиц.
Для исследования направляют: трупы кур, паренхиматозные органы, пораженную трахею, гортань и больную птицу.
68. Грипп птиц.
аправляют кровь или сыворотку крови для постановки реакции задержки гемагглютинации (РЗГА).
69. Инфекционный бронхит кур.
Для исследования направляют: трупы цыплят, трахею, легкие и больную птицу.
70. Вирусный гепатит утят. Для исследования направляют: трупы утят, паренхиматозные органы, мозг.
71. Инфекционный энтерит гусят.
Для исследования направляют трупы гусят или их паренхиматозные органы.
72. Алеутская болезнь норок.
В лабораторию направляют от только что павших или убитых больных норок кусочки печени, селезенки (0,5 X 1,5 X 2,5 см), брыжеечный и заглоточный лимфатические узлы, фиксированные в 10%-ном растворе формалина. Кроме этого, из двух-трех лимфоузлов готовят мазки-отпечатки (4-6 отпечатков из каждого) на чистом обезжиренном предметном стекле. Готовые мазки-отпечатки подсушивают на воздухе, после чего заворачивают в чистую бумагу и отсылают в лабораторию.
73. Чума плотоядных.
Для исследования направляют трупы павших зверей и собак, паренхиматозные органы, лимфатические узлы, головной мозг.
74. Перипневмония крупного рогатого скота. Для серологического исследования посылают сыворотку крови.
Для биологического исследования от павших или убитых животных направляют:
а) при острых формах — выпот из междольчатой соединительной ткани легкого, а при наличии плеврита — и плевральный выпот (стерильно взятый в пипетки). Одновременно посылают кусочки пораженного легкого размером 4 X 5 см;
б) при хронических формах — кусочки секвестров, не подвергшихся полному распаду (некрозу), которые консервируют также в глицерине.
Во всех случаях необходимо посылать средостенные лимфатические узлы (избегая их надрезов). Зимой можно доставлять материал замороженным, не допуская его оттаивания. Для патологоанатомического и гистологического исследований посылают зафиксированные патологически измененные легкие или часть их.
75. Лейкоз.
В лабораторию направляют материал для гематологического и гистологического исследований.
Для гематологического исследования направляют:
а) стабилизированную кровь, взятую из яремной вены в пробирку с резиновой пробкой. В качестве стабилизаторов применяют: лимонно- или щавелевокислый натрий, добавляемые соответственно по 30 и 15 мг на 10 мл крови. Хранить такую кровь можно не более суток; гепарин — из расчета 5 ЕД на 1 мл крови; ЭДТА (двунатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты) — 1-2 капли 10%-ного раствора на 5 мл крови;
б) мазки крови для выведения лейкограммы. Их готовят на предметных стеклах при взятии крови из вены и быстро высушивают на воздухе, после чего на мазке обозначают номер животного и дату взятия крови. Мазки должны быть равномерно тонкими. Фиксируют и окрашивают их не позже 1-2 суток с момента изготовления. Для подсчета ядерных элементов готовят мазки из костно-мозгового пунктата, а также берут пунктат в пробирки (Флоринского, Уленгута) в количестве 0,2 мл.
Мазки из костно-мозгового пунктата высушивают на воздухе. У крупного рогатого скота пунктат берут из грудной кости.
Для гистологического исследования в лабораторию направляют от павших или убитых животных кусочки селезенки, лимфатических узлов, печени, почек, легких, предсердий, скелетных мышц, грудной кости и отдельных участков желудочно-кишечного тракта. Материал (кусочки 1×1 см) фиксируют 10%-ным водным раствором нейтрального формалина.
Достарыңызбен бөлісу: |