Биохимия растений
РАБОТА 9 Получение раствора растительного
жүктеу/скачать 1.32 Mb. Pdf көрінісі
|
- Бұл бет үшін навигация:
- Цель работы
| РАБОТА 9
Получение раствора растительного белка и реакции его осаждения При рассмотрении механизма осадочных реакций следует исхо- дить из того, что белки являются амфотерными электролитами, и устойчивость их коллоидных растворов обусловлена зарядом и нали- чием водной оболочки. Все реакции осаждения можно разделить на две группы: обра- тимые и необратимые (денатурация). Денатурация белка - это внут- римолекулярная перегруппировка его молекулы, не сопровождающа- яся расщеплением пептидной связи. Аминокислотная последователь- ность белка не изменяется. Денатурация вызывается высокими температурами - нагревани- ем раствора белка до 60...80 °С, действием низких и высоких значе- ний рН, интенсивным перемешиванием растворов белка или встряхи- ванием, а также действием поверхностно-активных веществ, облада- ющих полярными молекулами. Различают обратимую и необратимую денатурацию. При необ- ратимой денатурации, когда белки подвергаются сравнительно сла- бым неблагоприятным воздействиям, белки могут вновь приобретать биологическую активность в случае прекращения действия денатури- рующего агента или при добавлении каких-либо других веществ, а при необратимой денатурации биологическую активность денатури- рованных белков восстановить нельзя. Цель работы: получить раствор растительного белка и изучить его основные свойства. Объект исследования: гороховая мука. Ход работы. I. Получение вытяжки белка. 5 г гороховой муки насыпать в колбочку и залить 25 мл 10%-ного раствора сернокислого 45 аммония (NH 4 ) 2 SO 4 , встряхивать три минуты. Затем дать настояться 30 минут и профильтровать через фильтр, предварительно смоченный тем же раствором сернокислого аммония. Полученный фильтрат яв- ляется коллоидным раствором белка глобулина (легумина), с кото- рым проделать следующие реакции. II. Осаждение глобулина. Налить в пробирку 1 мл раствора и прибавить 10-15 мл воды, встряхнуть. В другую пробирку налить столько же чистой воды и сравнить обе пробирки. В пробирке с гло- булином образуется тонкая муть, вследствие выпадения белка в оса- док. Если в эту пробирку добавить раствор сернокислого аммония, то муть постепенно исчезнет благодаря растворению выпавшего осадка белка. III. Высаливание белка. Высаливанием белка называется обра- тимое осаждение белка при помощи нейтральных солей (сульфат магния, хлористый натрий, сульфат натрия). Реакция обусловлена снятием водных оболочек с белковых мицелл и одновременной нейтрализацией электрического заряда. В чистую пробирку налить 2 мл вытяжки белка и насыпать су- хой поваренной соли NaCl. Когда концентрация раствора достигнет примерно 50%, глобулин начнет выпадать в осадок, раствор будет мутнеть. Затем налить избыточное количество воды и встряхнуть. В результате муть исчезнет, т.к. белок раствориться. IV. Денатурация белка. Налить в чистую пробирку 2 мл вытяж- ки глобулина и добавить 3 капли крепкой соляной кислоты. Белок выпадает в виде белого осадка. Белок свернется необратимо, т.к. оса- док не раствориться при добавлении раствора сернокислого аммония. Такой же результат получиться, если вытяжку белка прокипя- тить. жүктеу/скачать 1.32 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|