Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор В. В. Мефодьев Тюмень 2016
Симбионтная флора марит Opisthorchis felineus
жүктеу/скачать 2.68 Mb. Pdf көрінісі
|
| 5.2. Симбионтная флора марит Opisthorchis felineus
Экспериментально доказана аттенуация вирулентных свойств некоторых видов микроорганизмов после пассирования через мариты O.felineus. Выделенные симбионты из марит O.felineus представляют L – трансформированные формы, которые обусловливают более частое хроническое носительство у переболевших инфекционными болезнями на фоне описторхозной инвазии. Кроме того, в маритах O.felineus, выделенных у лабораторных животных, выявлена неидентифицированная кокковая флора, при внутрибрюшном введении которой интактным сирийским хомякам в печени животных при морфологическом исследовании определялись изменения, характерные для заражении метацеркариями O.felineus: патология билиарного тракта заключалась, прежде всего, в выраженных пролиферативных реакциях элементов холангиоцеллюлярного дифферона [110, 111, 157]. Вопрос о микробоносительстве гельминтов в последнее время активно дискутируется в литературе. В процессе исследований по выявлению определенных видов патогенных бактерий в организме O. felineus выделялись условно-патогенные и сапрофитические микроорганизмы (УПМ). Сапрофитные и условно-патогенные виды, вступающие во взаимоотношения с организмом хозяина можно рассматривать как «загрязнителей», а более правильно как равноценных видов, вступающих во взаимоотношения как с хозяином (макроорганизмом), так и гельминтом. [27,97] Сапрофитические УПМ наряду с патогенными агентами используют своих хозяев в качестве среды обитания и, вступая с ними в межвидовые отношения, могут обмениваться генетической информацией. Поэтому при выявлении ассоциативных комплексов микробов в гельминтах важна индикация каждого вида, обладающего набором специфических ферментов. Нами проведен эксперимент, в котором 20 белым беспородным мышам массой 8-10 г вводили внутрибрюшинно 0,5 мл взвеси марит O.felineus, растертых стерильно в ступке с кварцевым песком. Наблюдение за животными проводили в 130 течение 24 сут. В качестве контроля использовали посев на стерильные чашки с мясо-пептонным агаром взвеси марит в дозе 0,1 мл. Идентификацию выделенных колоний проводили на дифференциально-диагностические среды для выращивания энтеробактерий (Эндо, Левина, Плоскирева) с тестированием расширенного биохимического ряда 4 . Анализ полученных данных показал, что микропаразитоценоз паренхиматозных органов белых мышей, зараженных взвесью марит O.felineus, представлен 9 видами бактерий (таблица 5.2). Таблица 5.2 Характеристика биологических свойств бактерий разных видов, выделенных из паренхиматозных органов белых мышей, зараженных маритами O.felineus Вид бактерий Численность (КОЕ/мл) Чувствительность к исследованным анти- биотикам Резистентность к исследованным к анти- биотикам Escherichia coli 10 6 амикацин, амоксициллин цефотаксим, цефуроксим цефаперазон, ампициллин отсутствие устойчивости Enterobacter cloacae 10 1 амикацин, цефотаксим налидиксовая кислота амоксициллин, цефуроксим отсутствие устойчивости Citobacter freundii 10 1 амикацин, цефаперазон налидиксовая кислота меропенем, амоксициллин отсутствие устойчивости Pseudomonas aeruginosa 10 1 цефаперазон, меропенем ампициллин, цефотаксим амикацин Acinetobacter calcoaceticus 10 6 амоксициллин, цефотаксим амикацин цефаперазон цефуроксим Staphylococcus aureus 10 2 ванкомицин, оксациллин рифампицин бензилпенициллин эритромицин тетрациклин, фузидин Staphylococcus epidermidis 10 5 бензилпенициллин, ванкомицин, гентамицин ципрофлоксацин, фузидин оксациллин рифампицин Bacillus cereus 10 3 ванкомицин, оксациллин линкомицин, тетрациклин фузидин бензилпенициллин ципрофлоксацин Bacillus subtilis 10 4 доксициклин, канамицин цепарин ампициллин оксациллин, бензилпенициллин 4 Исследования проведены соместно с к.м.н. Е.В. Сперанской на базе бактериологической лаборатории ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Тюменской области» 131 Основная масса микробного состава приходилась на энтеробактерии (E.coli, E.cloacae, C. freundii). Кроме того, выделялись аэробные неферментирующие грамотрицательные палочки (P.aeruginosa, A.calcoaceticus), кокки (S.aureus, S.epidermidis), спорообразующие грамположительные палочки (B.cereus, B.subtilis). Количественное содержание всех микроорганизмов в одном органе варьировало от 10 до 10 6 КОЕ. Наибольшее число видов микроорганизмов выделено из печени (9), из почек – 3 вида (B.cereus, S.epidermidis, B.subtilis), из селезенки 1 вид (E.coli). Следовательно, наиболее низкая встречаемость бактерий была в селезенке, наибольшая – в печени. При анализе антибиотикочувствительности выделенных бактерий к стандартному набору из 11 антибактериальных препаратов установлено, что среди грамположительных бактерий S. aureus был резистентен к 4 антибиотикам (бензилпенициллину – БП; эритромицину – Э; тетрациклину – Т; фузидину – Ф); чувствителен – к 3 антибиотикам (ванкомицину – В; оксациллину – ОЦ; рифампицину – РФ). S.epidermidis был устойчив к 2 антибиотикам – ОЦ, РФ; чувствителен – к 5 антибиотикам (БП, В, гентамицину – Г; ципрофлоксацину – ЦФ; Ф). B.cereus был устойчив к БП и ЦФ; чувствителен – к В, ОЦ, линкомицину – ЛМ; Т, Ф. S.aureus и S.epidermidis были чувствительны к специфическому бактериофагу. Среди грамотрицательных бактерий штаммы P.aeruginosa были устойчивы у ампициллину – АП; цефотаксиму – ЦТ; амикацину – АЦ; цефуроксиму – ЦР; чувствительны к цефаперазону (ЦП) и меропенему (МП). A.calcoaceticus был устойчив к ЦП и ЦР; чувствителен – амоксициллину (АЦ); ЦТ, АК. Среди штаммов E.cloacae, C. freundii, E.coli резистентных к антибиотикам не было; чувствительны эти штаммы были соответственно E.cloacae – к АЦ, ЦТ, налидиксовой кислоте (НК), АК, ЦР; C. freundii – АЦ, ЦП, НК, МП, АК; E.coli – АЛ, АЦ, ЦП, ЦТ, АК, ЦР. 132 При посеве взвеси марит O.felineus после инкубации в термостате при температуре 37ºС в течение 24 час на чашках были обнаружены колонии бактерий, которые отнесены также к 9 видам этого семейства (E.coli, E.cloacae, C. freundii P.aeruginosa, A.calcoaceticus, S.aureus, S.epidermidis, B.cereus, B.subtilis), как и в высевах взвеси органов экспериментальных животных. Количественное содержание выделенных бактерий из взвеси нативных марит определялось в пределах 10 - 10 2 КОЕ. Учитывая стерильность внутренних органов здоровых лабораторных животных, полагаем, что выделение указанных микроорганизмов из паренхиматозных органов экспериментальных животных свидетельствует об инфицированности последних микроорганизмами, содержащимися в маритах. Значительно более высокая интенсивность обсеменения печени и почек белых мышей обусловлена развитием инфекционного процесса в этих органах. Результаты проведенных исследований показывают возможное участие вышеперечисленных микроорганизмов в патогенезе осложнений описторхозной инвазии и открывают перспективы применения антибактериальных препаратов при микст инфекции и инвазии. жүктеу/скачать 2.68 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|