Бұл әдіс 4 азоттық негіздер бойынша 5’ ұшты радиоактивті белгісі бар ДНК-ның химиялық модификациясына негізделген. Арнайы төрт химиялық реакциялар арқылы азоттық негіздерді өзгеріске ұшыратып, фосфодиэфирлік байланыстарды үзеді.
Сэнгер өз жұмысын жариялаған кезде Аллан Максан мен Вальтер Гилберт атты екі зерттеуші ДНҚ тізбегін алудың тағы бір әдісін ойлап тапты. Бұл әдіс сол кезде танымал болды, бірақ кейінірек Сангер әдісінің жетілдірілуіне байланысты ығыстырылды.Sanger әдісіне қарағанда Максан мен Гилберттің секвенирленуі (немесе химиялық секвенция, ол да белгілі), будандастыру реакцияларын қамтымайды. Әдістеме бір жағында реактивті агенттермен таңбалаудан тұрады, содан кейін тазарту процесі жүреді.Бұл техниканың жағымсыз жақтарының бірі оның күрделілігінде және пайдаланушы үшін қауіпті химиялық заттарды қолдануда жатыр. Химиялық үзілістерді DMS, құмырсқа қышқылы, гидразин және гидразинді тұзбен жағу арқылы индуцирует.
G G+A T+C C
3′
A
A
G
C
A
A
C
G
T
G
C
A
G
5′
Ұзын фрагмент
Қысқа фрагмент
G
A
Достарыңызбен бөлісу: |
