Тема 4. Ферменты бактерий. Методы культивирования грибов

-сформировать знания об биохимических свойствах микроорганизмов;

- научить проводить идентификацию выделенной чистой культуры микроорганизма.

- изучения характера роста дрожжеподобных и плесневых грибов на питательных средах

1.Ознакомиться с литературой по данной теме.

2. Подготовиться по одной или нескольким из предлагаемых форм для проведения занятия

3.Решить тесты, сиутационные задачи

4. Провести поиск и подготовить интерактивные программы

5. Составить перечень вопросов для консультации

6. Подготоовить документы для портфолио

Раздаточный материал:

Электронная рабочая тетрадь

интерактивная обучаюющая программа

алгоритмов диагностики и профилактики заболеваний микробного генеза консультации по теме, решение

тесты

ситуационные задачи

схемы

рисунки

Основная:

1. 
   Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. - М.: МИА, 2001.- 734 с.
   
2. 
   Табаева А.А. Микробиология поражений полости рта при стоматологических и инфекционных заболеваниях. Учебное пособие. – Алматы, 2006. -127с.
   

3. 
   Тец В.В. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии. – М., 2002
   
4. 
   Компьютерная программа “Диаморф” - “Медицинская микробиология” - атлас-руководство по бактериологии микологии, протозоологии и вирусологии под редакцией акад. проф.Воробьева А.А.
   

1. Медициналық микробиология , Алматы,2011,683 б Рамазанова Б.А, Кудайбергенұлы К.К редакциялаумен.

2. Б.А. Рамазанова, А.Л. Котова және т.б. Микроорганизмдер морфологиясы.(оқу- әдістемелік құрал) Алматы,2007, 131б.

3. Б.А. Рамазанова, К.К Құдайбергенұлы, А.Л Котова. Инфекция туралы ілім.(оқу-құралы) Алматы 2007,111 б .

4. Б.А.Рамазанова, А.Л Котова және т.б. Микроорганизмдер физиологиясы. (оқу - әдістемелік құрал). Алматы,2007, 126 б.

5. Б.А. Рамазанова, А.Л Котова және т.б. Микроорганизмдер экологиясы. (оқу- құралы). Алматы, 2007, 95 б.

6. Б.А. Рамазанова, А.Л Котова және т.б. Микробтарға қарсы қолданылатын препараттар (оқу- құралы) Алматы, 2007.,47 б.

7. Микробиология және вирусология (жалпы бөлімі): Оқу құралы /Ү.Т.Арықпаева, К.Х.Алмағамбетов, Н.М.Бисенова, Н.Б.Рахметова, Г.Д.Асемова, Койшебаева К.Б., Бисимбаева С.К., Калина Н.В./. 1-ші басылым. (Медициналық және фармацевтикалық мамандық бойынша жоғары оқу орындарының студенттеріне арналған оқу құралы) - Астана, 2005. – 208 б.

8. «Микроорганизмдердің морфологиясы» оқу құралы, Астана, 2004, 32б.; Микробиология және вирусология (жеке бөлімі): Оқу құралы /Ү.Т.Арықпаева, К.Х.Алмағамбетов, Н.М.Бисенова, Ә.Ө.Байдүйсенова, Н.Б.Рахметова, Г.Д.Асемова /1-ші басылым. (Медициналық және фармацевтикалық мамандық бойынша жоғары оқу орындарының студенттеріне арналған оқу құралы) - Астана, 2006. – 199 б.

Дополнительная:

1. Жалпы микробиологиядан лабораториялық сабақтар бойынша оқу-әдістемелік құрал (А.Л. Котованың ред.). – Алматы, 1997.

1.Richard V Georing, Hazel M Docrell, Mark Zukerman, Derek Wakelin, Ivan M Roit, Cedric Mims,Peter L Chiodini “Medical Microbiology”,4^th Edithion, 2008, UK, p.656.

2.Jacquelyn G Black “Microbiology”,7 ^th ,WILEY,2010,p.846

3. Patric R Muray,Ken S Rosenthal, Michael F Pfaller “Medical Mcrobiology”,5^th Edithion, 2008,p.962

4. Cedric Mims, Hazel M Docrell, Richard V Georing , Ivan M Roit, Derek Wakelin, Mark Zukerman, “Medical Microbiology”,3^th Edithion, 2004, ELSEVIER MOSBY, p.659.

5. Geo F Brooks,Kaaren C Carroll, Janett S Butel, Stephen F Morse,24^th Edithion, JAWETZ,MELNICK&ADELBERG^S

6. Mark Gladwin, Bill Trattler, “Clinical Microbiology”, 4^th Edithion, MedMaster, Miami, 2007, p.393.

7. Anathanarayan R., Paniker C.K.J. Text book of microbiology. Orien Longman. Seven edition, 2005.

8. Medical microbiology. Ed.by Inta Ozols. Elsevier Mosby, 2004.

Дополнительная:

1.Robert M Diamond “Designing Assessing Courses and Curricula”, 3^th Edithion,Jossey-Bass,2008,p.487

2.Patric Leonardi “Microbiology Study Guide: Key Review Questions and Answers”, Silver Educational Publishig,2005,p.78

3.N.Cary Engelberg,Victor DiRita,Terence S Dermondy, “Mechanisms of Microbial Disease” , 4^th Edithion,Lippincton Williams&Wilkins,2007,p.762

4.William F Strohl, Harriet Rouse, Bruce D Fisher, “Microbiology”, Lippincton^s,2001,p.516

5.Jawetz, Melnic & Adelberg. Medical microbiology. Singapore. 2004.

6.Arora D.R. Text book of microbiology. CB. 2001.

7.William A. Stradit, Harriet Rouse, Bruce D. Fisher. Microbiology. 2001, Lippencott, Williams and Wilkins

8.Black Jacquelyn G. Microbiology. Principles & Applications, 1996 by Prentice-Hall, New Jersey

9.Medical microbiology. An introduction to Infectious Diseases. Ed. by Ryan Kenneth J. Appleton and Lange. Stamford, Connecticut, 1998.

10.Toni Hart, Paul Shears. Atlas de Roche de Microbiologie. - Paris., 1997.- 314р.

Контроль ( вопросы,тесты, задачи и пр):

Вопросы:

1. 
   Ферменты бактерий
   
2. 
   С какой целью изучают ферменты у бактерий
   
3. 
   Какие ферменты изучают у бактерий
   
4. 
   Какие ферментативные свойства изучают у бактерий?
   
5. 
   Практическое использование биохимической активности микроорганизмов для диагностики инфекционных заболеваний
   
6. 
   Методы идентификации бактерий.
   
7. 
   Что такое "пестрый ряд" Гисса?
   
8. 
   Как определяется способность ферментировать белки?
   
9. 
   Как определить выработку индола, сероводорода?
   
10. 
    Механизм действия дифференциально - диагностических сред Эндо, Левина, Плоскирева.
    
11. 
    Какие ферменты участвуют в процесса аэробного дыхания?
    
12. 
    По каким признакам проводится идентификация чистой культуру микроба?
    
13. 
    На каких средах определяют ферменты?
    

1. На 2 день при выделении чистой культуры микробоваэробов производят:

a) Посев на среду Гисса

b) Идентификацию культуры

c) Посев на скошенный МПА

d) Посев на МПА

e) Определение протеолитических ферментов

2. Метаболизм бактерий происходит в результате:

a) Прогрессивного роста

b) Катаболизма

c) Не зависит от условий внешней среды

d) Анаболизма

e) Трансаминазы

3.На какой день исследования проводится идентификация выделенной культуры:

a) Второй

b) Первый

c) Четвертый

d) Третий

e) Не проводится

4. В результате метаболических реакций происходит:

a) Выделение энергии

b) Потребление энергии

c) Аккумуляция энергии в молекулах АТФ

d) Расщепление органических веществ до минеральных

e) Усвоение азота из неорганических соединений

5. Наличие ферментов у бактерий выявляют по разложению:

a) Углеводов

b) Протеинов

c) Желатины

d) Перекиси водорода

e) Всеми перечисленными методами

6. Идентификацию выделенной культуры производят с помощью определения следующих признаков:

a) Морфологических

b) Тинкториальных

c) Культуральных

d) Биохимических

e) Всех упомянутых признаков

7. Бактериальные ферменты служат для:

a) Идентификации бактерий

b) Обеспечения жизнедеятельности клетки

c) Транслокации химических групп

d) Всех упомянутых целей

e) Ни один из приведенных ответов не правильный

8. Какому из указанных видов работы, обозначенных цифрами (левая колонка), cоответствует день исследования, обозначенный буквами (правая колонка):

1. Посев на среду Гисса А. Работа 2 дня исследования

2. Идентификация культуры Б. Работа 1 дня

3. Посев на скошенный МПА В. Работа 4 дня

4. Посев на МПА Г. Работа 3 дня

5. Характеристика колоний

9. Определение протеолитических ферментов производят припосеве на:

a) Желатину

b) Среду Левина

c) Среду Ру

d) Свернутую сыворотку

e) Среду Гисса

10. Для определения сахаролитических ферментов посев производят на:

a) Желатину

b) Среду Китт-Тароцци

c) Молоко

d) Кровяной агар

e) Ни на одну из упомянутых сред

11. С помощью фермента каталазы бактерии разрушают:

a) Липиды

b) Углеводы

c) Белки

d) Перекись водорода

e) Воду

12. Для культивирования грибов используют:

b) Сусло-агар

c) Среду Тинсдаля

d) Среду Плоскирева

e) Среду Рапоппорт

13. Для идентификации чистой культуры не используют изучение:

a) Морфологии

b) Тинкториальных свойств

c) Культуральных свойств

d) Определение антибиотикочувствительности

e) Биохимических свойств

14. Конститутивные ферменты

a) Постоянно синтезируются в микробных клетках в определенных концентрациях

b) Концентрация резко вырастает при наличии соотвествующего субстрата

c) В отсутствии субстрата находятся в следовых количествах

d) Концентрация не зависит от наличия соотвествующего индуктора

e) Относятся к факторам роста микроорганизмов

15. Индуцибельные ферменты:

a) Постоянно синтезируются в микробных клетках в определенных концентрациях

b) Концентрация резко вырастает при наличии соответствующего субстрата

c). В отсутствии субстрата находятся в следовых количествах

d) Концентрация не зависит от наличия соответствующего индуктора

e) Относятся к факторам роста микроорганизмов

16. Пигменты микроорганизмов:

a) Участвуют в получении энергии

b) Участвуют в биологическом окислении

c) Предохраняют от воздействия УФ-лучей

d) Являются источником углерода

e) Являются источником азота

17. Ферменты патогенности бактерий:

a) Плазмокоагулаза

b) Гиалуронидаза

c) Лецитиназа

d) Стрептокиназа

e) Все перечисленное

18. Назовите микроорганизмы, не способные синтезировать органические соединения:

a) Прототрофы

b) Фототрофы

c) Хемоавтотрофы

d) Ауксотрофы

e) Хемогетеротрофы

19. На третьи сутки от момента поступления больного в инфекционного отделения из бактериологической лаборатории поступил ответ: из крови, присланной на исследование, выделена брюшнотифозная палочка. Какой метод диагностики был использован для подобного заключения:

a) Биологический

b) Серологический

c) Биологический

d) Гистологический

e) Бактериологический

20. На каком этапе выделения чистой культуры была допущена ошибка:

a) Бактериоскопия исследуемого материала

b) Посев на МПА

c) Макро- и микроскопическое исследование выросших колоний

d) Определение сахаролитических свойств

e) Посев на скошенный МПА

21 Что не относится к фазам роста бактерий:

a) Экспоненциальная

b) Логарифмическая

c) Стационарная

d) Бактериостатическая

e) Отрицательное ускорение

22. Микроорганизмы, получающие энергию за счет окислительно-восстановительных реакций:

a) Фототрофы

b) Хемотрофы

c) Ауксотрофы

d) Прототрофы

e) Автотрофы

23. Определение сахаролитических ферментов производят при посеве на:

a) Среду Ресселя

b) Молоко

c) Среду Китт-Тароцци

d) Кровяной агар

e) Среду Гисса

24. Период генерации это:

a) Время адаптации микробов к к изменившимся условиям среды

b) Период восстановления поврежденных структур

c) Объединение с бактериальной хромосомой

d) Период в течение которого осуществляется деление клетки

e) Период уменьшения скорости отмирания клеток

25. Для определения индола используется способ:

a) Мореля

b) Кауфмана

c) Манту

d) Д’Эреля

e) Дригальского

26. Что не входит в работу второго дня при выделении чистой культуры микробов-аэробов:

a) Микроскопическое исследование колоний

b) Мазок – окраска по Граму

c) Посев на скошенный МПА

d) Анаэростат

e) Термостат

27. При посеве культуры в МПБ через 24 часа индикаторные бумажки, укрепленные под пробкой в пробирке, изменили цвет – одна – порозовела, другая – почернела. Что неправильно вответах:

a) Одна бумажка смочена щавелевой кислотой, другая ацетатом свинца

b) Культура выделяет протеолитические ферменты

c) Наблюдается муравьинокислое брожение

d) Образуется индол

e) Образуется сероводород

28. При снятии петлей изолированной колонии с МПА установлено, что колония слизистая, тянется за петлей. Что можно сказать о микробе:

a) Образует спору

b) Обладает слизистой капсулой

c) Выделяет ацетилметилкарбинол

d) Имеет фермент триптафаназу

e) Способна утилизировать цитрат

29. Пигменты бактерий:

a) Вызывают свечение

b) Используются для идентификации

c) Предохраняют от действия УФ-лучей

d) Имеются у капсульных бактерий

e) Участвуют в окислительно-восстановительных реакциях

30. Аэробы осуществляют:

a) Субстратное фосфорилирование

b) Брожение

c) Окислительное фосфорилирование

d) Гликолиз

e) Пентозофосфатный шунт

31. Под ростом бактерий понимают:

a) Трансформацию

b) Координированное воспроизведение всех компонентов клетоки

c) Увеличение числа клеток в популяции

d) Увеличение массы клеток

e)Сегрегацию дочерних цепей ДНК

32. Период генерации это:

a) Время адаптации микроба к изменившимся условиям среды

b) Период восстановления поврежденных культур

c) Объединения с бактериальной хромосомой

d) Период, в течение которого осуществляется деление клетки

e) Период уменьшения скорости отмирания клеток

33. Пигменты микроорганизмов:

a) Участвуют в получении энергии

b) Участвуют в биологическом окислении

c) Предохраняют от действия УФ-лучей

d) Являются источником углерода

e) Являются источником азота

34. Метаболизм - совокупность процессов:

a) Катаболизма и диссимиляции

b) Катаболизма и анаболизма

c) Катаболизма и ауксотрофности

d) Анаболизма и ассимиляции

e) Энергетического и пластического метаболизма

35. Аэробы осуществляют:

a) Субстратное фосфорилирование

b) Брожение

c) Окислительное фосфорилирование

d) Гликолиз

e) Пентозофосфатный шунт

36. Анаэробы образуют АТФ посредством:

a) Клеточного дыхания

b) Фотосинтез

c) Цикла трикарбоновых кислот

d) Электрохимического градиента

e) Фосфорилирования субстратов

37. Под ростом бактерий понимают:

a) Трансформацию

b) Координированное воспроизведение всех компонентов клеток

c) Увеличение числа клеток в популяции

d) Увеличение массы клеток

e) Сегрегацию дочерних цепей ДНК

38. Под термином "размножение" обозначают:

a) Трансформацию

b) Координированное воспроизведение всех компонентов клеток

c) Увеличение числа клеток в популяции

d) Увеличение массы клеток

e) Сегрегацию дочерних цепей ДНК

39. К факторам роста бактерий относят все нижеследующее, кроме:

6. 
   Аминокислот
   
7. 
   Пуриновых и пиримидиновых оснований
   
8. 
   Углеводов
   
9. 
   Витаминов
   
10. 
    Липидов
    

6. 
   Максимальная скорость размножения клетки
   
7. 
   Клетки адаптируются к питательной среде
   
8. 
   С постоянной скоростью происходит гибель клеток
   

e) Идет интенсивный рост клеток, но скорость размножения невысокая

41. Актиномицеты размножаются путем:

6. 
   Образования элементарных телец
   
7. 
   Поперечным делением
   
8. 
   Фрагментации
   
9. 
   Репродукции
   
10. 
    Образования выростов
    

a) фаза отмираниня

b) фаза сохранения анабиоза

c) стационарная фаза максимума

d) лаг-фаза (период роста и адаптации клеток)

e) лог-фаза (период интенсивного размножения клеток)

43. Штамм это:

a) культура микроба, полученная из одной клетки

b) выращенная на искусственной питательной среде популяция одного вида микробов

c) культуры одного и того же вида микробов, выделенные из разных мест, или из одного и того же источника в разное время

d) совокупность микроорганизмов, имеющих единое происхождение и генотип, сходный по своим биологическим признакам, который в стандартных условиях проявляется сходными фенотипическими признаками

44. Идентификация выделенной культуры производят с помощью определения следующих признаков:

a) морфологических

b) тинкториальных

c) культуральных

d) биохимических

e) всех упомянутых признаков

45. Рост это:

a) потомство одной клетки на плотной среде

b) синтез необходимых компонентов и увеличение размеров клетки

c) самовоспроизведение, приводящее к увеличению количества особей в популяции

d) Совокупность особей одного вида, сформировавшаяся в определенных условиях внешней среды

46. Фермент, катализирующий окислительно-восстановительные реакции микроорганизмов:

a) лигаза

b) изомераза

c) гидролаза

d) трансфераз

e) оксидоредуктаза

47 .Размножение это:

a) потомство одной клетки на плотной среде

b) синтез необходимых компонентов и увеличение размеров клетки

c) самовоспроизведение, приводящее к увеличению количества особей в популяции

d) Совокупность особей одного вида, сформировавшаяся в определенных условиях внешней среды

48. Вид это:

a) культура микроба, полученная из одной клетки

b) выращенная на искусственной питательной среде популяция одного вида микробов

c) культуры одного и того же вида микробов, выделенные из разных мест, или из одного и того же источника в разное время

d) совокупность микроорганизмов, имеющих единое происхождение и генотип, сходный по своим биологическим признакам, который в стандартных условиях проявляется сходными фенотипическими признаками

49. Установите соотвествия:

1. гиалуронидаза

2. изомераза

3. оксидаза

4. фосфотаза

5. нейраминидаза

6. коллагеназа

А) 2, 3, 5

В) 1, 5, 6

С) 1, 5

Е) 5

a) наличие внехромосомных факторов

b) способность к рекомбинации

c) ферментация углеводов

d) ферментация белков

e) ферментация жиров

51. Серовары (определение, пример):

a) микроорганизмы одного вида, различающиеся по устойчивости к антибиотикам

b) микроорганизмы одного вида, различающиеся по антигенным свойствам (Shigellaflexneri, 1,11 и др.)

c) микроорганизмы, одного вида, различающиеся по биологическим свойствам (Vibriocholerae, биовары “classic”, “eltor”.)

d) культуры одного и того же вида микробов, выделенные из разных мест, или из одного и того же источника в разное время

e) микроорганизмы одного вида, различающиеся по чувствительности к разным типам бактериофага (Staphylococcus)

a) микроорганизмы одного вида, различающиеся по устойчивости к антибиотикам

b) микроорганизмы одного вида, различающиеся по антигенным свойствам (Shigellaflexneri, 1,11 и др.)

c) микроорганизмы, одного вида, различающиеся по биологическим свойствам (Vibriocholerae, биовары “classic”, “eltor”.)

d) культуры одного и того же вида микробов, выделенные из разных мест, или из одного и того же источника в разное время

e) микроорганизмы одного вида, различающиеся по чувствительности к разным типам бактериофага (Staphylococcusaureus, фаговары 52, 12 и др.)

53. Лактоза входит, в качестве дифференцирующего субстрата, в состав сред:

a) Эндо

c) кровяной агар

d) кровяно-сахарный агар

e) сывороточный агар

a) микроорганизмы одного вида, различающиеся по устойчивости к антибиотикам

b) микроорганизмы одного вида, различающиеся по антигенным свойствам (Shigellaflexneri, 1,11 и др.)

c) микроорганизмы, одного вида, различающиеся по биологическим свойствам (Vibriocholerae, биовары “classic”, “eltor”.)

d) культуры одного и того же вида микробов, выделенные из разных мест, или из одного и того же источника в разное время

e) микроорганизмы одного вида, различающиеся по чувствительности к разным типам бактериофага (Staphylococcusaureus, фаговары 52, 12 и др.)

a) микроорганизмы одного вида, различающиеся по устойчивости к антибиотикам

b) микроорганизмы одного вида, различающиеся по антигенным свойствам (Shigellaflexneri, 1,11 и др.)

c) микроорганизмы, одного вида, различающиеся по билогическим свойствам (Vibriocholerae, биовары “classic”, “eltor”.)

d) культуры одного и того же вида микробов, выделенные из разных мест, или из одного и того же источника в разное время

e) микроорганизмы одного вида, различающиеся по чувствительности к разным типам бактериофага (Staphylococcusaureus, фаговары 52, 12 и др.)

56. Определить фермент лецитиназу можно на средe:

a) желатиновая

b) кровяной агар

c) желточно-солевой агар

d) среда Эндо

e) сывороточный агар

1. 
   Произвести посев исследуемой культуры на 20% желатин. Через сутки в столбике желатина наблюдается разжижение. Какой фермент определяется?
   
2. 
   При посеве микроба на среды Гисса через сутки термостатирования, отмечено помутнение среды, но цвет не менялся. Что можно предположить?
   
3. 
   При посеве микроба на среды Гисса изменился цвет среды в пробирках с глюкозой, лактозой, маннитом, в поплавке - газ. О чем свидетельствуют эти изменения?
   
4. 
   При посеве воздуха седиментационным методом на чашке с желточно-солевым агаром среди прочих колоний выросли золотистые, плотные, выпуклые, блестящие с радужным ободком. Что можно предполагать?
   
5. 
   При посеве культуры на "пестрый ряд", через 24 часа в пробирке с пептонной водой наблюдается помутнение среды - индикаторные бумажки - одна розовая, другая почернела. Почему?