Методическое пособие к малому практикуму по биохимии и молекулярной биологии
Работа 17. Аэробное окисление углеводов
жүктеу/скачать 1.21 Mb. Pdf көрінісі
|
| Работа 17. Аэробное окисление углеводов
Аэробный дихотомический распад углеводов является главным ис- точником энергии для клетки. При этом накапливается 38 молекул АТФ из расчета на молекулу глюкозы. В аэробных условиях пировиноградная кислота (ПВК) в результате окислительного декарбоксилирования превращается в активный ацетат, который в цикле трикарбоновых кислот (цикл Кребса) окисляется до угле- кислого газа и воды. Кислоты цикла Кребса можно обнаружить по их спо- собности к флуоресценции. 1 . Качественные реакции на ди- и трикарбоновые кислоты . Кислоты цикла Кребса можно легко обнаружить, так как они при взаимо- действии с резорцином и серной кислотой образуют флуоресцирующие со- единения. Ход исследования В первую пробирку вносят небольшое количество (на кончике скальпеля) цитрата натрия, а во вторую пробирку такое же количество ян- тарной кислоты. В обе пробирки добавляют по 10 капель воды. Затем в пробирки добавляют двойное по отношению к исходному объему количе- 45 ство концентрированной серной кислоты, резорцина (на кончике скальпе- ля) и пробирки нагревают при слабом кипении в течение 3 мин, держа их у края пламени. Затем пробирки охлаждают, в каждую добавляют 1–2 мл во- ды (наслаивая) и наблюдают флуоресценцию. 2 .Обнар ужени е ян тарной и ли монной кисло т в дро жжах . Ход исследования Небольшое количество дрожжей (~0,5 г) растирают в ступке с оки- сью алюминия. Затем добавляют 5 мл 20 % ТХУ и перемешивают в тече- ние 5 мин. Экстракт, содержащий кислоты цитратного цикла, фильтруют и используют в ходе дальнейшей работы. К 1 мл фильтрата добавляют 2 мл концентрированной серной кислоты, немного резорцина, затем поступают так же, как и в предыдущем опыте. Сопоставьте полученные результаты. Сделайте соответствующие вы- воды. Напишите уравнения реакций. жүктеу/скачать 1.21 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|