Определение количественного содержания флавоноидов в надземной части шлемника байкальского
жүктеу/скачать 50.75 Kb.
|
Результаты и их обсуждениеСравнение спектров поглощения извлечений из морфологических групп надземной части S. baicalensis по- казало, что спектр поглощения спиртового извлечения содержит два экстремума – 285 и 335 нм и является ад- дитивным в большей степени из спектров поглощения извлечений из стеблей и листьев и в меньшей – из цвет- ков (рис. 1). Спектры поглощения извлечений из корней отличны от таковых органов надземной части. При сравнении вида спектра поглощения спиртового извлечения из надземной части S. baicalensis с по- лосами 15 индивидуальных соединений, выделенных из данного сырья, установлено, что максимум в облас- ти 285 нм обусловлен присутствием скутелляреина, скутеллярина, дигидроскутеллярина и дигидроизоску- теллярина. Широкая полоса поглощения около 335 нм вызвана присутствием скутелляреина, скутеллярина, изоскутеллярина, апигенин-7-глюкуронида (табл. 2). По данным Т.П. Поповой с соавторами [1], доминирующими соединениями надземной части S. baicalensis являются скутеллярин и дигидроскутеллярин. Присутствие скутеллярина в исследуемом сырье нами было доказано после его препаративного выделения и идентификации. Спектр поглощения скутелля- рина совпадает с таковым спиртового извлечения из сырья, поэтому он был выбран нами в качестве стан- дартного вещества для определения содержания соединений, обладающих максимумом поглощения в об- ласти 278–288 нм, который соответствует 6-оксифлавонам и флаванонам. Для расчета использовали величи- ну удельного коэффициента погашения скутеллярина, равного 400 [1]. Таблица 2. Максимумы спектров поглощения спиртового извлечения надземной части S. baicalensis и индивидуальных соединений (по данным [3])
Следует отметить, что при анализе данного вида сырья с использованием только прямого варианта спек- трофотометрии при длине волны 285 нм остаются неучтенными производные апигенина и лютеолина, так как в их спектрах поглощения полоса II сдвинута в более коротковолновую область. Для устранения этого недостатка нами рассмотрена возможность применения дифференциального варианта анализа. Максимум дифференциального спектра поглощения спиртового извлечения S. baicalensis наблюдается при 405 нм и может быть использован для анализа данной группы соединений, в роли внешнего стандарта выступает лю- теолин-7-гликозид (цинарозид) (рис. 2). При дифференциальном варианте спектрофотометрического анализа предполагается применение алю- миния хлорида в качестве комплексообразователя; установлено, что система флавоноиды – AlCl3 достигает равновесия через 40 мин. В экспериментах по определению оптимальных параметров процесса экстракции флавоноидов, обеспе- чивающих их максимальное извлечение, исследовалось влияние следующих факторов: тип экстрагента (табл. 3), температура экстракции, степень измельчения сырья, соотношение сырье : экстрагент (табл. 4), кратность и время экстракции (табл. 5). Эффективность экстракции оценивалась по содержанию в извлече- ниях флавоноидов и экстрактивных веществ. Экстрагентом, обеспечивающим наиболее полное извлечение флавоноидов, для надземной части S. baicalensis является 70%-ный этиловый спирт, повышение концентрации экстрагента до 95% приводит к снижению выхода флавоноидов до 7,71%. Спектральный анализ извлечений, полученных с применением разных экстрагентов, подтверждает выбор 70%-ного этилового спирта; более высокие концентрации экстра- гента приводят к преимущественной экстракции липидов и фотосинтетических пигментов, ухудшающих аналитические характеристики извлечения. Рис. 1. Спектры поглощения спиртовых извлечений морфологических групп S. baicalensis (1 – надземная часть, 2 – листья, 3 – стебли, 4 – цветки, 5 – корни) и скутеллярина (6). Рис. 2. Дифференциальные спектры поглощения спиртовых извлечений надземной части жүктеу/скачать 50.75 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|