Статья Рекомендации по исследованиям рецептора эпидермального фактора роста человека второго типа (her2) при раке молочной железы

жүктеу/скачать 480 Kb.

бет	3/6
Дата	18.06.2016
өлшемі	480 Kb.
	#145825

1 2 3 4 5 6

Таблица 1 (продолжение)
Тема	Рекомендация 2007 г.	Рекомендация 2013 г.
Интерпретация результатов ISH	Интерпретация выполняется при подсчете как минимум 20 клеток; патолог должен подтвердить, что подсчет проводится в инвазивном компоненте.	Патолог должен полностью изучить предметное стекло ISH перед подсчетом как минимум 20 клеток или использовать ИГХ для определения областей потенциальной амплификации гена HER2. При наличии второй популяции клеток с повышенным количеством сигналов HER2 на клетку, и если эта популяция больше чем на 10% состоит из опухолевых клеток на предметном стекле (определяется путем анализа изображения или визуальной оценки предметного стекла ISH или ИГХ), необходимо выполнить отдельный подсчет как минимум 20 неперекрывающихся клеток в данной популяции и представить его результаты. Для ISH в светлом поле при подсчете требуется сравнение структур нормальных и опухолевых клеток молочной железы, так как могут наблюдаться артефакты, которые затрудняют интерпретацию. Если структура клеток опухоли не является нормальной, но без четкой амплификации, тест следует направить на экспертизу.
Приемлемые тесты (ИГХ и ISH)⁸Требования к оптимальному тестированию методом ИГХ		По возможности следует использовать методы ИГХ, ISH или FISH, одобренные FDA.^g^,^h
	Тест отклоняется и выполняется повторно, либо проводится тест методом FISH в следующих случаях: • Контроли не соответствуют плановым значениям • Артефакты охватывают большую часть образца • Образец имеет сильную окраску мембраны в нормальных протоках молочной железы (внутренние контроли)
Критерии интерпретации результатов ИГХ	При HER2-положительном результате структура должна быть однородной, темной кольцеобразной (мелкоячеистая проволочная сетка) более 30% инвазивной опухоли. Интерпретацию должны выполнять компетентные специалисты с помощью метода, обеспечивающего соответствие результатов.	Интерпретировать ИГХ-тест с помощью порогового значения, согласно которому более 10% опухолевых клеток должны иметь однородную, темную кольцеобразную (мелкоячеистая проволочная сетка) структуру, чтобы результат можно было определить как 3+ HER2-положительный.
Требования к отчетности по всем типам анализа	Отчет должен содержать элементы, указанные в рекомендации.	То же, за исключением изменения требований к отчетности и алгоритмов, определенных в данной таблице (информационные приложения 9 и 10).
Требования к оптимальной работе с тканями	Период от получения ткани до фиксации должен быть как можно короче; образцы для HER2-тестирования фиксируются в 10% NBF на протяжении 6-48 часов; цитологический материал должны фиксироваться в формалине. После надлежащей общей проверки образцов и определения краев необходимо изготовить срезы с интервалами от 5 до 10 мм и поместить их в достаточный объем NBF.	Продолжительность фиксации изменена с 6-48 часов до 6-72 часов. Любые исключения из этого процесса должны быть указаны в отчете.
Требования к оптимальному изготовлению срезов тканей	По возможности для HER2-тестирования следует использовать срезы, изготовленные не раньше, чем за 6 недель до проведения теста; данный период может изменяться в зависимости от условий первичной фиксации или хранения.	То же.
Оптимальная процедура внутренней валидации	Валидация теста должна быть выполнена перед тем, как тест предлагается для применения.	То же (в информационном приложении 12 перечислены примеры различных схем внешнего обеспечения качества).
Оптимальная первоначальная валидация теста	Для первоначальной валидации теста требуется проведение исследования 25-100 образцов альтернативным валидированным методом в этой же лаборатории или валидированным методом в другой лаборатории.	Лаборатории, выполняющие данные тесты, должны соблюдать все требования к аккредитации, одним из которых является первоначальная валидация теста. Лаборатория должна обеспечить соответствие первоначальной валидации требованиям к валидации, предусмотренным в рекомендациях ASCO/CAP 2010 г. по определению ER и PgR методом ИГХ с использованием 20 отрицательных и 20 положительных образцов для тестов, одобренных FDA, и 40 отрицательных и 40 положительных образцов для тестов, разработанных в лаборатории. Данное требование не применяется к тестам, которые ранее валидированы в соответствии с рекомендациями ASCO/CAP по HER2-тестированию, и к тем, которые в установленном порядке используются в проверке квалификации по проведению HER2-тестов, например, по программе, предложенной CAP (информационное приложение 12).
	Подтверждение первоначальной валидации теста, в ходе которой HER2-положительные и отрицательные категории на 90% соответствуют альтернативному валидированному методу или этому же валидированному методу определения HER2-статуса.	Лаборатории несут ответственность за обеспечение достоверности и точности результатов тестирования при выполнении требований к аккредитации и проверке квалификации для выполнения HER2-тестов. Специальные требования к согласованности не предусмотрены (информационное приложение 11).

Таблица 1 (продолжение)
Тема	Рекомендация 2007 г.	Рекомендация 2013 г.
Оптимальный мониторинг согласованности между методами	Проверка согласованности должна быть выполнена до начала тестирования, по возможности в форме валидации теста. Если согласованность ниже 95% в любой категории тестирования, в этой категории результатов теста FISH или метод ИГХ автоматически изменяется на альтернативный перед окончательной интерпретацией.	См. пункт «Оптимальная аккредитация лаборатории».
Оптимальные процедуры внутреннего обеспечения качества		Проверять и документировать проведение внешних и внутренних контролей с каждым тестом и каждой партией тестов.
	Текущий контроль качества и техническое обслуживание оборудования.	То же.
	Первоначальное и текущее обучение лабораторного персонала и оценка компетенций.	То же.
	Использование стандартизованных операционных процедур, включая рутинное применение контрольных материалов.	То же.
	Повторная валидация процедуры в случае ее изменения.	То же.
	Текущая оценка компетенций и образование патологов.	Выполнять текущую оценку компетенций и документировать предпринятые действия в лабораторном журнале.
Оптимальная внешняя оценка квалификации	Участие и успешное завершение программы внешней проверки квалификации не реже чем два раза в год (по почте).	То же.
	Для удовлетворительного выполнения требуется как минимум 90% правильных ответов на вопросы по любому тесту. При неудовлетворительном выполнении лаборатория должна будет заполнить форму ответа в соответствии с требованиями программы органа по аккредитации.	То же.
Оптимальная аккредитация лаборатории	Выездная проверка один раз в два года и внутренняя проверка ежегодно. • Проверка валидации, процедур, результатов и процессов обеспечения качества, результатов и отчетов. • Неудовлетворительное выполнение приводит к прекращению лабораторией HER2-тестирования с использованием данного метода.	То же (информационное приложение 11).

ПРИМЕЧАНИЕ: Если не указано иное, качество данных и эффективность рекомендаций являются высокими. Жирным шрифтом выделены изменения в обновленной версии.

Сокращения: ASCO – Американское общество клинической онкологии; CAP – Колледж американских патологов; ER – рецептор эстрогена; FDA – Управление по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных средств; FISH – флуоресцентная in situ-гибридизация; HER2 – рецептор эпидермального фактора роста человека 2-го типа; ИГХ – иммуногистохимия; ISH - in situ-гибридизация; LDT – тест, разработанный лабораторией; PgR – рецептор прогестерона; ОК – обеспечение качества.

^aЕсли рефлекс-тест (тот же образец/та же ткань), проведенный после получения сомнительного результата первоначального HER2-теста, не дает положительный или отрицательный результат, патолог должен проверить морфологические характеристики, по возможности согласовать с онкологом проведение дополнительного HER2-тестирования и задокументировать результаты в гистопатологическом заключении. Патолог может провести дополнительное HER2-тестирование без согласования с онкологом. Такое исследование выполняется с помощью: (1) альтернативного теста (ИГХ или ISH) на этом же образце, (2) любого теста на другом участке (этого же образца) либо (3) любого теста на другом образце (например, толстоигольная биопсия, хирургическая резекция, лимфоузел и/или метастатический участок). Поскольку для принятия решения о проведении HER2-таргетной терапии требуется HER2-положительный результат теста, должно быть предпринято дополнительное HER2-тестирование сомнительных образцов с целью получения HER2-положительного или отрицательного теста и более точного определения HER2-статуса образца опухоли.

^bДополнительную информацию о редких сценариях см. в информационном приложении 2E.

^cНаблюдается в однородной и смежной популяции и в более чем 10% клеток инвазивной опухоли.

^d Оценивается с помощью объектива с малым увеличением.

^eПо подсчету как минимум 20 клеток в пределах области.

^f Наблюдается в однородной и смежной популяции.

⁸ В качестве альтернативы лаборатория, аккредитованная CAP или другой организацией по аккредитации, может использовать тест, разработанный в лаборатории. В этом случае его аналитические характеристики должны быть задокументированы в той же клинической лаборатории, которая будет использовать тест, и должна быть предоставлена документация по аналитической действительности теста.

^hСписок HER2-тестов, одобренных FDA в качестве сопутствующих средств диагностики in vitro для применения в оценке пациентов, для которых предусматривается лечение трастузумабом, можно найти в разделе “Medical Devices” на сайте FDA США (http://www.accessdata.fda.gov/scripts/cdrh/devicesatfda/index.cfm?start_searc=I&search_term=HER2&approval_date_from=&approval_date_ to=07/14/2013&sort=approvaldatedesc&pagenum=10; последняя проверка 14 июля 2013 г.). В инструкциях, вложенных в упаковку препаратов трастузумаб и пертузумаб, подготовленных FDA, указано, что «HER2-тестирование должно выполняться с помощью тестов, одобренных FDA, лабораториями, имеющими подтвержденную квалификацию».^{77, 78}

Таблица 2. Морфологические характеристики, указывающие на возможную несогласованность результатов HER2-теста

Критерии*

Новый HER2-тест не следует проводить в случае наличия следующих морфологических данных при отрицательном результате первоначального HER2-теста:

Карцинома 1-й гистологической степени (grade 1) следующих типов:

Инфильтративно-протоковая или дольковая карцинома, ER- и PgR-положительная

Тубулярная («чистая» как минимум на 90%)

Муцинозная («чистая» как минимум на 90%)

Решетчатая («чистая» как минимум на 90%)

Аденокистозная карцинома («чистая» на 90%) и часто тройная негативная

Новый HER2-тест проводится в случае получения следующих морфологических данных при положительном результате первоначального HER2-теста:

Карцинома 1-й гистологической степени (grade 1) следующих типов:

Инфильтративно-протоковая или дольковая карцинома, ER- и PgR-положительная

Тубулярная («чистая» как минимум на 90%)

Муцинозная («чистая» как минимум на 90%)

Крибриформная («чистая» как минимум на 90%)

Аденокистозная карцинома («чистая» на 90%) и часто тройная негативная

При отрицательном результате первоначального HER2-теста на образце толстоигольной биопсии первичного рака молочной железы новый HER2-тест должен быть проведен на образце толстоигольной биопсии, если наблюдается один из следующих критериев:

Опухоль 3-й гистологической степени (grade 3)

Небольшое количество инвазивной опухоли при толстоигольной биопсии

Образец резекции содержит карциному высокой степени, которая морфологически отличается от наблюдаемой в биоптате

Результат толстоигольной биопсии сомнительный по HER2 после тестирования методами ISH и ИГХ

Сомнения относительно обработки образца толстоигольной биопсии (длительное время, прошедшее от забора ткани до фиксации, недостаточное время фиксации, другой фиксатор) или потенциально отрицательный тест из-за ошибки тестирования, по мнению патолога

Сокращения: ER – рецептор эстрогена; HER2 – рецептор эпидермального фактора роста человека 2-го типа; ИГХ – иммуногистохимия; ISH - in situ-гибридизация; PgR – рецептор прогестерона.

* Критерии, которые необходимо учитывать в случае несогласованности с очевидными гистопатологическими данными и потенциально ложноотрицательным или ложноположительным результатом HER2-теста.

В настоящее время FDA по собственному усмотрению принимает решение о наблюдении за тестами, разработанными в лабораториях, которые производятся и выполняются в рамках отдельной лаборатории в соответствии с требованиями CLIA 88. Поправки CLIA 88 предусматривают строгие стандарты качества для сверхсложных тестов, которые включают все исследования прогностических факторов рака. Данный нормативный акт также требует проведения проверок в лабораториях, которые выполняют сверхсложные тесты, два раза в год с установленными критериями и необходимыми действиями в случае недостатков в работе. Тем не менее, сертификация CLIA не требует, чтобы выполняемые тесты демонстрировали высокий уровень доказательства их клинической применимости. Кроме того, одобрение медицинских изделий FDA, в том числе тестов для диагностики in vitro, подобных тем, которые рассматриваются в настоящих рекомендациях, не обязательно требует демонстрации того, что использование результатов теста приводит к улучшению клинических исходов в сравнении с теми, которые наблюдаются без применения теста. Редакционный комитет отмечает необходимость внесения большей ясности в законодательную базу в отношении сопутствующих диагностических тестов и тестов, разработанных лабораториями, для определения опухолевых биомаркеров высокого риска, таких как HER2. Некоторые из них рассматриваются в рамках Инициативы Evaluation of Genomic Applications in Practice and Prevention (EGAPP) и утверждены Комитетом Института медицины в отношении тестов на основе омик, а также другими организациями.¹³⁹ Редакционный комитет учитывает, что FDA осуществляет разработку нормативной базы на основе рисков с целью разрешения вопросов, касающихся точности тестов и их клинической применимости.

Рис. 1. Алгоритм оценки экспрессии белка рецептора эпидермального фактора роста человека 2-го типа (HER2) методом иммуногистохимического (ИГХ) анализа инвазивного компонента в образце рака молочной железы. Несмотря на возможность создания категорий оценки HER2-статуса методом ИГХ, не охватываемых данными определениями, на практике они встречаются редко, и в этом случае их следует рассматривать как ИГХ 2+ сомнительные. ISH - in situ гибридизация. ПРИМЕЧАНИЕ: Окончательные представленные результаты предполагают отсутствие явной несогласованности морфологических данных, наблюдаемое патологом. (*) Оценивается с помощью объектива с малым увеличением и наблюдается в однородной и смежной популяции инвазивных клеток.

Рис. 2. Алгоритм оценки амплификации гена рецептора эпидермального фактора роста человека 2-го типа (HER2) методом in situ-гибридизации инвазивного компонента в образце рака молочной железы с использованием анализа с одним сигналом (ген HER2) (ISH с одним зондом). Амплификация в тесте ISH определяется путем подсчета среднего количества копий HER2. При наличии второй смежной популяции клеток с увеличенным количеством сигналов HER2 на клетку, и если эта популяция больше чем на 10% состоит из опухолевых клеток на предметном стекле (определяется путем анализа изображения или визуальной оценки предметного стекла ISH или ИГХ), необходимо выполнить отдельный подсчет как минимум 20 неперекрывающихся клеток в данной популяции и представить его результаты. Несмотря на возможность создания категорий оценки HER2-статуса методом ISH, не охватываемых данными определениями, на практике они встречаются редко, и в этом случае их следует рассматривать как ISH сомнительные (см. информационное приложение 2E). ПРИМЕЧАНИЕ: Окончательные представленные результаты предполагают отсутствие явной несогласованности морфологических данных, наблюдаемое патологом. (*) Наблюдается в однородной и смежной популяции.
Оптимальные методы внешнего обеспечения качества для гарантии точности HER2-тестирования и аккредитации лабораторий — С момента вступления в силу рекомендаций 2007 г. внешняя проверка квалификации является обязательным требованием для CAP-аккредитованных лабораторий. Невыполнение задачи в рамках внешней проверки квалификации требует расследования и проведения корректирующих мероприятий перед тем, как лаборатория сможет продолжать проведение HER2-тестирования.

CAP изменил программу аккредитации лабораторий, включив в нее более тщательную проверку HER2-тестирования, таким образом, создав программу обязательной и расширенной проверки квалификации с целью оценки работы лаборатории. В ходе систематического обзора обнаружено множество новых работ по обеспечению качества, его улучшению, проверке квалификации и установлению согласованности между местными и центральными лабораториями, как в США, так и в других странах.^{40, 51, 136,} ^140-146 Пересмотренная таблица по проверке квалификации с описанием статистических требований при проведении проверки представлена в информационном приложении 11. Примеры международных схем внешнего обеспечения качества включены в информационное приложение 12.

Количество лабораторий, участвующих в проверке квалификации по применению прогностических маркеров в исследованиях HER2 и ER в рамках программы улучшения результатов лабораторий CAP с 2004 г., показано на рис. 4. Программа описана на сайте http://www.cap.org/apps/cap.portal?_nfpb=true&_pageLabel=accreditation (последняя проверка 14 июля 2013 г.).

Рис. 3. Алгоритм оценки амплификации гена рецептора эпидермального фактора роста человека 2-го типа (HER2) методом in situ-гибридизации инвазивного компонента в образце рака молочной железы при использовании анализа с двумя сигналами (ген HER2) (ISH с двумя зондами). Амплификация в тесте ISH с двумя зондами определяется путем оценки соотношения HER2/CEP17 с последующим подсчетом среднего количества копий HER2 (дополнительную информацию см. в приложении 2E). При наличии второй смежной популяции клеток с увеличенным количеством сигналов HER2 на клетку, и если эта популяция больше чем на 10% состоит из опухолевых клеток на предметном стекле (определяется путем анализа изображения или визуальной оценки предметного стекла ISH или ИГХ), необходимо выполнить отдельный подсчет как минимум 20 неперекрывающихся клеток в данной популяции и представить его результаты. Несмотря на возможность создания категорий оценки HER2-статуса методом ISH, не охватываемых данными определениями, на практике они встречаются редко, и в этом случае их следует рассматривать как ISH сомнительные (см. информационное приложение 2E). ПРИМЕЧАНИЕ: Окончательные представленные результаты предполагают отсутствие явной несогласованности гистопатологических данных, наблюдаемое патологом. (*) Наблюдается в однородной и смежной популяции. (+) Дополнительную информацию об этих редких сценариях см. в приложении 2E.

жүктеу/скачать 480 Kb.

Достарыңызбен бөлісу:

1 2 3 4 5 6