Исследование противоаллергической активности глутоксима
жүктеу/скачать 59.53 Kb.
|
| ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОТИВОАЛЛЕРГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ГЛУТОКСИМА
Гладкова Н.Н., Демидова М.А. Верхневолжский медицинский журнал, 2004,-Т.2, вып. 5-6, с. 42-43 Тверская медицинская академия Введение
Оригинальный отечественный препарат глутоксим является первым и пока единственным представителем новой группы лекарственных средств - тиопоэтинов. По классификации иммуномодуляторов, предложенной P.M. Хаитовым и соавт., глутоксим относится к группе синтетических низкомолекулярных иммуномодуляторов [3]. Глутоксим представляет собой гексапептид (бис - (гамма-L- глутамил)-L-цистеинил-бис-глицин-динатриевая соль), являющийся структурным аналогом естественного метаболита - окисленного глутатиона. Искусственная стабилизация дисульфидной связи окисленного глутатиона позволяет многократно усилить физиологические эффекты, присущие естественному немодифицированному окисленному глутатиону. Препарат оказывает активирующее влияние на антиперекисные ферменты: глутатионредуктазу, глутатионтрансферазу и глутатионпероксидазу, которые в свою очередь активируют внутриклеточные реакции тиолового обмена, а также процессы синтеза серо- и фос-форосодержащих макроергических соединений, необходимых для нормального функцио-нирования внутриклеточных регуляторных систем. Работа клетки в новом окислительно-восстановительном режиме и изменение динамики фосфорилирования ключевых белков сигнал-передающих систем и транскриптационных факторов, в первую очередь иммунокомпетентных клеток, определяют иммуномодулирующий и системный цитопротекторный эффекты препарата [2]. Среди иммунофизиологических эффектов препарата можно выделить: высокую тропность препарата к клеткам центральных органов иммунитета и системы лимфоидной ткани; усиление костно-мозгового кроветворения: процессов эритропоэза, лимфопоэза и гранулоцитопоэза; активацию системы фагоцитоза, в том числе в условиях иммунодефицитных состояний, восстановление в периферической крови уровня нейтрофилов, моноцитов, лимфоцитов и функциональной активности тканевых макрофагов. Кроме того, препарат обладает стимулирующим действием на каскадные механизмы фосфатной модификации основных сигнал-передающих систем; индикацию системы цитокинов, в том числе эндогенной продукции ИЛ-1, ИЛ-6, интерферона, эритропоэтина. Особым свойством глутоксима является его способность оказывать дифференцированное воздействие на нормальные (стимуляция пролиферации и дифференцировки) и трансформированные (индукция апоптоза.- генетически программированной гибели) клетки. Известным является тот факт, что препараты, содержащие в своей структуре серу, оказывают влияние на течение аллергического процесса [4]. Так, противоаллергическая активность обнаружена у донаторов серы (тиосульфата натрия) и тиоловых групп (унитиола). Например, унитиол используют при таких заболеваниях, имеющих аллергический компонент, как хронический риносинусит, экзема и нейродермит. Существуют сведения, что при сенсибилизации и анафилаксии отмечается понижение уровня сульфгидрильных групп в крови, Связанное со снижением содержания глутатиона - основного источника сульфгидрильных групп в крови [4]. Вместе с тем при различных аллергических процес-сах, в том числе анафилактическом шоке, аллергии замедленного типа, происходит глубокое нарушение биосинтеза всех форм глутатиона в печени, В связи с этим целью настоящего исследования явилось изучение влияния глутоксима, являющегося аналогом глутатиона, на течение экспериментальных аллергических процессов. Методы исследования Исследование противоаллергической активности глутоксима проводили на модели активной кожной анафилаксии у мышей и реакции дегрануляции базофилов крови кроликов in vitro. При постановке экспериментов в качестве препаратов сравнения использовали: донатор сульфгидрильных групп унитиол; стабилизатор мембран тучных клеток и базофилов - кромолин-натрий; один из наиболее эффективных препаратов для лечения анафилаксии - гидрокортизон. Постановку реакции активной кожной анафилаксии проводили в экспериментах на белых беспородных мышах (n = 21) обоего пола массой 24,5 ± 3,6 г. Сенсибилизацию подопытных животных проводили трехкратным ежедневным подкожным введением 0,4 мл овальбумина, разведенного (в соотношении 1:5) изотоническим раствором натрия хлорида с равным количеством вазелинового масла. Анафилактический отек кожи воспроизводили на 21-е сутки латентного периода сенсибилизации. С этой целью подопытным животным внутрибрюшинно вводили синий Эванса (0,25 мл 1,6% раствора на 100 г веса), после чего внутрикожно - 0,05 мл овальбумина, что приводило к развитию местной аллергической реакции. Через 20 минут подопытным животным внутрибрюшинно вводили исследуемые препараты. После достижения эффекта препаратов повторно внутрикожно вводили антиген с другой стороны живота. Через 20 минут животных (под эфирным наркозом) забивали и оценивали результаты реакции. Визуально анафилактический отек проявлялся окрашиванием участка кожи в синий цвет, что было связано с выходом красителя из кровеносного русла в очаг аллергического поражения. Выраженность реакции активной кожной анафилаксии оценивали по площади опытных и контрольных пятен. Все животные были разделены на 3 подгруппы. Мышам первой подгруппы (n = 7) внутрибрюшинно вводили глутоксим в дозе 20 мг/кг (1/20 LD50), второй подгруппы (n = 7) - унитиол в дозе 10 мг/кг, третьей подгруппы - гидрокортизон в дозе 2 мг/кг. Реакцию дегрануляции базофилов проводили по Shelly в модификации (Т.И. Серова, 1986). Исследования были проведены на 15 кроликах породы шиншилла обоего пола массой 4,2 ± 0,2 кг, сенсибилизированных трехкратным еженедельным подкожным введением свиной сыворотки в дозе 1 мл/кг массы тела. Постановку реакции дегрануляции базофилов проводили на 21-й день сенсибилизации. С этой целью лейкоцитарную взвесь крови сенсибилизированного кролика окрашивали на предметном стекле нейтральным красным. При этом базофилы крови окрашивались в буровато-красновато-коричневый цвет, что позволяло легко отдифференцировать их от других клеток. Дегранулированные базофилы отличались от неповрежденных клеток измененной формой, нарушенным контуром, наличием псевдоподий и гранулокинезом. Оценивали влияние препаратов на выраженность спонтанной и антигениндуцированной дегрануляции базофилов. Результаты и их обсуждение Результаты экспериментального исследования показали, что глутоксим обладает способностью уменьшать выраженность реакции активной кожной анафилаксии у мышей. Так, у подопытных животных, получавших глутоксим, площадь анафилактического отека кожи (52,4 ±17,1 мм2) была в среднем в 1,5 раза (р < 0,001) меньше, чем в контроле (соответственно 81,1 ± 13,2 мм2). Следует отметить, что другой серосодержащий препарат-донатор сульфгидрильных групп унитиол - также угнетал активную кожную анафилаксию у мышей. В серии опытов с введением унитиола площадь аллергического отека кожи составила 39,6 ± 18,5 мм2, что в среднем в 2,3 раза меньше (р < 0,05), чем в контроле (94,2 ± 43,7 мм2). Достоверных различий в способности глутоксима и унитиола подавлять анафилак-тический отек кожи выявлено не было, при этом эффекты серосодержащих препаратов были выражены слабее (р < 0,05), чем у препарата сравнения - гидрокортизона. Особый интерес представляло изучение влияния глутоксима на уровень антиген-индуцированной дегрануляции базофилов в связи с тем, что базофильные лейкоциты крови являются клетками-мишенями аллергического процесса I порядка, так как несут на своей поверхности высокоаффинные Fc-рецепторы для IgE. Их активация реакцией аллергенантитело приводит к высвобождению различных биологически активных веществ, которые изменяют функцию других клеток (клетокмишеней аллергии II порядка). От функциональных взаимоотношений, складывающихся между клетками эффекторного звена аллергического ответа, зависит исход аллергического процесса. Обнаружено, что у сенсибилизированных кроликов уровень спонтанной дегрануляции базофильных лейкоцитов составил 29,6 ± 8,5%, что достоверно (р > 0,05) не отличалось от значения этого показателя у интактных животных (20,7 ± 1,4%). После инкубации базофилов крови сенсибилизированных кроликов с антигеном (10 -3) число дегранулированных клеток увеличилось в среднем в 2,2 раза (р < 0,001) и составило 65,0 ± 14,0%. Серосодержащие препараты глутоксим и унитиол уменьшали выраженность антиген-индуцированной дегрануляции базофилов крови кроликов и не влияли на уровень спонтанной дегрануляции клеток. Так, при инкубации базофилов крови с глутоксимом (10-4 М) уровень спонтанной дегрануляции составил 31,0 ± 2,2%, а с унитиолом (10-4 М) - 35,0 ± 3,5%. Выраженность антиген-индуцированной дегрануляции базофильных лейкоцитов под влиянием глутоксима уменьшилась в среднем в 1,3 раза (р < 0,05), унитиола - в 1,4 раза (р < 0,05) и составила соответственно 48,4 ± 4,7% и 47,5 ± 6,2%. Достоверных различий между действием глутоксима и унитиола не наблюдалось. Вместе с тем было отмечено, что по своей способности уменьшать выраженность антиген-индуцированной дегрануляции базофилов серосодержащие препараты были в среднем в 1,5 раза (р < 0,05) слабее, чем препарат сравнения кромолин-натрий. Таким образом, было показано, что глутоксим обладает наряду с иммуномодулирующей умеренной противоаллергической активностью. Вероятно, этот эффект может быть полезным в лечении больных с аллергическими заболеваниями, осложненными проявлениями вторичного иммунодефицита (например, атопического дерматита с пиодермией, бронхи-альной астмы с явлениями хронического гнойно-обструктивного бронхита и др.), т. е. тех патологий, при которых в первую очередь нарушается рецепция регуляторных эффектов цитокинов. Литература 1. Гущин И. С. О физиологическом смысле аллергической реакции // Иммунология. - 2001. - № 3. - С. 16-18 2. Новая идеология сопровождения антибактериальной, противовирусной и противоопу-холевой терапии : Сборник научных работ. - Москва, 2003. - 130 с. 3. Хаитов P.M., Пинвгин Б.В., Иммуномодуляторы: механизм действия и клиническое применение // Иммунология. - 2003. - № 4. - С. 196-203 4. Четвериков Г.Н. Фундаментальная фармакотерапия и фармакологический анализ аллергических реакций. - Тверь, 1998. - 159 с. жүктеу/скачать 59.53 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|