Тема: Хромосомные болезни человека, методы их диагностики

1. 
   Хромосомные болезни, их этиология, патогенез, классификация.
   
2. 
   Клинические проявления (фенотипическая характеристика) синдромов, связанных:
   

б) со структурными перестройками хромосом (синдром «крика кошки», Вольфа-Хиршхорна); в т.ч. микроаномалиями хромосом (Прадера-Вилли, Ангельмана, Лангера-Гидеона, Блума, Мартина-Белла).

3. 
   Цитогенетические исследования при диагностике хромосомных болезней.
   

1. 
   Общую характеристику хромосомной патологии, показания для применения цитогенетического исследования и необходимости дополнительных специальных методов обследования больного.
   
2. 
   Область применения цитогенетических методов, сущность, виды, возможности цитогенетического метода в диагностике наследственных болезней.
   
3. 
   Общие проблемы лечения, социальной адаптации и реабилитации больных с хромосомной патологией; проблемы профилактики хромосомных болезней.
   

При подготовке к занятию изучить клиническую и цитогенетическую характеристику наиболее распространённых хромосомных синдромов, в том числе обусловленных, микроделециями аутосом (микроцитогенетические синдромы). Заполнить таблицу.

По фотографиям и кариограммам разобрать опорные диагностические признаки хромосомных болезней; поставить диагноз.

1. 
   Исследование полового хроматина.
   

1.2. Оценка результатов исследования полового хроматина:

У здоровых женщин – от 15-18% и более Х-хроматин положительных клеток; 0% Y-положительных клеток.

У здоровых мужчин – 0% Х-хроматин положительных клеток (допускается до 2-3%); Y-положительных клеток до 100%.

1.3. Заполнить таблицу, отражающую количество X- и Y-хроматина в ядрах буккального эпителия (по Сандерсон и Касперсон) у больных с различными синдромами, связанными с изменением количества половых хромосом.

Кариотип	Х-хроматин	Y-хроматин	Диагноз
45,Х
45,Х/46,ХХ
47,ХХХ
47,ХХY
46,ХY/47,ХХY
47,XYY
45,Х/46,ХY

2. Дифференциальная окраска хромосом при цитогенетическом исследовании.

По рисункам разобрать современные методики исследования кариотипа (стандартное окрашивание, схематическое изображение рисунка сегментации хромосом при G, R, C-окраске).

1 2 3 4 5

-------------------------А---------------------------- -----------------------В----------------------

6 7 8 9 10 11 12

----------------------------------------------------------С--------------------------------------------------------

13 14 15 16 17 18

--------------------------D----------------------- ----------------------E-----------------------------

19 20 21 22 X Y

---------------F--------------- ---------------G-------------

Сравнение G- и R- сегментации

3. Молекулярно-цитогенетическая диагностика.

3.1. Разобрать показания к применению и современные представления о молекулярно-цитогенетической диагностике с использованием FISH-метода.
Показания к молекулярно-цитогенетической диагностике:

1. 
   Анализ случаев сложного хромосомного мозаицизма с небольшим клоном аномальных клеток;
   
2. 
   Определение происхождения и генетического состава дополнительных маркерных хромосом;
   
3. 
   Идентификация хромосом, вовлечённых в сложные перестройки при участии 3-х хромосом и более;
   
4. 
   Уточнение точек разрыва на хромосомах и потерь генетического материала на хромосомном и субхромосомном уровнях в случае сложных хромосомных аномалий (сбалансированные и несбалансированные транслокации, особенно семейные случаи) или теломерных (субтеломерных) хромосомных делеций;
   
5. 
   Идентификация ломкой хромосомы Х при синдроме умственной отсталости, сцепленной с ломкой хромосомой Х;
   
6. 
   Анализ хромосомных аномалий в опухолях.
   
7. 
   Изучение и выявление вариантов хромосомных аберраций.
   

3.2. Рассмотреть этапы идентификации дополнительных маркерных хромосом.

маркерной хромосомы: - ДНК зонд на группу хромосом 1, 3, 5, 6, 7, 10, 12, 16, 19;

- ДНК зонд на группу хромосом 2, 4, 8, 9, 18, 20;

- ДНК зонд на группу хромосом 1, 11, 17, Х;

- ДНК зонд на группу хромосом 13, 14, 15, 21, 22, Y.

III этап - «Направленная» гибридизация в «жёстких» условиях со специфичными ДНК-зондами определённой группы хромосом для точной идентификации дополнительной маркерной хромосомы.

IV этап - (дополнительный). Гибридизация с «уникальными» или сайт специфичными ДНК-зондами, картированными в определённом районе хромосом, для окончательного уточнения генетического состава маркерной хромосомы.
4. Рассмотреть таблицу и проанализировать факторы, определяющие эмпирический риск наследования хромосомной патологии.

ЭМПИРИЧЕСКИЙ РИСК ПРИ ХРОМОСОМНЫХ БОЛЕЗНЯХ

Трисомии 13, 18, 21

Суммарный популяционный риск в зависимости от возраста матери	Возраст матери, годы	Риск, %
	< 19	0,08
	20-24	0,06
	25-29	0,1
	30-34	0,2
	35-39	0,54
	40-44	1,6
	> 45	4,2

Трисомия 21 (синдром Дауна)

Простая трисомная форма	Повторный риск синдрома Дауна для сибсов пробанда в зависимости от возраста матери
	Возраст матери		Риск
	До 35 лет		1 %
	Свыше 35 лет		Удвоенный риск для данной возрастной группы
Транслокационная форма	Риск для сибсов в спорадических случаях (при нормальном кариотипе родителей) соответствует простой трисомии.
Риск для потомства носителей семейных робертсоновских транслокаций (%)	Тип транслокации	Пол носителя
		женщина		мужчина
	(21q22q)	7%		2%
	(21q14q)	10%		2,4%
	(21q21q)	100%		100%
Мозаицизм у родителей	Риск = х/(2-х)*2, где х – доля аномального клеточного клона

Синдром Патау (трисомия 13) и Эдвардса (трисомия 18)

Простая трисомная форма и спорадическая транслокация	Риск для сибсов очень низкий (менее 1%)
Мозаицизм у родителей	Риск = х/(2-х)*2, где х – доля аномального клеточного клона
Семейные транслокации с участием хромосомы 13	Тип транслокации	Повторный риск несбалансированных хромосомных аномалий для сибсов
		Пол носителя
		женщина	мужчина
	(13q14q)	2%	1%
	(13q15q)	2%	1%
	(13q13q)	100%	100%
	(13q21q)	10-15%	<1%

Структурные аномалии аутосом