Issn 305-9397. Ғылым және білім. 2022. №1-1 (66) issn 2305-9397
Ауыл шаруашылығы ғылымдары
жүктеу/скачать 7.12 Mb. Pdf көрінісі
|
- Бұл бет үшін навигация:
- Результаты и их обсуждение.
| ______ ____________Ауыл шаруашылығы ғылымдары
162 термоциклере SimpliAmp, AppIied Biosystems. Состав смеси: ультрачистая вода 15,9 мкл; буфер 10× KCI, 2,5 мкл; 25mM MgCl, 3 мкл; нуклеотиды dNTP, 10 мМ, 0,5 мкл; праймер прямой, 10 пмоль/мкл, 0,25 мкл; праймер обратный, 10 пмоль/мл, 0,25 мкл; Taq ДНК-полимераза, 5 ед/мкл, 0,1 мкл. К 22,5 мкл ПЦР-смеси добавляли 2,5 мкл выделенной из образца ДНК. ПЦР по методу, описанному Taylor et al. (2001). Использовали праймеры G1-F: 5′-CCT GCA TAA ATC ACC GCT GAC AGC TCA ATG-3′, G2-R: 5′-GCT ACC ACT GAT CGC TCG AAT CAA ATC GGC-3′. Условия амплификации: 3 мин. при 95 ºC; 35 циклов по 20 с при 94 ºC, 20 с при 60 ºC и 1 мин. при 72 ºC, с завершающим этапом элонгации 5 мин. при 72 ºC. Ожидаемый размер ампликона – 187 п.о [18]. ПЦР по методу, описанному Gottsberger (2010). Использовали праймеры: FER1-F: 5′- AGC AGC AAT TAA TGG CAA GTA TAG TCA-3′, rgER2-R: 5′-AAA AGA GAC ATC TGG ATT CAG ACA AT-3′. Условия амплификации: 3 мин. при 94 ºC; 41 цикл по 10 с при 94 ºC, 10 с при 60 ºC и 30 с при 72 ºC, с завершающим этапом элонгации 5 мин. при 72 ºC. Ожидаемый размер ампликона – 458 п.о [19]. ПЦР по методу, описанному Stöger et al. (2006). Использовали праймеры по Llop et al., 2000: PEANT1-F: 5′-TAT CCC TAA AAA CCT CAG TGC-3′, PEANT2-R: 5′-GCA ACC TTG TGC CCT TTA-3′. Условия амплификации: 5 мин. при 95 °C; 35 циклов по 15 с при 95 °C, 30 с при 58 °C и 45 с. при 72 °C, с завершающим этапом элонгации 5 мин. при 72 ºC и охлаждением при 15 ºC. Ожидаемый размер ампликона – 391 п.о [20]. Электрофоретический анализ продуктов ПЦР. Электрофорез проводили в 1% агарозном геле в ТАЕ буфере на горизонтальном электрофорезе. Результаты и их обсуждение. Наиболее благоприятные климатические условия для выращивания плодовых культур, в частности яблони, имеют южные и юго-восточные регионы Казахстана. Мониторинговое обследование ряда хозяйств по выявлению возбудителя бактериального ожога и отбор образцов для последующего молекулярно-генетического анализа проводили в 2021 году на 53 сортах яблони, в том числе 21 районированных, 5 перспективных и 27 интродуцированных», а в 2022 году дополнительно на 16 сортах яблони, в том числе 12 интродуцированных, 2 районированных и 2 перспективных сортах яблони в Туркестанской, Жамбылской и Алматинской областей и коллекционных насаждениях ТОО «КазНИИ плодоовощеводства. По результатам проведенных обследований установлено, что бактериальный ожог яблони получил довольно широкое распространение. В связи с засушливыми погодными условиями, наблюдавшимися в течение вегетационного периода 2021 года, отмечено слабое развитие бактериального ожога по сравнению с 2022 годом, когда сложились благоприятные климатические условия для быстрого развития заболевания. Первая половина вегетационного периода характеризовалась обильными осадками, температура воздуха в среднем составила 20,1 – 21,8 0 С, что способствовало значительному распространению и развитию патогена. В обследованных производственных садах и фермерских хозяйствах среди 23 районированных сортов поражение яблони бактериальным ожогом обнаружены на большинстве сортах: Айдаред, Апорт, Голден Делишес, Гала, Грени Смит, Максат, Восход, Ренет Бурхардта, Старкримсон, Рубин, Фуджи. Из 39 интродуцированных сортов зарубежной селекции симптомы болезни отмечены на сорта яблони Пинова, Пинк Леди, Рашида, Конфетное, Синап Алматинский, Ред Топаз, Дельджонс, Сантана, Вилтон Стар, где распространение болезни составило 29 - 57%, со степенью развития – 11,0 - 25,3%, соответственно. На перспективных сортах яблони отечественной селекции Дамира, Жаркын, Есен, Саркыт, Рахат, Тюльпан, Айгуль симптомов бактериального ожога не было отмечено, что должно представлять значительный интерес для производства. Кроме того, наши результаты доказали угрозу возможной вспышки бактериального ожога в диких лесах в ближайшее время, так как очаги этого заболевания были уже обнаружены в Саркандском районе Жетысуской области, расположенном всего в нескольких километрах от естественных лесов дикорастущей яблони Сиверса, являющимися мировым достоянием. С целью выявления бактериального ожога яблони путем выделения возбудителя болезни в чистые культуры в лабораторных условиях проводили бактериологические анализы образцов, отобранных в результате обследования. Образцы для выявления возбудителя |