Тема 12. Реакция агглютинации (РГА, РПГА, реакция Кумбса). Реакция преципитации, иммунофлюоресценции

сформировать знания об основах иммунодиагностики инфекционных заболеваний;

-сформировать представление идать характеристику о принципах и методах иммунодиагностики (РА, РГПА, РП, иммунофлюоресценции)

-изучить механизмы, особенности и методы постановки различных иммунологических реакций;

-научить студентов интерпретировать полученные результаты

Конечные результаты обучения:

Сформировать знания о:

-основах иммунодиагностики инфекционных заболеваний.

-механизмах образования иммунных комплексов в реакциях

-методах серологической диагностики инфекционных заболеваний (РА, РГПА, РП, иммунофлюоресценции).

- постановке серологических реакций;

- постановке серологических реакций;

Основные вопросы темы.

-серологические реакции, виды, значение в медицине

-реакция агглютинации, ингредиенты, механизм, разновидности, способы постановки,практическое применение, достионства , недостатки.

-реакциипреципитации, ингредиенты, механизм, разновидности, способы постановки,практическое применение, достионства , недостатки.

-реакция гемагглютинации, виды, сущность, ингредиенты, практическое применение.

-реакция Кумбса для выявления неполных антител.

Пассивный метод- опрос, объяснение.

Активный метод (Выполнение и обсуждение практических работ, оформление протоколов. работа с мультимедийными базами данных, компьютерными моделями и программами.)

Основная:

1.Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология.- М.: МИА, 2005. - 734 с.

2.Медицинская микробиология, вирусология, иммунология (под ред. Воробьёв А.А) МИА., Москва, 2004.- 690с.

3.Коротяев А.И, Бабичев С.Л. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. - СПб.: Спец. лит, 2000. - 591 с.

4.Медицинская микробиология /Гл.ред В.И. Покровский, O.K. Поздеев. - М.: ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 2006. — 1200 с.

5.Тец В.В. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии – М.:Медицина, 2002. - 352 с.

6.Компьютерная программа "Диаморф" - "Медицинская микробиология" - атлас-руководство по бактериологии микологии, протозоологии и вирусологии под редакцией акад.проф. Воробьева А.А.

7.Дикий И.Л, Сидарчук И.И. и др. Микробиология. Руководство к лабораторным занятием. Киев, 2004, 583 с.

Дополнительная:

1.Борисов Л.Б., Козьмин-Соколов Б.В., Фрейдлин И.С. Руководство клабораторным занятиямпо медицинской микробиологии, вирусологии, иммунологии. - М.: Медицина, 1993.

2.Н.Красилыников А II. Справочник по антисептике. - Минск. - Выс шк.- 1995. - 367с.

3.Галактионов В.Т. Иммунология. - М. - Изд. "РИЦ МДК". - 2000. – 487с.

4.Воробьев А.А. "Микробиология, иммунология". - М.: МИА, 2002.

5.Воробьев А.А., Кривошейн Ю.С., Широбоков В.П. Медицинская и санитарнаямикробиология. - М.: Издательский центр "Академия" – 2003. – 464 с.

6.Аравийский Р.А., Горшкова Г.И. Практикум по медицинской микологии. - С-Пб. - 1995. - 50 с.

7.Всант P., Мосс У., Уивер Р. Определитель нетривиальных патогенных грамотрицательных бактерий (аэробных и факультативно-анаэробных). - М.: Мир, 1999. – 791 с.

8.Внутрибольничные инфекции // Под ред. Р.П.Венцелла. - М.:Медицина, 1990.- 656 с.

9.Саттон Д., Фотергилл А., Ринальди М. Определитель патогенных и условно-патогенных грибов. - Изд. Мир, 2001. - 470 с.

10.МаянскийА.Н.Микробиология дляврачей. - Нижний Новгород: Издательство Нижегородской государственной медицинской академии, 1999. — 400 с.

11.Котова А.Л. Клиническая микробиология: Методические указания.-Алматы, 2004.- 162с.

12.Тец В.В. Справочник по клинической микробиологии – СП Стройлеспечать. – 1994.– 224 с.

13.Определитель бактерий Берджи /Под ред Д.Хоулта, Н.Крига, П.Снитаи др.// М.: Мир, 1997. - в 2 томах.

14.Вопросы общей вирусологии, под ред. Кисилева И.О. Санкт- Петербург, 2007, 375 с.

15.Поздеев О.К. Медицинская микробиология: Учеб. О.К.Поздеев; под ред. В.И.Покровского.-2-е изд.испр.-М.:ГЭОТАР-МЕД,2004.-768 с

Основная:

1. Медициналық микробиология , Алматы,2011,683 б Рамазанова Б.А, Кудайбергенұлы К.К редакциялаумен.

2. Б.А. Рамазанова, А.Л. Котова және т.б. Микроорганизмдер морфологиясы.(оқу- әдістемелік құрал) Алматы,2007, 131б.

3. Б.А. Рамазанова, К.К Құдайбергенұлы, А.Л Котова. Инфекция туралы ілім.(оқу-құралы) Алматы 2007,111 б .

4. Б.А.Рамазанова, А.Л Котова және т.б. Микроорганизмдер физиологиясы. (оқу - әдістемелік құрал). Алматы,2007, 126 б.

5. Б.А. Рамазанова, А.Л Котова және т.б. Микроорганизмдер экологиясы. (оқу- құралы). Алматы, 2007, 95 б.

6. Б.А. Рамазанова, А.Л Котова және т.б. Микробтарға қарсы қолданылатын препараттар (оқу- құралы) Алматы, 2007.,47 б.

7. Микробиология және вирусология (жалпы бөлімі): Оқу құралы /Ү.Т.Арықпаева, К.Х.Алмағамбетов, Н.М.Бисенова, Н.Б.Рахметова, Г.Д.Асемова, Койшебаева К.Б., Бисимбаева С.К., Калина Н.В./. 1-ші басылым. (Медициналық және фармацевтикалық мамандық бойынша жоғары оқу орындарының студенттеріне арналған оқу құралы) - Астана, 2005. – 208 б.

8. «Микроорганизмдердің морфологиясы» оқу құралы, Астана, 2004, 32б.; Микробиология және вирусология (жеке бөлімі): Оқу құралы /Ү.Т.Арықпаева, К.Х.Алмағамбетов, Н.М.Бисенова, Ә.Ө.Байдүйсенова, Н.Б.Рахметова, Г.Д.Асемова /1-ші басылым. (Медициналық және фармацевтикалық мамандық бойынша жоғары оқу орындарының студенттеріне арналған оқу құралы) - Астана, 2006. – 199 б.

Дополнительная:

1. Жалпы микробиологиядан лабораториялық сабақтар бойынша оқу-әдістемелік құрал (А.Л. Котованың ред.). – Алматы, 1997.

Основная:

1.Richard V Georing, Hazel M Docrell, Mark Zukerman, Derek Wakelin, Ivan M Roit, Cedric Mims,Peter L Chiodini “Medical Microbiology”,4^th Edithion, 2008, UK, p.656.

2.Jacquelyn G Black “Microbiology”,7 ^th ,WILEY,2010,p.846

3. Patric R Muray,Ken S Rosenthal, Michael F Pfaller “Medical Mcrobiology”,5^th Edithion, 2008,p.962

4. Cedric Mims, Hazel M Docrell, Richard V Georing , Ivan M Roit, Derek Wakelin, Mark Zukerman, “Medical Microbiology”,3^th Edithion, 2004, ELSEVIER MOSBY, p.659.

5. Geo F Brooks,Kaaren C Carroll, Janett S Butel, Stephen F Morse,24^th Edithion, JAWETZ,MELNICK&ADELBERG^S

6. Mark Gladwin, Bill Trattler, “Clinical Microbiology”, 4^th Edithion, MedMaster, Miami, 2007, p.393.

7. Anathanarayan R., Paniker C.K.J. Text book of microbiology. Orien Longman. Seven edition, 2005.

8. Medical microbiology. Ed.by Inta Ozols. Elsevier Mosby, 2004.

Дополнительная:

1.Robert M Diamond “Designing Assessing Courses and Curricula”, 3^th Edithion,Jossey-Bass,2008,p.487

2.Patric Leonardi “Microbiology Study Guide: Key Review Questions and Answers”, Silver Educational Publishig,2005,p.78

3.N.Cary Engelberg,Victor DiRita,Terence S Dermondy, “Mechanisms of Microbial Disease” , 4^th Edithion,Lippincton Williams&Wilkins,2007,p.762

4.William F Strohl, Harriet Rouse, Bruce D Fisher, “Microbiology”, Lippincton^s,2001,p.516

5.Jawetz, Melnic & Adelberg. Medical microbiology. Singapore. 2004.

6.Arora D.R. Text book of microbiology. CB. 2001.

7.William A. Stradit, Harriet Rouse, Bruce D. Fisher. Microbiology. 2001, Lippencott, Williams and Wilkins

8.Black Jacquelyn G. Microbiology. Principles & Applications, 1996 by Prentice-Hall, New Jersey

9.Medical microbiology. An introduction to Infectious Diseases. Ed. by Ryan Kenneth J. Appleton and Lange. Stamford, Connecticut, 1998.

10.Toni Hart, Paul Shears. Atlas de Roche de Microbiologie. - Paris., 1997.- 314р.

1. 
   Что такое серологические реакции? Сфера применения.
   
2. 
   Опишите сущность реакций агглютинации, ингредиенты реакции, механизмы, методы постановки.
   
3. 
   Виды реакции агглютинации, сущность, применение.
   
4. 
   Опишите сущность реакции преципитации, ингредиенты реакции, механизмы, методы постановки.
   
5. 
   Виды реакции преципитации, ингредиенты реакции, механизмы, методы постановки
   
6. 
   Опишите сущность реакции Кумбса, ингредиенты реакции, механизмы, методы постановки.
   

1. 
   В лабораторию, обслуживающую пункт по приему пушнины, при экспертизе шкур, использовалась реакция термопреципитации Асколи с преципитирующей сибиреязвенной сывороткой. При учете кольцепреципитации, через 5 минут на границе жидкостей появилось белое кольцо. Что за феномен? Для чего использована в данном случае кольцепреципитация?
   

3. Резус-отрицательная женщина, которая повторно забеременела от резус-положительного мужа, обратилась в женскую консультацию. Как можно выявить накопление неполных антирезусных антител в сыворотке крови женщины?

1. Серологическая реакция – это реакция между:

а) бактериями и бактериофагами

б) антителами

в) антигенами

г) антителами и антигенами

д) неполными антителами

2. Реакция агглютинации – это реакция:

а) осаждения растворимого антигена

б) осаждения корпускулярного антигена

в) связывания комплемента

г) иммунного гемолиза

д) иммунного прилипания

3. Виды реакции агглютинации (верно все, к р о м е):

а) развернутая

б) непрямой гемагглютинации

в) преципитации

г) на стекле

д) коагглютинации

4. Материалом от обследуемого для постановки РА с целью серодиагностики является:

а) сыворотка

б) диагностикум

в) культура

г) агглютинирующая сыворотка

д) физиологический раствор

5. Критерии учета РА:

а) частичный гемолиз

б) агглютинация с интенсивностью ++++, +++, ++

в) феномен спонтанной агглютинации

г) осадок эритроцитов

д) полный гемолиз эритроцитов

6. Критерий достоверности РА:

а) отсутствие спонтанной агглютинации в контролях антигена и антител

б) помутнение в контроле сыворотки

в) спонтанная агглютинация в контроле сыворотки

г) спонтанная агглютинация в контроле антигена

д) феномен агглютинации в опыте

7. Диагностикум при постановки РНГА с целью серодиагностики:

а) сыворотка обследуемого

б) эритроцитарный антительный

в) несенсибилизированные эритроциты

г) эритроцитарный антигенный

д) взвесь убитых микроорганизмов

8 Критерии оценки РА при серодиагностики бактериальных заболеваний:

а) агглютинация с интенсивностью ++++, +++, ++

б) отсутствие спонтанной агглютинации в контроле сыворотки

в) диагностический титр

г) время появления агглютината

д) отсутствие спонтанной агглютинации в контроле антигена

9. Серологическая реакция – это реакция между:

а) моноклональными антителами

б) поликлональными антителами

в) полноценными антигенами

г) антителами и антигенами

д) неполными антителами

10. Антигены реакции преципитации:

а) корпускулярные

б) отсутствуют

в) только полноценные

г) только гаптены

д) полноценные и гаптены

11. РП используют (верно все, к р о м е):

а) в диагностике сибирской язвы

б) для определения токсигенности дифтерийных культур

в) для определения групп крови

г) в судебной медицине

д) для определения класса Ig

12. Для определения токсигенности дифтерийных культур используют РП:

а) кольцепреципитации

б) в геле

в) на стекле

г) развернутую

д) непрямую

13. Критерий учета РП в геле:

а) феномен преципитации с заведомо токсигенной культурой

б) нейтрализация токсина

) диффузное помутнение агара

г) феномен преципитации в зоне эквивалентных концентраций антигена и антител

д) образование крупно хлопчатого осадка

14. Критерий достоверности РП в геле:

а) феномен преципитации с заведомо токсигенной культурой

б) нейтрализация токсина

в) диффузное помутнение агара

г) феномен преципитации в зоне эквивалентных концентраций антигена и антител

д) образование крупно хлопчатого осадка

15. Преципитирующая сибиреязвенная сыворотка содержит:

а) возбудителя сибирской язвы

б) токсины бацилл сибирской язвы

в) споры бацилл сибирской язвы

г) антитела к специфическому антигену бацилл сибирской язвы

д) нормальные антитела

16. Преципитирующие сыворотки:

а) получают из донорской крови

б) используют для терапии

в) используют для сероидентификации микроорганизмов

г) используют для серодиагностики инфекционных заболеваний

д) содержат моноклональные антитела

17. Реакция преципитации – это:

а) реакция осаждения растворимого антигена

б) взаимодействие антиген-антитело

в) серологическая реакция

г) механизм реализации клеточного иммунитета

д) проходит в растворе электролита

18. Механизм РП:

а) гидрофобные взаимодействия

б) соединение активных центров антител и детерминантных групп антигенов

в) ван-дер Ваальсовы взаимодействия

г) броуновское движение

д) электростатическое взаимодействие

19. Антиген РП (верно все, к р о м е):

а) центрифугат мочи

б) лизат микробных клеток

в) экстракт пищевых продуктов

г) микробные токсины

д) взвесь бактерий

20. Отличие РП от РА:

а) антиген - гаптен

б) антиген – корпускулярный

в) антитела – моноклональные

г) антитела – поликлональные

д) антитела – блокирующие

21. Изотоп является меткой в серологической реакции:

а) РИФ

б) ИФА

г) РНГА

22. Флюорохромный краситель является меткой в серологической реакции:

а) РП вгеле

б) коагглютинации

в) РИА

г) РИФ

23. Метки в диагностических сыворотках присоедины к:

а) F_c- фрагменту антител

б) F_ab- фрагменту антител

в) легким цепям антител

г) тяжелым цепям антител

д) шарнирной части антител

24. Люминесцентный микроскоп используется для учета результатов:

а) ПЦР

б) ИФА

г) РСК

25. Суть экспресс-диагностики инфекционных заболеваний –это определение:

а) общего титра специфических антител

б) нарастание титра специфических антител

в) IgM

г) IgG

26. Для экспресс-диагностики инфекционных заболеваний используют (верно все, к р о м е):

а) РА

б) РНГА

г) РИФ

а) исследуемый материал (испражнения, раневое отделяемое, гной и др.)

б) сыворотка обследуемого

в) античеловеческая сыворотка, меченная флюорохромом

г) флюоресцирующая антисыворотка

д) пероксидаза

28. Исследуемый материал для РИФ (непрямой) с целью серодиагностики инфекционных заболеваний:

а) культура соответствующего возбудителя

б) античеловеческая сыворотка, меченная флюорохромом

в) сыворотка обследуемого

г) иммунная сыворотка

д) исследуемый материал (экссудаты, ликвор и др.)

29. Критерий учета положительной РИФ при бактериальных инфекциях:

а) образование хромогенного продукта

б) полный гемолиз

в) выявление светящихся микроорганизмов, характерных по морфологии для предполагаемого возбудителя

г) феномен агглютинации

д) феномен преципитации

30. Реакции антиген-антитело применяют для:

1. Профилактики

2. Лечения

3. Индикации выделенной культуры

4. Идентификации выделенных культур

5. Санитарно-гигиенических исследований

31. Для постановки реакции агглютинации необходимо:

1. Корпускулярный антиген

2. Комплемент

3. Нормальная сыворотка

4. Антиген в коллоидном состоянии

5. Антитела – лизины

32. Реакцию агглютинации применяют для:

1. Определения микроорганизмов во внешней среде

2. Индикации бактерий

3. Определения углеводов

4. Серодиагностики инфекционных заболеваний

5. Определения фальсификации продуктов

33. Механизм агглютинации связан с:

1. Проницаемостью клеточных мембран

2. Зарядом микробных клеток

3. Изменением дисперсности сывороточных глобулинов

4. Структурой клеточной стенки

5. Дисперсностью коллоидов антигена

34. Для получения агглютинирующих сывороток иммунизируют:

1. Мышей

3. Баранов

4. Лошадей

5. Ослов

1. Повышается при рентгеновском облучении животных

2. Выражается в антитоксических единицах

3. Наибольшее разведение сыворотки

4. Наибольшее разведение антигена, дающее агглютинацию

5. Не зависит от кратности иммунизации животного

36. Реакция преципитации используется для:

1. Диагностики инфекционных заболеваний

2. Определения микробного загрязнения почвы

3. Определения уровня комплемента

4. Определения группы крови

5. Индикации бактерий

37. Механизм реакции преципитаци связан с:

1. Изменением поверхностного натяжения бактерий

2. Процессами диффузии и осмоса

3. Дисперсностью коллоидов антигена

4. Структурой клеточной стенки

5.Аггрегацией микробов

38. Титр преципитирующей сыворотки:

1. Определяется в присутствии комплемента

2. Выражается в антиегнных единицах

3. Определяется с разведенной сывороткой

4. Это наибольшее разведение антигена, дающее преципитацию

5. Является наибольшим разведением сыворотки, дающим преципитацию

39. Реакция преципитации в геле исследуется для:

1. Титрования антитоксических сывороток

2. Изучения устойчивости к антибиотикам

3. Определения токсигенности

4. Определения групповой принадлежности крови

5. Определения уровня комплемента

40. Неполные антитела выявляют в реакции:

1. Гемагглютинации

2. Преципитации

3. Кунса

5. ИФА

Серологические реакции

Агглютинация

Прицепитация

Флюорохром

Люминисценция