Подготовительные операции для синтеза

 
22
1.  Выращивание посевного материала 
Культуру продуцента хранят 
4.1 в запаянных ампулах 
4.2 в жидком азоте 
4.3 на твердых носителях – пшено, ячмень, рис. 
4.4 в    лиофилизированном  состоянии – лучше  хранятся  споры,  чем  живые 
клетки 
4.5 в ампулах в лиофилизированном  состоянии на носителе (пшено, желатин-
альгинат натрия) 
4.6 в пробирке на скошенном агаре – срок хранения до нескольких месяцев. 
 
1.пробирка с продуцентом на скошенном агаре 
2. бльшое количество колб для выращивания молодой культуры  (проверяют 
чистоту культуры под микроскопом. 
3. инокулятор, мешалка 
4. посевной аппарат (с контролем) 
 
Такое количество стадий нужно для получения чистой культуры. 
Многоэтапное  выращивание  посевного  материала – обязательный  принцип 
биотехнологического производства. 
Среда для выращивания посевного материала обычно не совпадает по составу 
с ферментационной средой, т.е. при выращивании посевного материала среда 
может быть обогащена для быстрого роста биомассы. 
2.  Стерилизация технологического воздуха. 
  Технологический  воздух – это  воздух,  проходящий  через  ферментер.  Через 
ферментер  с  объемом 50м³ (кубических  метров  за  час)  пропускается 30000  
м³/час (кубических метров за час) воздуха. 
Обычный воздух содержит в 1 м³ (метр кубический)от 1 тысячи  до 100 тысяч 
клеток  микроорганизмов.  Воздух  стерилизуют  только  фильтрацией, 
пропуская его через систему фильтров, другие способы (УФ, термические) не 
подходят, так  как нужно стерилизовать очень большие объемы воздуха. 
Технологическая схема получения стерильного воздуха: 
 
Воздух с улицы  поступает на  →       Фильтр предварительной очистки от 
пыли и влаги, затем  поступает на    →      Компрессор (происходит сжатие 
воздуха, при этом воздух нагревается), затем -  на   →       Холодильник  (для 
охлаждения воздуха, поступившего от компрессора, затем)  →      Воздух под 

 
23
давлением  проходит  через  головной  фильтр  и    подается  на      →      
Индивидуальный фильтр (у каждого ферментера). 
 
Индивидуальные  фильтры  не  должны  пропускать  более 0,25 микрона  (мкм)  
микроорганизмов. 
Размеры  микроорганизмов. - кокки  составляют  0,5-1,5 мкм,  кишечные 
палочки – 0,4- 0,8 мкм. 
Существует  коэффициент  проскока,  поэтому  фильтры 100% стерилизацию 
дают не всегда. 
Фильтры стерилизуются острым паром при 120° С 30 мин. 
 
3.  Стерилизация и герметизация оборудования. 
        Ферментер и все   трубопроводы стерилизуют насыщенным паром при 130° 
С 1 час.  Для      проверки  эффективности  стерилизации  проводят  пробную 
стерилизацию с использованием биологического теста. 
4.  Стерилизация питательных сред 
   Водопроводная вода содержит до 100 микробных клеток в 1 миллилитре. 
Компоненты  питательной  среды – источники  углерода,  азота,  содержат  в 1 
грамме  муки  от 10000 до 1 миллиардов  клеток    микроорганизмов. 

жүктеу/скачать 2.51 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: