Методическое пособие к малому практикуму по биохимии и молекулярной биологии
жүктеу/скачать 1.21 Mb. Pdf көрінісі
|
- Бұл бет үшін навигация:
- Нуклеопротеины
| Фосфопротеины содержат в качестве простетической группы фос-
форную кислоту. Они служат важнейшим питательным материалом для развития эмбрионов и растущих организмов. Так, казеин молока, вителлин яичного желтка включают все незаменимые аминокислоты, важнейшие минеральные вещества – фосфор и кальций. Ход исследования 1 .Выде ление и гидро лиз ка зеина: к 1 2 мл обезжиренного 21 молока добавляется 1 2 капли концентрированной уксусной кислоты. Че- рез 5 мин надосадочную жидкость осторожно сливают, а в пробирку с осадком казеина добавляют 2 3 мл дистиллированной воды и через 5 мин избыток надосадочной жидкости сливают, а остаток фильтруют. Казеин собирают с фильтра в пробирку и растворяют в 4 мл 10 %-ного раствора натриевой щелочи. Содержимое пробирки кипятят 1 мин, затем охлаждают и проводят реакции для выявления продуктов гидролиза казеина. 2 . О б н а р у ж е н и е б е л к а (биуретовая реакция): в пробирку нали- вают 10 капель гидролизата и добавляют каплю 2 %-ного раствора CuSO 4 . Наблюдают результат качественной реакции на белок. 3 .Обнар ужени е фосфорной кис лоты: к 10 каплям гидролиза- та казеина добавляют 1 каплю раствора фенолфталеина и по каплям кон- центрированную азотную кислоту до обесцвечивания. Затем добавляют 20 капель молибденового реактива, нагревают до кипения и охлаждают. Появляется желтый осадок фосфомолибдата аммония– результат каче- ственной реакции на наличие фосфорной кислоты. Нуклеопротеины относятся к группе сложных белков. Простетиче- ской группой нуклеопротеидов являются нуклеиновые кислоты, представ- ляющие собой высокомолекулярные соединения, состоящие из нуклеоти- дов. Нуклеотиды, в свою очередь, состоят из пуриновых или пиримидино- вых оснований, сахара и фосфорной кислоты. В ходе гидролиза нуклео- протеины распадаются на основные компоненты согласно схеме, приве- денной ниже. Ход исследования Схема гидролиза нуклеопротеинов Нуклеопротеины Белки Нуклеиновые кислоты (протамины и гистоны) (или полинуклеотиды) Полипептиды Мононуклеотиды Пуриновые или Рибоза Фосфорная пиримидиновые или кислота основания дезоксирибоза |