Литература
Токсикологическая химия: метаболизм и анализ токсикантов: учебное пособие + СD/ под ред. Н.И. Калетиной. – М., 2008. – 1016 с. Переплет.
Токсикологическая химия: учебник / под ред. Т.В. Плетеневой. – 2-ое изд. – М., 2008. – 512 с. Переплет.
Лужников Е.А. Клиническая токсикология. -М.,"Медицина", 1994. –189с.
Крамаренко В. Ф. Токсикологическая химия / В. Ф. Крамаренко. - Киев, «Высшая школа», 1989.- 272с.
Контрольные вопросы
Острые отравления - актуальная проблема современной медицины.
Распространенность. Характер и причины отравлений.
Особенности отравлений в детском и подростковом возрасте.
Основные и дополнительные факторы, определяющие развитие отравлений.
Методы детоксикации.
МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ ПОД РУКОВОДСТВОМ ПРЕПОДАВАТЕЛЯ
Тема 2 – Теоретические основы пробоподгoтовки при исследовании биожидкостей. Жидкость - жидкостная экстракция. Твёрдо-жидкостная экстракция (сорбция) на модифицированных полимерах. Способы и методы очистки.
Цель: Ознакомление студентов со способами прободготовки биообъекта и интерпретацией результатов анализа.
Задачи обучения: научить студентов методам скрининга токсичных агентов, способам их изолирования и очистки.
Форма проведения: групповое обсуждение с презентацией
Задания по теме:
Скрининг токсичных агентов.
Методы изолирования токсикантов.
Раздаточный материал
Скрининг токсичных агентов.
Существует два направления скрининга токсичных агентов. Одно из них — прямое обнаружение (без изолирования и очистки) в образце специфического агента или класса соединений хромогенными, микрокристаллоскопическими, химическими, иммунохимическими и другими методами. Другой путь — это изолирование вещества из биологической матрицы с последующим исследованием концентрированного экстракта.
В большинстве методов исследования пробоподготовка необходима. Существуют два методологических подхода к подготовке проб: выделение аналита с полным разрушением матрицы (при анализе неорганических веществ); выделение аналита с частичным разложением или без разложения матрицы (при анализе органических веществ).
Основная цель пробоподготовки — отделение анализируемого вещества (выделение, изолирование) от основной массы экзогенных веществ и биоматрицы — достигается выполнением ряда важных процедур. К ним относятся: удаление возможных загрязнений, увеличение концентрации аналита, превращение аналита в форму, пригодную для экстракции, разделение и некоторые другие.
В ХТА биообъектов основная и наиболее важная (а в некоторых случаях и решающая) стадия состоит в подготовке образца к исследованию. Анализируемые биообъекты, содержащие токсичные вещества, делятся на:
• биожидкости (моча, плазма, сыворотка, слюна, слезы, спинномозговая жидкость, лимфа, сперма и др.);
• органы и ткани (мышечные и жировые ткани, волосы, ткань зубов, хрусталика глаза, мозга, печени, почки, легких, яичников и т.д.);.
• небиологические образцы (вещественные доказательства, например древесина, чернила, спиртовые и водные настойки, разнообразные пищевые продукты и др.).
Не только каждая из этих групп, но и каждый биообъект группы имеет морфологические особенности и требует особой аналитической процедуры пробоподготовки. Способы изолирования токсикантов из мочи, крови и тканей значительно различаются. Пробоподготовка включает определенные этапы, некоторые из которых выполняются или опускаются в зависимости от конкретной аналитической задачи и природы токсиканта.
Этапы пробоподготовки:
• предварительная обработка;
• гидролиз конъюгированных метаболитов;
• экстракция (или другой вид извлечения, например озоление или перегонка с водяным паром, микродиффузия или диализ и т.д.);
• очистка;
• дериватизапия.
Способы предварительной обработки образцов зависят от выбора методов исследования, природы токсиканта, типа биообъекта, других факторов (см. далее) и включают фильтрацию, центрифугирование, ультразвуковую обработку, разведение, депротеинизацию (цельной крови, плазмы), ферментативную обработку (ткани), гомогенизацию (ткани). Гидролиз конъюгированных метаболитов проводится с целью получения свободных метаболитов н возможности их дальнейшего исследования. Жидкость-жидкостная и твердофазная экстракция. Экстракцией могут быть изолированы токсичные вещества, относящиеся к различным классам и группам химических соединений, в том числе нелетучие органические вещества: наркотики, ядовитые, сильнодействующие лекарственные вещества, пестициды и др. Твердофазная экстракция обеспечивает концентрирование анализируемого соединения и удаление фоновых веществ с использованием специальных сорбентов. Очистка требуется только после проведения жидкость-жидкостной экстракции. Дериватизация – реакция получения производных искомого токсиканта путем преобразования полярных групп в неполярные без изменения основной структуры молекулы.
Частные случаи изолирования.
Достарыңызбен бөлісу: |