Производные изохинолина

Непрямой конкурентный ИФА.

• ПРИНЦИП - используются меченные ферментом вторичные антитела и иммобилизованный на твердой фазе конъюгат антиген-белок-носитель.

• На поверхности носителя иммобилизуют антиген-белок
• добавляют раствор, содержащий определяемый антиген и фиксированную концентрацию немеченых специфических антител, инкубируют.
• добавляют фиксированную концентрацию меченых антивидовых антител (вторичных).
• детектируют ферментативную активность образовавшихся на твердой фазе специфических иммунных комплексов,
• причем величина сигнала находится в обратно-пропорциональной зависимости от концентрации определяемого антигена

Преимущества и недостатки

небольшое число стадий,
что позволяет легко
автоматизировать анализ
сложность
методов синтеза ферментных конъюгатов,
а также возможное влияние компонентов
образца на активность фермента.
Даёт возможность выявлять антитела
к разным антигенам.
Анализируемый образец и
меченый реагент вводятся в систему
на разных стадиях,
что устраняет влияние различных эффекторов,
Применение универсального реагента 
— меченых антивидовых антител усложняет
анализ проведение из-за введения
дополнительных стадий.
ПРЯМОЙ ИФА
НЕПРЯМОЙ ИФА
преимущество
недостатки

Ферменты- метки в ИФА

 Пероксидаза из корней хрена (субстраты: • орто-фенилендиамин (продукт желто-коричневый, растворимый, поглощает при 492 нм);• 3,3'-диаминобензидин (продукт коричневый, нерастворимый); • 3-амино-9-этилкарбазол (продукт красный; нерастворимый); •

жүктеу/скачать 2.06 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: