Управление биологической активностью почв



бет14/57
Дата21.06.2016
өлшемі12.89 Mb.
1   ...   10   11   12   13   14   15   16   17   ...   57

В племенном хозяйстве «Манзор» осеменено 63 овцематки породы гемпшир, из которых объягнилось 26 голов или 41,3 %, получено 27 помесных ягнят породы суффольк от барана № 937, в том числе 10 баранчиков и 17 ярок. В племенном хозяйстве «Мадина» на овцах породы казахская тонкорунная осеменено 39 овцематок, из которых объягнились 22, или 56,4 %, получено 22 помесных ягненка породы рамбулье от барана № 1169, в том числе 8 баранчиков и 14 ярок. В племенном хозяйстве «Бултбек» на овцах породы казахская тонкорунная осеменено 24 овцематки, из которых объягнилось 10 голов, или 41,7 % и получено 10 помесных ягненка породы рамбулье от барана № 1169, в том числе 3 баранчика и 7 ярок. В племенном хозяйстве «Антиген» на овцах породы казахская тонкорунная осеменено 39 овцематок, из которых объягнилось 13 голов, или 33,3 %, получено 15 помесных ягненка породы рамбулье от барана № 1169, в том числе 7 баранчиков и 8 ярок. В племенном хозяйстве «Тау Самал» осеменено 30 овцематок, из которых объягнилось 14 голов, или 46,7 % и получено 16 помесных ягнят породы авасси от барана № 1058, в том числе 7 баранчиков и 9 ярок. Всего в 5 хозяйствах осеменено 195 овцематок, из которых объягнилось 85 голов, или 43,6 %, оплодотворяемость составила от 33,3 % до 56,4 %, получено 90 помесных ягнят, в том числе 35 баранчиков и 55 ярок.


УДК: 636.3.082.4
ЗАМОРАЖИВАНИЕ СПЕРМЫ БАРАНОВ
С. А. Аузбаев, кандидат биол. наук
Филиал «Научно-исследовательский институт овцеводства»

ТОО «КазНИИ животноводства и кормопроизводства»


Соңғы жалдары қой ұрықтарын криоконсервациялау бойынша дайындалған әдістер елеулі жетістіктерге жетті, соған байланысты қой шаруашылығы практикасында бұл әдіс кең таралуда, құнды малдардың генетикалық потенциалдарын ұтымды қолдану, ұрықтарын кең түрде алмастыру және тасымалдау сияқты жаңа мүмкіндіктерді аша отырып асылдандыру жұмыстары жақсаруда. Көлемі 2,0 және 5,0 мл болатын полипропиленді пробиркада қошқар ұрықтарын мұздатып сақтау және еріту технологиясы жасалынды, ол спермотозоидтар өміршеңдігінің 70% деңгейінде болуын қамтамасыз етті.
За последние годы достигнуты значительные успехи в разработке методов криоконсервации спермы баранов, благодаря чему метод получает широкое распространение в практике овцеводства, открывая новые возможности улучшения селекционной работы за счет рационального использования генетического потенциала наиболее ценных животных, транспортировки и широкого обмена спермой. Авторами разработан способ криоконсервации спермы в полипропиленовых пробирках объемом 2,0 и 5,0 мл с закручивающимися крышками.
In recent years, significant progress in developing methods of cryopreservation of sperm of rams, so the method is widely spread in practice of sheep breeding, offering new opportunities to improve plant breeding through use and management of the genetic potential of the most valuable animals, transportation and broad exchange of sperm. The authors developed a method of cryopreservation of sperm in polypropylene tubes of volume 2,0 and 5,0 ml with screw cap.
Криоконсервация спермы приобретает сейчас важное значение в связи с тем, что большое число пород и линий животных находится под угрозой исчезновения. Создание банка генов ценных исчезающих пород овец является составной частью мероприятий по охране природных богатств нашей планеты.

В настоящее время химическая промышленность специально для криобиологии выпускает полипропиленовые пробирки, которые выдерживают многократное замораживание-оттаивание. В 2006 году мы начали исследования по разработке способа криоконсервации спермы в полипропиленовых пробирках объемом 2,0 и 5,0 мл с закручивающимися крышками.

В 70-е годы Касымов К. Т., Ашимов Ж., (1975) проводили замораживание спермы барана в полиэтиленовых пробирках объемом 1,5-2,0 мл с закрывающимися пробками. Для этого пробирки помещали на металлическую сетку и погружали в жидкий азот на 5-7 секунд, вынимали и выдерживали над поверхностью жидкого азота в течение 1-2 минут, затем их пересыпали в марлевый мешок и опускали в жидкий азот на хранение. Замороженную сперму оттаивали в водяной бане при температуре 40-45 °С в течение минуты. Однако в то время этот способ не нашел широкого применения, в основном, по двум причинам: 1) пластмассовая пробка вылетала из пробирки при оттаивании, если в пробирке имелся воздух, 2) подвижность оттаянной спермы была на 1-2 балла ниже подвижности спермы, замороженной на фторопластовой пластине в форме гранул.

Криоконсервация спермы в полипропиленовых пробирках по сравнению с соломинками объемом 0,25 мл или гранулами объемом 0,15-0,20 мл имеет следующие преимущества:



  • пробирки удобно маркировать, складировать и хранить;

  • пробирки объемом 2 и 5 мл позволяют значительно сократить затраты труда и времени при технологической обработке семени;

  • объем 2 и 5 мл удобен для цервикального ИО овец в больших отарах (10 и 25 доз соответственно);

  • такие пробирки можно использовать многократно;

  • в пробирках объемом 5 мл можно замораживать цельные эякуляты;

  • замораживание спермы непосредственно в сосуде Дьюара значительно экономит расход жидкого азота;

  • большие объемы замороженной спермы (2 и 5 мл) меньше травмируются при изменениях температуры, которые возникают во время сортировки, инвентаризации и других технологических процессов.

Мы сравнили различные режимы замораживания и оттаивания спермы в полипропиленовых пробирках объемом 2,0 и 5,0 мл и определили наиболее оптимальный режим, отличительными особенностями которого являются:

1) замораживание пробирок непосредственно в сосуде Дьюара для экономии жидкого азота;

2) двухэтапное оттаивание замороженной спермы для повышения ее подвижности.

В ВИЖе и нашем научно-исследовательском институте овцеводства для оттаивания гранул замороженной спермы используется трубчатый алюминиевый оттаиватель. Оттаиватель спермы состоит из верхней и нижней частей, соединенных друг с другом узкой щелью шириной 1 мм. В верхней части льдообразная масса замороженного семени оттаивает, получая тепло от стенок оттаивателя, и через щель стекает в нижнюю часть. Поскольку оттаявшая часть сразу же отделяется, она не служит переносчиком тепла от стенок оттаивателя к неоттаявшей сперме и не подвергается повторному охлаждению, которое происходило бы при контакте теплой оттаявшей спермы с льдообразной неоттаявшей массой.

Изучение динамики температуры при оттаивании спермы, замороженной в пробирках объемом 2 мл, в водяной бане при температуре 75 °С (n = 3) показало, что сперма достигала температуры 37,4 °С в среднем через 1 мин. 45 сек., или со скоростью 133,4 °С/мин. Через 45 сек. после начала оттаивания температура спермы достигала – 4,3 °С. На этом временном участке происходило превращение льда в жидкость.

Был сделан вывод, что сперму барана, замороженную в пробирке объемом 2 мл, необходимо оттаивать в горячей водяной бане с температурой 75 °С в течение 45-50 сек. и затем перекладывать ее в металлический оттаиватель, находящийся в водяной бане с температурой 38-40 °С.

Оттаивание спермы в пробирках объемом 5мл проводится аналогично, только на первом этапе время увеличивается до 1 минуты.

С помощью термометра Barnant 100 мы определили температурный режим замораживания семени в криогенных пробирках объемом 5 мл в сосуде Дьюара. Температура спермы на начальном этапе замораживания в течение первых 3-х минут понижалась медленно со скоростью примерно 5,1 ºС/мин. Затем температура понижалась быстрее примерно со скоростью 19,6 ºС/мин., через 5 мин. 45 сек. замораживания температура спермы достигла – 81,6 ºС, через 10 мин. она опустилась до –146,9 ºС. Был сделан вывод, что криогенные пробирки объемом 5 мл в сосуде Дьюара MVE 20/20 необходимо замораживать в течение 6 мин. и затем опускать их в жидкий азот.

Осенью 2007 года проведен опыт по изучению оплодотворяющей способности замороженно-оттаяной спермы в пробирках объемом 5 мл. В данном опыте сперму разбавляли сахарозо-комплексонатной средой патент № 5183 (С. А. Аузбаев, 1997 г.).

По результатам этого эксперимента был проведен опыт по изучению оплодотворяющей способности спермы, замороженной с указанными антибиотиками. При этом было сформировано 2 группы животных по 12 голов в каждой. Осеменение проводили цервикальным методом дозой 0,2 мл и замороженно-оттаянной спермы. В первой группе из осемененных 12-ти овцематок в срок объягнилось 5, получено 5 ягнят, оплодотворяемость спермы по ягнению составила 41,7 %, при плодовитости 100 ягнят на сто маток. Во второй группе, при осеменении 12 овец заморожено-оттаяной спермой объягнилось 8 овцематок, что составило 66,7 %. Получено 9 ягнят при плодовитости 113 %.

Таким образом, доказана возможность замораживания спермы в пробирках объемом 2,0 и 5,0 мл, а также получены приемлемые результаты ягнения овец, разбавленной сахарозо-комплексонатной средой.

Эффективность данной научной работы заключается в том, что разработана технология замораживания и оттаивания спермы баранов в полипропиленовых пробирках объемом 2,0 и 5,0 мл, которая обеспечивает до 70 % выживаемости сперматозоидов. Кроме того, пробирки удобно маркировать, сперма в них защищена от микробного загрязнения окружающей. Расход жидкого азота для замораживания 81 дозы в среднем 3 эякулята спермы, размещаемой на поверхности фторопластовой пластины составляет 2 литра, цена одного литра составляет 400 тенге, затраты на 2 литра 800 тенге. При замораживании 81 пайеты (соломинки) затраты жидкого азота составляют 2 г × 81 = 162 г жидкого азота, то есть снижаются в 12,3 раза. Стоимость 1 пайеты составляет 67 тенге, а 81 – 5427 тенге, тогда как при замораживании в пробирках расходуется 3 пробирки на 3 эякулята по цене 20 тенге, или же 60 тенге на 3 пробирки то есть снижаются в 90,5 раз, кроме того пробирки используются многократно.


УДК: 636.3.082.4


СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДОВ ВОСПРОИЗВОДСТВА ОВЕЦ
С. А. Аузбаев, кандидат биол. наук
Филиал «Научно-исследовательский институт овцеводства»

ТОО «КазНИИ животноводства и кормопроизводства»


Мақала авторларымен әлі дами қоймаған ұрғашы тоқтылар донор реципиенттен аспирированды аналық клеткаларды тікелей ауыстыру жолымен құнды ұрпақтар алынды. Аналық клеткалар ІІ метафаза кезеңінде овуляцияға дейін алынды, яғни аралық реципиентты қолданбай жатыр ішінде қатар ұрықтанды, сондықтан оларды екпей, бірден қой-рецепиентке отырғызды. Ұрықтандырған кезде отандық өндірістен шыққан антибиотикті сахарозокомплексонатпен араласқан ұрық қолданылды.
Авторами статьи получено полноценное потомство от неполовозрелых ярок путем прямой пересадки аспирированных яйцеклеток от донора реципиенту. Яйцеклетки на стадии метафаза II получали незадолго до овуляции, поэтому их не культивировали, а сразу же подсаживали овце-реципиенту, которую параллельно осеменяли внутриматочно, без использования промежуточного реципиента. При осеменении использовали сперму, разбавленную сахарозо-комплексонатной средой с антибиотиком отечественного производства.
The authors obtained a complete immature offspring of ewes through direct my transplant aspirated oocytes from a donor recipient. Oocytes at the stage of meta-phase II received shortly before ovulation, so they are not cultivated, and immediately sitting down, whether a recipient sheep, which parallel seeding intrauterineously, without using the intermediate recipient. When insemination using semen diluted with saccharose-complexonat medium with antibiotic produced domestically.
Обеспечение населения продуктами питания остается глобальной проблемой, требующей перманентного решения. Резкое снижение поголовья повлекло за собой сокращение производства продуктов животноводства, что потребовало совершенствования генетической структуры существующих пород в направлении интенсивного использования биотехнологических методов воспроизводства с целью производства пищевой продукции.

Сотрудниками лаборатории получено полноценное потомство от неполовозрелых ярок путем прямой пересадки аспирированных яйцеклеток от донора реципиенту. В наших исследованиях аспирация фолликулов проводилась с помощью лапароскопа и вакуумного насоса из яичников непосредственно на овцах и ярках, а не из ампутированных яичников. В данном случае, овцы и ярки используются многократно в качестве доноров яйцеклеток без потери репродуктивной способности.

Вторым отличием наших исследований является то, что яйцеклетки на стадии метафаза II получали незадолго до овуляции, поэтому их не культивировали, а сразу же подсаживали овце-реципиенту, которую параллельно осеменяли внутриматочно. То есть мы исключили использования промежуточного реципиента. При таком подходе реципиент продуцировал собственную яйцеклетку, которая оплодотворялась вместе с подсаженной.

С целью стимуляции суперовуляции пременен препарат фоллимаг российского производства. Для этого 6 ярок 6-7 месячного возраста были синхронизированы с помощью влагалищных пессариев и обработаны препаратом фоллимаг в чистом виде и в сочетании с прогестероном (таблица 1).


Таблица 1 – Результаты трансплантации яйцеклеток у ярок в возрасте 6-7 месяцев




п/п

Показатели

ГСЖК фоллимаг, 1200 ИЕ

с прогестероном

без прогестерона

1.

2.
3.

4.

5.

6.

7.

Число животных

Обнаружено фолликулов, всего

в среднем на донора

Пересажено яйцеклеток

Число реципиентов

Перегуляло реципиентов

Процент перегула

Получено ягнят

3

18

6,0

5

2

1

50,0

1

3

13

4,3

4

2

1

50,0

1

В первой группе у 3 ярок в возрасте 6-7 месяцев обработанных, с использованием прогестерона, обнаружено 18 крупных фолликулов, в среднем по 6,0 фолликулов на донора, которые аспирированы с помощью вакуумного насоса.

После морфологической оценки пять яйцеклеток были пересажены 2 маткам реципиентам казахской курдючной породы, из которых 1 перегуляла, а одна объягнилась в срок и принесла одного ягненка, который на ¾ был породы авасси, так как ярка- донор была помесью с породой авасси, а реципиент был осеменен спермой чистопородного барана авасси.

Во второй группе у 3 ярок в возрасте 6-7 месяцев обработанных, без прогестерона, обнаружено 13 крупных фолликулов, в среднем по 4,3 фолликула на донора, которые аспирированы с помощью вакуумного насоса.

После морфологической оценки четыре яйцеклетки были пересажены 2 маткам реципиентам казахской курдючной породы, из которых 1 перегуляла, а одна объягнилась в срок и принесла одного ягненка, который на ¾ был породы авасси, так как ярка-донор была помесью с породой авасси, а реципиент был осеменен спермой чистопородного барана авасси.

Доказано, что инъекция 25 мг прогестерона в сочетании с обработкой ФСГ в дозе 25 ед. увеличивает количество овуляций на донора до 10,5.

Данная научная разработка обеспечивает сокращение интервала между поколениями от года до полутора лет.

Выяснено, что использование клеток гонад, как вектора, в биотехнологии рассматривается в качестве перспективного приема получения трансгенных животных, вследствие природной способности сперматозоидов поглощать чужеродную ДНК и переносить ее в яйцеклетку посредством оплодотворения. Культивирование спермы с ДНК не снижает оплодотворяемость, а полученный приплод имеет в полнее нормальные рост и развитие. Из 18 осемененных маток объягнились 15 и получено 15 ягнят, тогда как суягность реципиентов от пересадки микроинъецированных зигот составила 10,0 % (1/10), а приживляемость микроинъецированных зигот – 5,0 % (1/20).

Разработаны технологические элементы замораживания и оттаивания спермы баранов в полипропиленовых пробирках объемом 2,0 и 5,0 мл, которые снижают затраты труда и обеспечивают до 70 % выживаемости сперматозоидов.

Получена приемлемая оплодотворяемость овцематок и козоматок после лапароскопического осеменения импортным замороженным семенем баранов суффольк, рамбулье, авасси, полипэй и ост-фриз и замороженным семенем козлов шотландской кашмирской породы, которая в среднем составила 47,2-48,2 % и 65,0-75,0 % соответственно.

В селекционно-генетическом центре по овцеводству замороженным семенем баранов пород ост-фриз и полипэй с помощью лапароскопа было осеменено соответственно 20 и 19 овцематок многоплодного типа мясошерстной казахской породы. Весной 2007 года в срок объягнились 18 голов, или 46,2 %, и было получено 23 ягненка. Сперма баранов ост-фризской породы применялась для повышения молочности, а породы полипэй для сохранения многоплодия овец многоплодного типа мясошерстной казахской породы.

В крестьянском хозяйстве “Мадина” Панфиловского района Алматинской области замороженным семенем импортных баранов осеменено 49 овцематок. По результатам учета ягнения объягнилось 17 голов, что составило 34,7 %. Получено 23 ягненка, в том числе 12 баранчиков и 11 ярок. Плодовитость составила 135,3 %.

Совместно с сотрудниками отдела полутонкорунного овцеводства, проведено изучение роста и развития данных ягнят, отобранных в воспроизводящую группу. Живая масса 5 баранчиков в среднем составила – 58,0 кг (от 48 до 64 кг), а 4 ярок – 43,5 кг (от 38 до 49 кг).

Исследовано положительное влияние санирующего препарата цефазолин для хранения замороженной спермы. В эксперименте изучено влияние антибиотика отечественного производства на оплодотворяемость замороженно-оттаянной спермы, так как ранее применяемый препарат спермосан-3 снят с производства. Аналогом послужили исследования Н. М. Решетниковой, Т. А. Мороз, Т. И. Турко (ВНИИплем, 1997 г.), показавшие что наиболее оптимальными концентрациями, при которых не снижается показатель переживаемости спермиев, является 25 мкг/мл гентамицина и 100 ЕД / мл пенициллина.

Наилучшие показатели переживаемости спермы получены при санации спермы пенициллином с гентамицином 167,0 ± 25,47 и цефазолином в концентрации 1мг на 100мл среды – 214,0 ± 25,13.

По результатам этого эксперимента был проведен опыт по изучению оплодотворяющей способности спермы, замороженной с указанными антибиотиками. При этом было сформировано 2 группы животных по 12 голов в каждой. Осеменение проводили цервикальным методом дозой 0,2 мл и замороженно-оттаянной спермы. Результаты осеменения приведены в таблице 2.


Таблица 2 – Результаты осеменения заморожено-оттаяной спермой


п/п

Показатели

Антибиотики

пенициллин с гентамицином

цефазолин

1.

Осеменено, овец

12

12

2.

Объягнилось, овец

5

8

3.

Ягнение, %

41,67

66,67

4.

Получено ягнят, гол.

5

9

5.

Плодовитость, %

100

113

Каталог: 2014 -> elektronnaia bibl -> nauki i obrazavanie -> nauka i obrazavanie 2010
nauki i obrazavanie -> Факторы распространения вирусных болезней картофеля
nauki i obrazavanie -> Ауыл шаруашылық ғылымдары
nauki i obrazavanie -> Ауыл шаруашылық ғылымдары Агрономия ауыл шаруашылық Ғылымдары
nauki i obrazavanie -> Ауыл шаруашылық ғылымдары Агрономия ауыл шаруашылық Ғылымдары
nauki i obrazavanie -> Резервы повышения продуктивности и плодородия орошаемых земель на западе казахстана
nauka i obrazavanie 2010 -> Ауыл шаруашылық ғылымдары Агрономия ауыл шаруашылық Ғылымдары
nauki i obrazavanie -> Д. К. Тулегенова, кандидат с х. наук, Г. Х. Шектыбаева
nauki i obrazavanie -> Ауыл шаруашылық ғылымдары


Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   10   11   12   13   14   15   16   17   ...   57


©dereksiz.org 2019
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет