Hispolon от Phellinus linteus Индуцирует G0/G1 клеточного цикла и апоптоза в nb4 человека Лейкемия клеток
жүктеу/скачать 0.69 Mb.
|
- Бұл бет үшін навигация:
- Hispolon from Phellinus linteus Induces G0/G1 Cell Cycle Arrest and Apoptosis in NB4 Human Leukaemia Cells.
- Source
| Hispolon от Phellinus linteus Индуцирует G0/G1 клеточного цикла и апоптоза в NB4 человека Лейкемия клеток .
Чэнь YC , Чанг HY , Дэн JS , Чэнь JJ , Хуан СС , Лин IH , Куо WL , Чао Вт, Хуан ГДж . Школа после бакалавриата китайской медицины, Цы-цзи университета , Hualien 970 , Тайвань. Hispolon ( фенольное соединение изолированы от Phellinus linteus ) было показано, обладают сильным антиоксидантным, противовоспалительным, противоопухолевым и противодиабетические свойства . В этом исследовании , мы исследовали антипролиферативное действие hispolon на гепатоцеллюлярной карциномы человека NB4 клеток с использованием МТТ , фрагментацию ДНК , DAPI (4, 6- диамидино -2- фенилиндола дигидрохлорид ) окрашивание и анализа проточной цитометрии . Hispolon ингибирует клеточный рост клеток NB4 в зависимости от дозы через индукцию клеточного цикла в фазе G0/G1 измеряли с помощью проточной цитометрии анализа и апоптоза , о чем свидетельствует Лэддеринг ДНК. Воздействие NB4 клеток hispolon - индуцированный апоптоз - родственный белок выражения, такие как виде расщепления каспазы 3, каспазы 8 , каспазы 9, поли (ADP рибоза) полимеразы , и проапоптотическую белка Bax . Вестерн-блот анализ показал, что уровни белка из внешних апоптозных белков (ФАС и FasL ) , внутренние родственных белков (цитохром С), а отношение Bax/Bcl-2 были увеличены в NB4 клеток после обработки hispolon . Hispolon -индуцированной G0/G1-phase задержание было связано с заметным уменьшением экспрессии белка р53 циклины D1, и циклинов Е и циклин-зависимых киназ ( CDKS ) 2 и 4 , с сопутствующей индукции p21Waf1/Cip1 и p27Kip1 . Мы пришли к выводу , что hispolon вызывает оба внешних и внутренних апоптоза в NB4 лейкозных клеток человека в пробирке. Am J Chin Med. 2013;41(6):1439-57. doi: 10.1142/S0192415X13500961. Hispolon from Phellinus linteus Induces G0/G1 Cell Cycle Arrest and Apoptosis in NB4 Human Leukaemia Cells.Chen YC, Chang HY, Deng JS, Chen JJ, Huang SS, Lin IH, Kuo WL, Chao W, Huang GJ. SourceSchool of Post-Baccalaureate Chinese Medicine, Tzu Chi University, Hualien 970, Taiwan. AbstractHispolon (a phenolic compound isolated from Phellinus linteus) has been shown to possess strong antioxidant, anti-inflammatory, anticancer, and antidiabetic properties. In this study, we investigated the antiproliferative effect of hispolon on human hepatocellular carcinoma NB4 cells using the MTT assay, DNA fragmentation, DAPI (4, 6-diamidino-2-phenylindole dihydrochloride) staining, and flow cytometric analysis. Hispolon inhibited the cellular growth of NB4 cells in a dose-dependent manner through the induction of cell cycle arrest at G0/G1 phase measured using flow cytometric analysis and apoptotic cell death, as demonstrated by DNA laddering. Exposure of NB4 cells to hispolon-induced apoptosis-related protein expressions, such as the cleavage form of caspase 3, caspase 8, caspase 9, poly (ADP ribose) polymerase, and the proapoptotic Bax protein. Western blot analysis showed that the protein levels of extrinsic apoptotic proteins (Fas and FasL), intrinsic related proteins (cytochrome c), and the ratio of Bax/Bcl-2 were increased in NB4 cells after hispolon treatment. Hispolon-induced G0/G1-phase arrest was associated with a marked decrease in the protein expression of p53, cyclins D1, and cyclins E, and cyclin-dependent kinases (CDKs) 2, and 4, with concomitant induction of p21waf1/Cip1 and p27Kip1. We conclude that hispolon induces both of extrinsic and intrinsic apoptotic pathways in NB4 human leukemia cells in vitro. Активация p27Kip1 - циклин D1/E-CDK2 пути по полисахарида Phellinus linteus приводит к S- фазе ареста в НТ-29 клеток. Чжун Ю, Джи DF , Ли Ю.Г., Лин ТБ , Lv ZQ , Чэнь HP . Научно-исследовательский институт Sericultural , Чжэцзян академия сельскохозяйственных наук , Ханчжоу 310021 , Китай. Наш предыдущий исследование показало, что полисахарид (Р1) от Phellinus linteus демонстрирует значительное тормозящее деятельность на клетки колоректального рака человека ( НТ-29 ) . Однако его роман молекулярный механизм остается неизвестным. Для получения понимание механизма P1 в действия , мы рассмотрели его влияние на пролиферацию клеток в пробирке и в естественных условиях, распределение клеточного цикла , апоптоз, аутофагии , и выражение нескольких клеточного цикла взаимосвязанных белков в НТ-29 клеток. Интересно, что мы обнаружили, что объем и вес твердой опухоли значительно уменьшились в P1 ( 200mg/kg ) -обработанных мышей по сравнению с контролем . Тем не менее, немного увеличен вес тела Р1 лечение опухоли мышей , без существенного повышение активности АЛТ , АСТ уровни в сыворотке и концентрацией ПОЛ в печени и почек показало, что P1 не имеет токсичность по отношению к млекопитающим в дозе 200mg/kg . Кроме того, P1 вызвало увеличение существенно зависит от дозы в цикле S- фазе клеток , но не апоптоз и аутофагия в НТ-29 клеток. ОТ-ПЦР и западные результаты блот значительно показал вниз регулируется выражения циклин D1, циклин Е, и CDK2 , а также повышенные выражения p27Kip1 в P1 ( 100μg/mL ) обработанных HT- 29 клетки . Эти результаты свидетельствуют о том , что активация p27Kip1 - циклин D1/E-CDK2 пути участвует в P1- индуцированной остановки клеточного цикла S- фазы в НТ-29 клеток. Chem Biol Interact. 2013 Nov 25;206(2):222-9. doi: 10.1016/j.cbi.2013.09.008. Epub 2013 Sep 20. Activation of P27kip1-cyclin D1/E-CDK2 pathway by polysaccharide from Phellinus linteus leads to S-phase arrest in HT-29 cells.Zhong S, Ji DF, Li YG, Lin TB, Lv ZQ, Chen HP. SourceSericultural Research Institute, Zhejiang Academy of Agricultural Science, Hangzhou 310021, China. AbstractOur previous study showed that polysaccharide (P1) from Phellinus linteus exhibits a significant inhibitive activity on human colorectal carcinoma cells (HT-29). However its novel molecular mechanism remains unknown. To obtain insights into P1's mechanism of action, we examined its effects on cell proliferation in vitro and in vivo, cell cycle distribution, apoptosis, autophagy, and expression of several cell cycle interrelated proteins in HT-29 cells. Interestingly, we found that volume and weight of the solid tumor significantly decreased in P1 (200mg/kg)-treated mice compared with the control. However, slightly increased the body weight of the P1 treated tumor-bearing mice, with no significant increased ALT, AST levels in serum and LPO concentration in liver and kidney indicated that P1 has no toxicity to mammals at a dose of 200mg/kg. Furthermore, P1 caused a significantly dose-dependent increase in the S-phase cell cycle, but no apoptosis and autophagy in HT-29 cells. RT-PCR and Western blot results showed significantly down-regulated expressions of cyclin D1, cyclin E, and CDK2, as well as increased expressions of P27kip1 in P1 (100μg/mL)-treated HT-29 cells. These results suggested that the activation of P27kip1-cyclin D1/E-CDK2 pathway is involved in P1-induced S-phase cell cycle arrest in HT-29 cells. Copyright © 2013 Elsevier Ireland Ltd. All rights reserved. Полисахарид из Phellinus linteus индуцирует S- фазы ареста в клетках HepG2 , уменьшая выражение calreticulin и активации p27Kip1 - циклин A/D1/E-CDK2 пути. Ли Ю.Г., Джи DF , Чжун Ю, Лю П.Г., Lv ZQ , Чжу JX , Чэнь JE , Чэнь HP . Научно-исследовательский институт Sericultural , Чжэцзян академия сельскохозяйственных наук , Ханчжоу 310021 , Китай. Этнофармакологии ЗНАЧЕНИЕ : Наш предыдущий исследование показало, что протеогликан P1 от Phellinus linteus ( Mesima ) проявляет значительную противоопухолевую активность против клеток гепатоцеллюлярной карциномы человека ( HepG2 ) , однако его молекулярный механизм остается неизвестным. Это исследование направлено на дать ответ на механизме противоопухолевого деятельности P1 против клеток HepG2 . МЕТОДЫ : Мы исследовали влияние P1 на пролиферацию клеток HepG2 в пробирке и в естественных условиях. Проточной цитометрии использовали для анализа распределение клеточного цикла и апоптоза . Протеомного анализа в реальном времени (RT) -PCR и Вестерн-блот было проведено наблюдать экспрессию нескольких белков контроле клеточного цикла в клетках HepG2 . РЕЗУЛЬТАТЫ: Оба объем и вес твердых опухолей были значительно уменьшилось в P1- обработанных мышей ( 200mg/kg ) по сравнению с контролем . В HepG2 клетки в P1 -обработанных опухолей были значительно сократилось , неправильной формы , и меньше. P1 немного увеличили вес тела опухоли мышей , что указывает на Р1 нетоксичными для млекопитающих в 200mg/kg . P1 также вызывает значительное дозозависимое увеличение S фазы сердца , но не апоптоз не наблюдалось в клетках HepG2 . Результаты протеомного анализа , RT-PCR и Вестерн-блот- анализа показали, что значительно подавляется выражение calreticulin , циклин D1, циклин Е , и CDK2 и активируется экспрессия р27 Kip1 и циклин А в P1 -обработанных клетках HepG2 (200 мкг / мл). ЗАКЛЮЧЕНИЕ : Эти результаты позволяют предположить , что выражение calreticulin и P27 Kip1 - циклин A/D1/E-CDK2 путь были вовлечены в P1- индуцированной остановке клеточного цикла S- фазы в клетках HepG2 . J Ethnopharmacol. 2013 Oct 28;150(1):187-95. doi: 10.1016/j.jep.2013.08.028. Epub 2013 Aug 31. жүктеу/скачать 0.69 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|