Методом спектрофотометрии

Результаты и их обсуждение

жүктеу/скачать 6.54 Mb.

бет	19/21
Дата	18.07.2016
өлшемі	6.54 Mb.
	#207634

1 ... 13 14 15 16 17 18 19 20 21

Результаты и их обсуждение. Для оценки чувствительности микроорганизмов использовали питательный агар (pH 7,2±0,2). Суточную культуру микроорганизмов вносили в количестве 0,1 мл. В исследовании использовали тест-культуры Pseudomonas fluorescens и Bacillus subtilis.

Суспензии образцов шампуней и бальзамов готовили в соотношении 1:1 образец:стерильная дистиллированная вода.

После застывания среды стерильным пробочным сверлом делали лунки (d=15 мм). В лунки вносили исследуемые суспензии. Инкубировали при (30±1)ºС в течение 24 ч. Результаты оценивали по ширине зон ингибирования роста тест-культур.

Зона ингибирования роста тест-культуры Bacillus subtilis: шампунь с пихтой сибирской – (26±1) мм; с пихтой одноцветной – (27±1) мм; с отдушкой – (23±1) мм; с консервантом – (32±2) мм. Бальзам с пихтой сибирской, с пихтой одноцветной, с отдушкой – зона ингибирования отсутствовала, а с консервантом составила (24±1) мм.

Зона ингибирования роста тест-культуры Pseudomonas fluorescens: шампунь с пихтой сибирской, с пихтой одноцветной – отсутствовала зона ингибирования, с отдушкой – (22±1) мм; с консервантом – (25±1) мм. Бальзам с пихтой сибирской, с пихтой одноцветной, с отдушкой отсутствовала зона ингибирования, а с консервантом – (22±1) мм.

Заключение. Как видно из полученных данных бальзам с консервантом и шампунь с консервантом обладают антибактериальной активностью по отношению к обоим видам микроорганизмов.

Все образцы шампуня обладали антибактериальной активностью по отношению к Bacillus subtilis.

УДК 556.01+628.357.4

Студ. В. Д. Михайловская, магистрант В. Н. Клинцевич

Науч. рук. доц. Е. А. Флюрик,

(кафедра биотехнологии и биоэкологии, БГТУ)

ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ПРЕПАРАТА «КОМБОШОК» НА
СКОРОСТЬ ПРОРАСТАНИЯ СЕМЯН ГРЕЧИХИ ПОСЕВНОЙ

Введение. В настоящее время для ускорения прорастания семян все чаще применяются различные химические и биологические препараты. Это вещества природного происхождения, выделенные из грибов, бактерий, водорослей, торфа, угля, сапропеля. Такие препараты стимулируют биохимические процессы в организме растения, активируют фотосинтез и углеводный обмен при интенсивном нарастании зеленой массы, повышают коэффициент использования элементов питания из почвы, улучшаются всхожесть семян, а также приживаемость рассады при посадке и растений при пересадке, увеличивается сопротивляемость растений болезням, заморозкам и засухе. Одним из аналогов таких стимуляторов является разработанный на кафедре биотехнологии и биоэкологии препарат «Комбошок». В процессе производства напитка на основе культуральной жидкости (КЖ) чайного гриба (Medusomyces gisevii) образуется большое количество биомассы плодового тела. Как известно, чайный гриб представляет собой сожительство дрожжевых грибов и бактерий. Микроорганизмы продуцируют в КЖ витамины (тиамин, аскорбиновая кислота), органические кислоты (уксусная, глюконовая, щавелевая, лимонная, яблочная, молочная, пировиноградная, койевая), полисахариды (хондроитинсульфат и др.), липиды, а также моно- и дисахариды, следовательно, само плодовое тело также богато ими.

Основная часть. Цель исследования – изучить влияние препарата «Комбошок» на скорость прорастания семян гречихи посевной.

При производстве напитка на основе КЖ чайного гриба образуется отход в виде плодового тела чайного гриба. Влажность исходного плодового тела чайного гриба составляет около 80 %.

В результате сушки и измельчения с помощью лабораторной вибрационной мельницы был получен порошок темно-коричневого цвета с легким запахом кислого хлеба. Результаты помола представлены в таблице 1.
Таблица 1 – Результаты помола плодового тела чайного гриба

Размер частиц, мкм	200	100	80	40	20	менее 20
Масса, г	4,5	6,8	2,5	5,8	0,5	0

Для изучения стимулирующего действия препарата «Комбошок», оказываемого на прорастание семян, в качестве тест-культуры использовали семена гречихи посевной. Семена проращивали с добавлением порошка на чашках Петри в течение 14 сут при температуре воздуха 22–25ºС. Уже на третьи сутки количество семян, проросших на опытных чашках Петри, в 3 раза превосходило количество семян в контроле. Расчет стимуляции проращивания семян гречихи препаратом «Комбошок» СЭ_пр (%) производили по формуле (1)

, (1)

где ПР⁰ – пророщенные семена растения в контроле, шт;

ПР – пророщенные семена растения, выращенные на почве с добавлением препарата «Комбошок», шт.

Результаты эксперимента представлены в таблице 2. Видно, что препарат оказывает стимулирующее действие на прорастание семян.

Таблица 2 – Оценка стимулирующего эффекта препарата «Комбошок»
на прорастание семян гречихи посевной

Образец	Количество препарата, внесенного в почву, г	Всхожесть семян (14 сут), шт	Оценка стимулирующего эффекта, %

Контроль	0	14±1	–
Опыт	0,08	16±1	14,1±0,3

Для оценки стимуляции всхожести семян и их дальнейшего развития, семена гречихи выращивали в вегетационных сосудах с добавлением препарата «Комбошок». В течение 14 сут проводили наблюдения за всхожестью и развитием растений. Далее растения были извлечены из вегетационных сосудов и определены следующие показатели: всхожесть, длина наземной и корневой систем. По полученным данным производили оценку стимулирующего эффекта оказывающего препаратом «Комбошок» на всхожесть и дальнейшее развитие семян гречихи. Расчет стимулирующего эффекта препарата по всхожести растений производили по формуле (2)

, (2)

где В⁰ – всхожесть растений в контроле, шт;

В – всхожесть растений, выращенных на почве с добавлением препарата «Комбошок», шт.

Расчет стимулирующего эффекта порошка по длине наземной части растений СЭ_н (%) производили по формуле (3)

, (3)

где Д_н⁰ – средняя длина наземной части растений в контроле, мм;

Д_н – средняя длина наземной части растений, выращенных на почве с добавлением препарата «Комбошок», мм.

Расчет стимулирующего эффекта препарата по длине корневой части растений СЭ_к (%) производили по формуле (4)

, (4)

где Д_к⁰ – средняя длина корневой части растений в контроле, мм;

Д_к – средняя длина корневой части растений, выращенных на почве с добавлением препарата «Комбошок», мм.
Таблица 3 – Влияние препарата «Комбошок» на ростовые
характеристики гречихи посевной

Образец

Количество препарата, внесенного в почву, г

Всхожесть, семян

(14 сут), шт

Средняя длина растений, см

наземной
части

корневой части

Контроль

0

13±1

9,6±0,4

5,9±0,2

Опыт

0,08

17±2

11,5±0,4

6,9±0,3

Из таблицы 3 видно, что препарат «Комбошок» оказывает влияние на ростовые характеристики гречихи посевной. Средние длины наземной и корневой частей растений, выращенных с добавлением препарата, больше, чем в контроле.

Результаты расчета стимулирующего эффекта препарата «Комбошок» представлены в таблице 4.
Таблица 4 − Оценка стимулирующего эффекта препарата
«Комбошок» на гречиху посевную

Образец

Оценка стимулирующего эффекта, %

по всхожести

по длине наземной части

по длине корневой части

Контроль

−

−

−

Опыт

23,5±0,4

16,5±0,2

14,5±0,1

Заключение. Проанализировав данные, представленные в таблицах, можно сделать вывод, что внесение препарата «Комбошок» способствует стимуляции роста и развития гречихи посевной.

Работа выполнена в рамках темы ГБ 15-035 «Структурно-функциональный анализ и выделение рутина из отечественного растительного сырья».

УДК 582.688.3(043.3)

Cтуд. Н. В. Валовень, П. А. Буглак, магистрант В. Ю. Тумаш

Науч. рук. доц. Е. А. Флюрик

(кафедра биотехнологии и биоэкологии, БГТУ)

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПОЛИФЕНОЛЬНОГО СОСТАВА ГОЛУБИКИ

УЗКОЛИСТНОЙ (VACCINIUM ANGUSTIFOLIUM AIT.)

Введение. Природные биологические системы привлекательны для исследователя разнообразием биологически активных веществ. Именно в таких системах соединения находятся в тех формах, которые характеризуются максимальной эффективностью действия на организм. Особое внимание в настоящее время уделяется вопросам поиска природных антиоксидантов. К природным антиоксидантам можно отнести полифенольные вещества. В природе растительных объектов с высоким содержанием этих метаболитов (до 30 %) очень много, причем следует подчеркнуть, что выделение индивидуальных веществ для практических целей не всегда обязательно [1].

Особый интерес в качестве сырья для получения полифенольных веществ вызывают дикорастущие деревья и кустарники. Среди таких растений, произрастающих на территории Республики Беларусь можно выделить брусничатые, в частности голубику узколистную.

Основная часть. Целью исследования было определение полифенольного состава форм листьев, ягод и веток голубики. Объектом исследования являлись листья и ветки под условными цифровыми обозначениями 3, 12, 13, 20 и 24, а также ягоды – 3, 4, 6, 13 и 23, культивируемые на площади выработанного торфяного месторождения «Долбенишки» в ГЛХУ «Поставский лесхоз» (Шарковщинский район Витебской области).

На первом этапе определили содержание дубильных веществ в исследуемых образцах, с помощью перманганатометрического метода Левенталя в модификации А.Л. Курсанова [2]. Данные приведены в таблице 1.
Таблица 1. – Содержание дубильных веществ в листьях, ягодах
и ветках

Объект	Содержание, мг
Листья голубики	17,67
Ягоды голубики	6,88
Ветки голубики	6,88

Следующим этапом было получение спиртовых экстрактов образцов. Для получения экстрактов листьев был использован метод повторной спиртовой экстракции. Экстракты 5 сортов голубики были поэтапно очищены от хлорофилла, стиролов, дубильных веществ. Для получения экстрактов ягод был использован метод трехкратной исчерпывающей экстракции. Получение экстрактов веток голубики проводили в два этапа в экстракторе Сокслета с использованием экстрагентов гексана и этилового спирта. Были проведены качественные реакции на флавоноиды и с помощью метода ТСХ эти вещества были идентифицированы в каждом из изучаемых образцов (таблица 2).

Далее с помощью колоночной хроматографии провели разделение образцов на отдельные фракции. Условия проведения хроматографии: наполнитель Sefadex LH-60, метод заполнения колонки – «мокрый», длина колонки – 300 мм, диаметр колонки – 10 мм, элюи-

Таблица 2 – Качественный полифенольный состав листьев форм
голубики

Флавоноиды	Значение Rf	Формы листьев голубики
Флавоноиды	Значение Rf	3	12	13	20	24
Рутин	0,61	х	х	х	х	х
Глюкуронид кверцетина	0,39	х	х	х	х	х
Ксилозид кверцетина	0,65		х	х		х
Рамнозид кверцетина	0,74		х
5-ОСН3-кверцетин	0,42				х	х
Кверцетин	0,84		х			х
		Формы веток голубики
		3	12	13	20	24
Рамнозид кверцетина	0,74		х		х
3-OCH3-замещенный кверцетин	0,92	х
Рутин	0,61	х	х	х	х	х
Кверцетин	0,84	х		х	х	х
		Формы ягод голубики
		3	4	6	13	23
5-OCH3-замещенный кверцетин	0,42	х	х	х	х	х
Арабинозид кверцетина	0,70	х		х
3-OCH3-замещенный кверцетин	0,92			х
Рутин	0,61	х	х	х	х	х
Кверцетин	0,84	х	х	х	х	х

рование проводилось 50% этиловым спиртом. Были записаны спектры полученных фракций и проведен анализ содержания полифенольных веществ в каждой из них.

Вывод. Результаты исследования свидетельствуют о высокой неоднородности качественного полифенольного состава форм листьев, ягод и веток голубики узколистной. Общими для всех форм является наличие таких флавоноидов, как рутин и кверцетин. Листья голубики характеризуются большим содержанием дубильных веществ. Ягоды голубики содержат в своем составе антоцианы. Ягоды и листья голубики содержат в своем составе оксикоричные кислоты.

ЛИТЕРАТУРА

1. Корулькин, Д.Ю. Природные флавоноиды / Д.Ю. Корулькин, Ж.А. Абилов, Р.А. Музычкина, Г.А. Толстиков; Рос. акад. наук, Сиб. отд., Новосиб. ин-т органической химии. – Новосибирск: Академическое изд-во «Тео», 2007. – 232 с.

2. Мазнев, Н.И. Энциклопедия лекарственных растений / Н.И. Мазнев. – 3-е изд. – М. : Мартин, 2004. – 496 с.

УДК 556.01+628.357.4

Студ. П. В. Вентис, магистрант В. Н. Клинцевич

Науч. рук. доц. Е. А. Флюрик

(кафедра биотехнологии и биоэкологии, БГТУ)

Оптимизация процесса получения настойки
гречихи посевной

Введение. Настойки представляют собой извлечения из лекарственного растительного сырья и предназначены, главным образом, для приема внутрь. В отличие от отваров, они являются стойкой лекарственной формой и могут сохраняться длительное время. В основе получения настоек лежат процессы экстрагирования растительного сырья соответствующими эктрагентами.

Оптимизация процесса получения настоек необходима для максимального извлечения биологически активных веществ (БАВ) из растительного сырья.

Для достижения максимального выхода БАВ осуществляли подбор экстрагента. Влияние экстрагента на эффективность экстрагирования оценивали по содержанию в готовом продукте основных БАВ, которые в основном представлены флавоноидами.

Основная часть. В качестве экстрагентов были использованы этиловый спирт различных концентраций от 30 до 90% и вода с высаливателем (NaCl). В качестве сырья для получения настойки использовали гречиху посевную. Использование гречихи посевной в качестве растительного сырья обусловлено высоким содержанием флаваноидов, таких как рутин, изокверцитин и кверцитин.

Экстракцию проводили в течении семи дней. Соотношение сырье:экстрагент – 1:5. Полученные экстракты очистили от неполярных соединений (хлорофилла, эфирных, жирных масел) хлороформом. Затем 5% раствором желатина осаждали дубильные вещества. Полученные экстракты исследовали различными физико-химических методами. Например, спектры поглощения экстрактов до и после удаления дубильных веществ представлены на рис. 1 а и б.

Затем была проведена тонкослойная хроматография (ТСХ) экстрактов (рис. 2). В качестве элюента была выбрана смесь бутиловый спирт:уксусная кислота:вода в соотношении 4:1:5.

Результаты спектрофотометрии и ТСХ приведены в таблице.

1 – экстракция 90% этиловым спиртом; 2 – экстракция 70% этиловым спиртом; 3 – экстракция 30% этиловым спиртом; 4 – экстракция водой с высаливателем (NaCl)

жүктеу/скачать 6.54 Mb.

Достарыңызбен бөлісу:

1 ... 13 14 15 16 17 18 19 20 21