Для определения гемоглобина в пробирку гемометра Сали наливают 0,1 N НС1 до нижней метки. Затем набирают кровь в капиллярную пипетку до метки «20», что соответствует 20 мкл, вытирают кончик, погрузив его в раствор соляной кислоты, осторожно выпускают кровь на дно пробирки. Пипетку 2-3 раза промывают тем же раствором. Смесь оставляют стоять 2-3 мин.; образующийся солянокислый гематин имеет коричнево-желтую окраску. Затем в пробирку по каплям добавляют дистиллированную воду, периодически помешивая стеклянной палочкой, до выравнивания интенсивности окраски смеси с окраской стандартных растворов в боковых пробирках. Определяют концентрацию гемоглобина в г % и процентах по Сали. 100% по Сали соответствует 16,67 г% гемоглобина..
Расчет цветного показателя производят по формуле:
содержание гемоглобина (в процентах по Сали) / удвоенные две цифры числа эритроцитов
(в мкл)
Для изучения мазка крови его высушивают на воздухе, фиксируют в смеси спирта и эфира в течение 3 мин, красят по Романовскому 20-25 мин, промывают водой, просушивают фильтровальной бумагой. Препарат рассматривают с иммерсионной системой (об. X 90), обрашая внимание на форму, размеры эритроцитов, появление регенераторных форм (нормобласты, по-лихроматофильные эритроциты).
Для подсчета ретикулоцитов на предметном стекле с заранее нанесенной и высушенной краской бриллианткрезилблау делают мазок крови и препарат тотчас же помещают во влажную камеру на S-6 мин. Затем мазок высушивают на воздухе. При этом эритроциты окрашиваются в зеленоватый цвет, в ретикулоцитах выявляется сетчато-нитчатая субстанция. Под микроскопом с иммерсионной системой, при ограничении поля зрения (в окуляр вкладывают бумажный диск с небольшим окошком) осторожно передвигая мазок, сосчитывают 1000 клеток и определяют количество приходящихся на них ретикулоцитов (в процентах).
Для определения гематокрита кровь смешивают с антикоагулянтом (2 мг щавелевокислого калия на 1 мл крови). Специальный градуированный капилляр заполняют исследуемой кровью, помешают в рамки, которые укрепляют на центрифуге и включают ее на 10 мин при 8000 об/ мин. После окончания центрифугирования определяют высоту столбика эритроцитарной массы, выражают ее в процентах по отношению к длине капилляра, которая принимается за 100%. Показатель гематокрита характеризует соотношение эритроцитарной массы и плазмы крови.
Для определения осмотической резистентности эритроцитов у опытного и контрольного животных берут по 1,5 мл крови и помещают в пробирку, содержащую 2-3 капли гепарина. Подготавливают 2 штатива с 6 центрифужными пробирками, содержащими по 5 мл раствора хлорида натрия различной концентрации: 1-0,85%: 2-0,50%: 3-0,45%: 4-0,40%: 5-0,35%: 6-0,30%. Затем с помощью пипетки от гемометра Сали в каждую пробирку вносят по 0,2 мл исследуемой крови. Осторожным встряхиванием пробирки достигают равномерной взвеси. Через 30 минут содержимое пробирок центрифугируют при 2000 об/мин течение 5 минут. Определяют минимальную резистентность эритроцитов по пробирке с самой высокой концентрацией хлорида натрия, в
Достарыңызбен бөлісу: |