Ресвератрол на основе комбинаторных стратегий борьбы с раковыми заболеваниями
Proto-oncogenic isoform A2 of eukaryotic translation elongation factor eEF1 is a target of miR-663 and miR-744
жүктеу/скачать 2.08 Mb.
|
- Бұл бет үшін навигация:
- METHODS
- RESULTS
- CONCLUSION
- In vitro and in vivo evaluation of the antitumor efficiency of resveratrol against lung cancer.
Proto-oncogenic isoform A2 of eukaryotic translation elongation factor eEF1 is a target of miR-663 and miR-744.Vislovukh A1, Kratassiouk G, Porto E, Gralievska N, Beldiman C, Pinna G, El'skaya A, Harel-Bellan A, Negrutskii B, Groisman I.
Eukaryotic translation elongation factor 1A2 (eEF1A2) is a known proto-oncogene. We proposed that stimulation of the eEF1A2 expression in cancer tissues is caused by the loss of miRNA-mediated control. METHODS:Impact of miRNAs on eEF1A2 at the mRNA and protein levels was examined by qPCR and western blot, respectively. Dual-luciferase assay was applied to examine the influence of miRNAs on 3'-UTR of EEF1A2. To detect miRNA-binding sites, mutations into the 3'-UTR of EEF1A2 mRNA were introduced by the overlap extension PCR. RESULTS:miR-663 and miR-744 inhibited the expression of luciferase gene attached to the 3'-UTR of EEF1A2 up to 20% and 50%, respectively. In MCF7 cells, overexpression of miR-663 and miR-744 reduced the EEF1A2 mRNA level by 30% and 50%. Analogous effects were also observed at the eEF1A2 protein level. In resveratrol-treated MCF7 cells the upregulation of mir-663 and mir-744 was accompanied by downregulation of EEF1A2 mRNA. Both miRNAs were able to inhibit the proliferation of MCF7 cells. CONCLUSION:miR-663 and miR-744 mediate inhibition of the proto-oncogene eEF1A2 expression that results in retardation of the MCF7 cancer cells proliferation. Antitumour effect of resveratrol may include stimulation of the miR-663 and miR-744 expression. Прото-онкогенные изоформы A2 эукариотических перевод удлинение фактор eEF1 цель мир-663 " и " мир-744. Эукариотических перевод удлинение фактор 1А2 (eEF1A2) - известный прото-онкоген. Мы предложили, что стимуляция eEF1A2 выражение в раковых тканях, вызванных утратой Мирна-опосредованное управление. МЕТОДЫ:Влияние микро-РНК на eEF1A2 на мРНК и белка уровнях исследовали методом ПЦР и western blot, соответственно. Dual-люциферазы анализа был применен для исследования влияния микро-РНК на 3'-UTR из EEF1A2. Для обнаружения Мирна-сайтов связывания, мутации в 3'-UTR из EEF1A2 мРНК были введены путем перекрытия расширением PCR. РЕЗУЛЬТАТЫ:мир-663 " и " мир-744 ингибирует экспрессию гена люциферазы приписаны к 3'-UTR из EEF1A2 до 20% и 50%, соответственно. В MCF7 клеток, гиперэкспрессия мир-663 " и " мир-744 сократили EEF1A2 мРНК уровне 30% и 50%. Аналогичные эффекты наблюдались также на eEF1A2 уровне белка. В ресвератрол-лечение MCF7 клеток регуляция мир-663 " и " мир-744 сопровождалось подавление EEF1A2 мРНК. Как микро-РНК были способны ингибировать пролиферацию MCF7 клеток. ВЫВОД:мир-663 " и " мир-744 посредником ингибирование прото-онкоген eEF1A2 выражение, что приводит к замедлению MCF7 пролиферации раковых клеток. Противоопухолевый эффект ресвератрол может включать стимулирование мир-663 " и " мир-744 выражение. sian Pac J Cancer Prev. 2013;14(3):1703-6. In vitro and in vivo evaluation of the antitumor efficiency of resveratrol against lung cancer.Yin HT1, Tian QZ, Guan L, Zhou Y, Huang XE, Zhang H.
Lung cancer remains a deadly disease with unsatisfactory overall survival. Resveratrol (Res) has the potential to inhibit growth of several types of cancer such as prostate and colorectal examples. In the current study, we evaluated in vitro and in vivo anticancer efficiency of Res in a xenograft model with A549 cells. Cell inhibition effects of Res were measured by MTT assay. Apoptotis of A549 cells was assessed with reference to caspase-3 activity and growth curves of tumor volume and bodyweight of the mice were measured every two days. In vitro cytotoxicity evaluation indicated Res to exert dose-dependent cell inhibition effects against A549 cells with activation of caspase-3. In vivo evaluation showed Res to effectively inhibit the growth of lung cancer in a dose- dependent manner in nude mice. Therefore, we believe that Res might be a promising phytomedicine for cancer therapy and further efforts are needed to explore this potential therapeutic strategy. In vitro и in vivo оценка противоопухолевой эффективности ресвератрол против рака легких. Рак легких остается смертельно опасным заболеванием с неудовлетворительным общего выживания. Ресвератрол (Res) имеет потенциал, чтобы подавлять рост некоторых видов рака, включая рак предстательной железы и колоректального примеры. В текущей работе мы исследовали in vitro и in vivo противоопухолевой эффективности ВИЭ в ксенотрансплантат модель с клеток а549. Сотовый угнетение эффектов Res были измерены с помощью МТТ-теста. Apoptotis из клеток а549 был оценен с учетом каспазы-3 деятельности и кривых роста объема опухоли и живая масса мышей измеряли каждые два дня. In vitro цитотоксичность оценки свидетельствуют Res оказывать дозозависимое торможение клеток эффекты в отношении клеток а549 с активацией каспазы-3. In vivo оценка показала, Res, чтобы эффективно ингибируют рост рака легких в дозозависимым в ню мышей. Поэтому мы считаем, что Res могут быть перспективными фитопрепарата по лечению рака, и необходимы дальнейшие усилия, чтобы исследовать этот потенциал терапевтической стратегии. Mol Biol Rep. 2013 Aug;40(8):5013-26. doi: 10.1007/s11033-013-2602-7. Epub 2013 May 11. Nutlin-3a, an MDM2 antagonist and p53 activator, helps to preserve the replicative potential of cancer cells treated with a genotoxic dose of resveratrol.Zajkowicz A1, Krześniak M, Matuszczyk I, Głowala-Kosińska M, Butkiewicz D, Rusin M.
Resveratrol is a natural compound that has been intensely studied due to its role in cancer prevention and potential as an anti-cancer therapy. Its effects include induction of apoptosis and senescence-like growth inhibition. Here, we report that two cancer cell lines (U-2 OS and A549) differ significantly in their molecular responses to resveratrol. Specifically, in U-2 OS cells, the activation of the p53 pathway is attenuated when compared to the activation in A549 cells. This attenuation is accompanied by a point mutation (458: CGA→TGA) in the PPM1D gene and overexpression of the encoded protein, which is a negative regulator of p53. Experimentally induced knockdown of PPM1D in U-2 OS cells resulted in slightly increased activation of the p53 pathway, most clearly visible as stronger phosphorylation of p53 Ser37. When treated with nutlin-3a, a non-genotoxic activator of p53, U-2 OS and A549 cells both responded with substantial activation of the p53 pathway. Nutlin-3a improved the clonogenic survival of both cell lines treated with resveratrol. This improvement was associated with lower activation of DNA-damage signaling (phosphorylation of ATM, CHK2, and histone H2AX) and higher accumulation of cells in the G1 phase of the cell cycle. Thus, the hyperactivation of p53 by nutlin-3a helps to preserve the replicative potential of cells exposed to resveratrol. Nutlin-3а, MDM2 и антагонист р53 активатор, помогает сохранить репликативной потенциал раковых клеток, обработанных генотоксический дозы ресвератрола. Ресвератрол-это природное соединение, которое интенсивно изучал из-за ее роль в профилактике рака и потенциал противоопухолевой терапии. Его последствия включают в себя индукцию апоптоза и старения-как торможение роста. Здесь, мы сообщаем о том, что двух клеточных линий рака (U-2, ОС и а549) существенно различаются в молекулярной ответы на ресвератрол. В частности, в U-2 ОС клеток, активация p53 пути ослабляется при сравнении активации в-клеток а549. Это затухание сопровождается точечных мутаций (458: CGA→TGA) в PPM1D гиперэкспрессия гена и кодируемого протеина, что является отрицательным регулятор р53. Экспериментально вызванных сногсшибательность PPM1D в U-2 ОС клеток привело к небольшому увеличению активация p53 путь, наиболее отчетливо видны, как все сильнее фосфорилирования белка p53 Ser37. При лечении nutlin-3а, Курение на всей территории генотоксического активатор р53, U-2, ОС и клеток а549 так ответили с существенной активизации р53 пути. Nutlin-3a улучшили клоногенным выживание обеих клеточных линий, получавших ресвератрол. Это улучшение связано с меньшими активация ДНК-повреждение сигнализации (фосфорилирование ATM, CHK2, и гистонов H2AX) и выше накопление клеток в фазе G1 клеточного цикла. Таким образом, гиперактивация р53 по nutlin-3a помогает сохранить репликативной потенциал клеток, облученных ресвератрол. Prostate. 2013 Aug;73(11):1135-46. doi: 10.1002/pros.22657. Epub 2013 May 8. жүктеу/скачать 2.08 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|