Биохимия растений

46 
Материалы и оборудование: гороховая мука, 10%-ный раствор сульфата 
аммония, крепкая соляная кислота, колба, воронки, пробирки, фильтровальная 
бумага, сухая поваренная соль, водяная баня. 
РАБОТА 10 
Цветные реакции на белки 
Наличие специфических связей и химических группировок, со-
держащихся в аминокислотных радикалах полипептидной цепи бел-
ка, определяют характерные цветные реакции. Реакционная способ-
ность и интенсивность окраски образующихся продуктов указывает 
на особенности химической структуры веществ и их качественное 
содержание. На основе цветных реакций разработаны и широко при-
меняются методы количественного и качественного анализа белко-
вых веществ. 
Цель работы: изучить особенности белков и их физико-
химических свойств. 
Объект исследования: гороховая мука. 
Ход работы. Приготовить вытяжку глобулина (см. работу № 9). 
I. Биуретовая реакция. Реакция обусловлена наличием в моле-
куле белка пептидных связей (-СО-NН-).
Налить в пробирку 1 мл вытяжки белка, добавить 2 мл 20%-го 
раствора NaOH и взболтать. Затем прибавить 4-5 капель слабого рас-
твора CuSO
4
. Образующийся осадок гидрата окиси меди в присут-
ствии белка окрасит раствор в сиренево-фиолетовый цвет. 
II. Ксантопротеиновая реакция. Она обусловлена образованием 
нитросоединений ароматическими и некоторыми гетероциклически-
ми группами белка, указывает на присутствие в молекуле полипепти-
да ароматических аминокислот – фенилаланина, тирозина, триптофа-
на. 

47 
В чистую пробирку налить 2 мл вытяжки белка и 0,5 мл крепкой 
азотной кислоты, и нагреть до кипения. При этом белок свернется и 
окрасится в желтый цвет. Раствор остудить и добавить около 1 мл 
аммиака. В результате желтый цвет перейдет в оранжевый. 
III. Миллонова реакция. Она является качественной реакцией на 
белки, содержащие фенольный радикал, протекает в присутствии ре-
актива Милона. 
В чистую пробирку налить 2 мл раствора белка и добавить 1 мл 
азотнортутного реактива Милона. При этом происходит денатурация 
белка и выпадение его в осадок. Затем нагреть пробирку на водяной 
бане до 50
0
С. В результате осадок окрасится в мясо-красный цвет. 
IV.Реакция с уксусно-кислым свинцом. Она указывает на наличие 
в белковой молекуле цистеина и цистина, содержащих атомы серы. 
В чистую пробирку налить 1 мл раствора белка и добавить 
двойной объем гидроксида натрия, перемешать и прокипятить 2-3 
минуты. Затем налить 0,1-0,2 мл раствора уксусно-кислого свинца и 
продолжить нагревание до появления черного осадка. 

жүктеу/скачать 1.32 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: