Химия растительного сырья

жүктеу/скачать 9.11 Mb.

бет	37/63
Дата	11.06.2016
өлшемі	9.11 Mb.
	#128250

1 ... 33 34 35 36 37 38 39 40 ... 63

Список литературы

Семенов А.А. Очерк химии природных соединений. Новосибирск, 2000.
Садыков А.С., Асланов Х.А., Кушмурадов Ю.К. Алкалоиды хинолизидинового ряда. Химия, стереохимия, биогенез. М., 1975.
Абдувахабов А.А., Тлегенов Р.Т., Хаитбаев Х.Х., Вайзбург Г.И. и др. // ХПС. 1990. №1. С. 75–80.
Галин Ф.З., Карцев В.Г., Флехтер О.Б., Гиниятуллина Г.В., Толстиков Г.А. // ХПС. 2004. №6. С. 467–470.
Дикусар Е.А., Козлов Н.Г., Поткин В.И., Зеленковский В.М. // ЖОХ. 2006. Т. 76. Вып. 1. С. 87–94.
Дикусар Е.А., Козлов Н.Г., Жуковская Н.А., Поткин В.И. и др. // ЖОрХ. 2006. Т. 42. Вып. 2. С. 223–230.
Crow W.D. // Austral. J. Chem. 1958. V. 11 №2. P. 366–371.
Shmidt M.W., Baldridge K.K., Boatz J.A., Elbert S.T. a etc. // J. Comput. Chem. 1993. V. 14. №7. P. 1347–1365.

Поступило в редакцию 18 сентября 2007 г.

После переработки 29 августа 2008 г.

УДК 5547.56:547.972.2

Компонентный состав фракции Filipendula ulmaria (L.) Maxim. с высокой антиоксидантной активностью

© Е.Ю. Авдеева, Е.А. Краснов^{^*}, И.В. Шилова

Сибирский государственный медицинский университет, ул. Московский тракт, 2, Томск, 634050 (Россия) E-mail: elenaavdeev@yandex.ru

Приведены данные о химическом составе фракции лабазника вязолистного (Filipendula ulmaria (L.) Maxim.), обладающей высокой антиоксидантной активностью. Из фракции выделены анисовая, олеаноловая и урсоловая кислоты; методом хромато-масс-спектрометрии идентифицированы 14 веществ, представленные алифатическими кетонами, ароматическими карбоновыми кислотами и их производными.

Ключевые слова: Filipendula ulmaria, анисовая кислота, олеаноловая кислота, урсоловая кислота, алифатические кетоны, ароматические карбоновые кислоты, ГЖХ-МС, антиоксидантная активность.

Введение

В последние два десятилетия установлено важное значение окислительного стресса в этиологии и патогенезе различных заболеваний: атеросклероза, диабета, рака, гипертензии, неврозов, воспалительных процессов [1–3]. Применение природных антиоксидантов показало ряд их преимуществ в лечении и профилактике свободнорадикальных патологий. Для большинства из них характерно эффективное воздействие на ведущие факторы повреждения, отсутствие побочных эффектов и низкая токсичность [3]. Поэтому весьма актуальным является поиск высокоактивных природных антиоксидантов.

Значительные перспективы в этом отношении имеет лабазник вязолистный Filipendula ulmaria (L.) Maxim., сем. Rosaceae – многолетнее растение, с широким ареалом произрастания в европейской части России, Западной и Восточной Сибири [4].

Лабазник вязолистный обладает разнообразным составом биологически активных веществ, представленным в основном фенольными соединениями [5]. Эфирное масло цветков растения содержит салициловый альдегид, 4-метоксибензальдегид, метилсалицилат, фенетиловый и бензиловый спирты [6], цинеол и эукарвон [7]. Из цветков F. ulmaria H.Thieme были выделены три фенолгликозида: изосалицин, спиреин и монотропитин [8,9]. Методом ВЭЖХ установлено содержание в надземной части F. ulmaria восьми фенолокислот, из них преобладали галловая, п-кумаровая и ванилиновая кислоты [10], а также 5 гликозидов кверцетина (рутин, гиперозид, авикулярин, спиреозид, кверцетин-3-глюкуронид) и кемпферол-4^/-глюкозида [11].

Из надземной части растения нами выделен ряд фенольных компонентов: салициловая, эллаговая, галловая кислоты, этилгаллат, кверцетин, авикулярин, рутин, а также изокверцитрин и 4^/-О-β-D-галактопиранозид кверцетина, ранее не обнаруженные в растениях рода лабазник [12, 13].

Установлено, что выраженной антиоксидантной активностью (АОА) обладают экстракты F. ulmaria на 70 и 95% этаноле [14], а наибольшую активность проявляет хлороформная фракция из экстракта на 70% этаноле [15]. Целью настоящей работы явилось изучение химического состава хлороформной фракции F. ulmaria.

Экспериментальная часть

Сырьем для исследования служила надземная часть F. ulmaria, собранная в фазу цветения в июле 2006 г. (окр. п. Тимирязево, Томской области). 600 г воздушно-сухого сырья (размер частиц 2 мм, влажность 7,6%) экстрагировали 70%-ным водным этанолом трижды в соотношении 1 : 7 при температуре 80 ºС на водяной бане с обратным холодильником в течение 60 мин. Объединенные извлечения фильтровали и этанол удаляли под вакуумом при температуре не выше 60 ºС. Водный остаток многократно обрабатывали в делительной воронке хлороформом в соотношении 2 : 1. Полученные хлороформные извлечения объединяли, высушивали безводным сульфатом натрия и упаривали под вакуумом при температуре 40 ºС. После удаления растворителя получили 0,42 г (выход 0,07% от воздушно-сухого сырья) сухой хлороформной фракции.

Фракцию разделяли методом флэш-хроматографии на силикагеле (Lachema, 5/40); элюенты: гексан, гексан – хлороформ (8 : 2; 6 : 4; 4 : 6; 2 : 8), хлороформ, с последующей колоночной рехроматографией на силикагеле (Lachema, 40/100); элюенты: гексан, гексан – этилацетат с увеличением градиента последнего, этилацетат.

В результате выделили 20 мг кристаллов кремового цвета, не растворимых в гексане и воде, легко растворимых в хлороформе и этаноле, с т.пл. 177–178 °С. На ТСХ («Silufol UV-254»; R_f=0,56(хлороформ – метанол 25 : 3 и 0,66 (хлороформ – метанол – вода 70 : 12 : 1) с раствором бромтимолового-синего с последующем выдерживанием в парах аммиака проявляется в виде желтого пятна на синем фоне (реакция характеризует кислотные свойства). λ_max 252 нм (MeOH). ИК-спектр (КВr), , см^–1: 3443, 2916, 2965, 2848, 1603, 1463. По данным масс-спектра соединение имеет формулу С₈Н₈О₃, М⁺152. В ПМР-спектре (DMSO-d₆) вещества, записанном на спектрометре Bruker DRX-500 (рабочая частота 500, 13 МГц), наблюдались сигналы, δ, м.д.: 3,86 (с, 3Н), 6,94 (с, Н-3, Н-5), 8,05 (с Н-2, Н-6). На основании спектральных данных полученное вещество идентифицировано с анисовой кислотой (4-метоксибензойная кислота).

При дальнейшем элюировании выделены43 мг олеаноловой и 8 мг урсоловой кислоты, идентичность которых установлена хроматографическим сравнением с достоверными образцами [12] и 115 мг фракции, представляющей собой густую жидкость желтого цвета с медовым запахом, легко растворимую в хлороформе.

Компонентный состав фракции изучали методом ГЖХ-масс-спектрометрии на приборе Trace DSQ (Thermoelectron corp., США), программное обеспечение Xcalibur 1.4. Условия анализа: колонка BPX5, 25 м; Т_исп= 280 °С; V_г/н= 1 мл/мин; растворитель – хлороформ; Т_{термостата} от 40 до 300 °С; скорость нагрева 10°/мин; задержка хроматограммы 5 мин; сканирование 33–650 а.е.м. (рис.). В результате установили, что указанная фракция представлена в основном алифатическими кетонами, а также ароматическими карбоновыми кислотами и их производными: гексаналь (0,23%, t_r 8,12 мин), бензойная кислота (0,56%, t_r 14,78 мин), салициловая кислота (2,5%, t_r 16,83 мин), 4-метоксибензойная кислота (0,63%, t_r 18,78 мин), 4,4,7а-триметил-5,6,7,7а-тетрагидро-2(4Н)-бензофуранон (1,3%, t_r 20,69 мин), диэтилфталат (16,32%, 20,86 t_r мин), 6,10,14-триметил-2-пентадеканон (1,55%, 23,39 t_r мин), бис-(2-метилпропил)-фталевая кислота (0,52%, t_r 23,85 мин), 2-гептадеканон (0,97%, t_r 24,06 мин), метиловый эфир 14-метилпентадекановой кислоты (0,97%, t_r 24,23 мин), бутилоктиловый эфир фталевой кислоты (7,67%, t_r 24,88 мин), 2-нонадеканон (1,43%, t_r 26,05 мин), (4-метоксифенил)метиловый эфир бензолуксусной кислоты (1,17%, t_r 26,36 мин), диизооктиловый эфир фталевой кислоты (64,22%, t_r 30,32 мин) (рис.).

Исследования АОА проводили на основе процесса электровосстановления кислорода (ЭВ О₂) [14]. В качестве фонового электролита использовали фосфатный буфер с рН 6,86. АОА определяли по относительному уменьшению тока ЭВ О₂в присутствии образца. В качестве препарата сравнения использовали аскорбиновую кислоту с концентрацией 0,01 г/мл. Полученные результаты показали, что по силе антиоксидантной активности хлороформная фракция приближается к аскорбиновой кислоте (кинетический критерий антиоксидантной активности 1,040±0,038 и 1,150±0,053 мкМ/л·мин соответственно).