Бекітілген клеткаларды зерттеу

Клеткалардың кұрлыстары мен касиеттері жайінданы мэліметтер негізінде
бекітілген материалдардан алынған. Егер клетканы зақымдасак, ол бір қатар өзгерістерге
ұшырайды, содан өлген клеткада автолитикалық ферменттер активтеніп, клетка
кұрылымының өзгерісіне əкеледі. Сонымен бекіткіштердің міндеті - бұл клетканы өлтіру,
клетка ішілік ферменттердің активтілігін жою, клеткалық компоненттердің жоюлуын
токтату жəне олардың кұрылымдары мен биохимиясы сақтау. Бірак осы талаптарға сай
химиялық бекіткіштер жок. Бекіткіш үшін жиі альдегидтер жəне олардың баска заттармен
қоспасын қолданады. Бекіткіш ретінде полисахаридтер мен нуклеин
қышқылдарды тұнбаға түсіретін, белоктарды денатурациялайтын спирттер қолданады.
Төрт оттекті осмийден тұратын (Os O4) бекіткіш, липидтерді жақсы сактайды.
Объекттерді бекіткеннен кейін қосымша өндеуге болады. Негізгі өндеудің бірі
клеткаларды бояу болып табылады. Əсіресе клеткаларды қосымша бояу көмегімен
бірнеше бөлшектерді анықтай алады. 
Цитофотометрия əдісі
Цитофотометрия əдісі арқылы цитохимиялық реакцияның салдарынан пайда
болған өнімдердің санын анықтауға болады. Оның негізінде химиялық заттардың белгілі
бір толқын ұзындығын кабылдау касиеттеріне байланысты сандық мөлшерін анықтауға
болады. Объектінің жарықты сініруі заттын концентрациясына пропорциянал
болатындығы анықталды. Аталмыш заттын жарықты қабылдау дарежесін бағалау арқылы
оның мелшерін болады. Мұндай зерттеулер үшін цитофотометр кұралы қолданылады,
оның объективінде жарық ағынының интесивтілігін тіркейтін өте сезімтал фотометр
орналаскан. Өлшенетін кұрылымның көлемін мен мелшерін біле тұра, аталмыш заттын
концентрациясы мен мазмұнын болады. Цитофотометрияның Фелген реакциясынан кейін
жасушадағы ДНК санын анықтау əдісі жиі қолданылады. Мұнда ДНК-ның өзі емес, ДНК
мазмұнына пропорционал фуксиннің қызыл түске боялған түрі фотометрленеді.
Стандартты түрмен жұтылудың көлемін салыстыра отырып, ДНКның граммдағы
санының дəл мағынасын табуға болады. 
Биохимиялық əдістермен салыстырғанда жасушадағы ДНК мөлшерін
цитофотометриямен дəлірек анықтаута мумкіндік туады. Сандық көрсеткішті жарық
кабылдайтын объектілермен жəне заттармен қатар, сандық бағаны жарық шығаратындар
да алады. Арнаулы белоктарды анықтау үшін флоуресценцияланған антиденелер
паидаланыған имуннохимиялық реактиялар қолнанылалды.

жүктеу/скачать 329.02 Kb.

Достарыңызбен бөлісу: