Сұраншиев Ж.Ә. «Ветеринарлық вирусология» пэоәК
жүктеу/скачать 4.8 Mb. Pdf көрінісі
|
| – –
– – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – – 2 5 Сау мал қан сарысуы 1:10 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + – – – – – – – – – – 7 – Физиологиялық ерітінді + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + – – – – – – – 7 – Ол үшін телімді қан сарысуы мен сау мал қан сарысуын бір сұйылтымда (1:10) дайындайды және үш қатарға сұйылтымы 10 есе көбейіп отыратын вирусты 0,5 мл-ден шыны түтіктерге үлестіреді. Вирустарды бейтараптау индексін (БИ) дұрыс есептеу үшін зерттеуге алынған вирустың ең соңғы сұйылтымы оның биологиялық титрінен артық болуы қажет. Мысалы, вирус титрі 10 -7 ТД 50 (тиімді доза) болса, онда зерттеуге вирусты 10 -8 сұйылтымына дейін алу керек. Бірінші қатардағы шыны түтікшелерге 1:10 сұйылтымындағы телімді қан сарысуын 0,5 мл, екінші қатардағыларға – сау мал қан сарысуларын (антиденелері жоқ) 0,5 мл, ал үшінші қатардағыларға – физиологиялық ерітіндіні 0,5 мл-ден қосады. Бірдей көлемде (1:1) үлестірілген қан сарысулары мен вирус қоспаларын жақсылап шайқағаннан кейін, бір-бірімен әрекеттесу үшін қажетті уақыт пен температурада ұстайды (вирустың түріне байланысты). Инкубация уақыты өткеннен кейін қан сарысуы мен түрлі сұйылтымдағы қоспаны жасуша өсінділері немесе басқа да вирусқа сезімтал жүйелері бар 4 шыны түтіктерге 10 - 8 сұйылтымнан бастап (10 -8 , 10 -7 , 10 -6 , 10 -5 ) 0,2 мл-ден қосады. Жасуша өсінділері бар шыны түтіктерді +37ºС термостатта 60-90 минут ұстағаннан кейін, оларға 1 мл-ге дейін қоректік орта қосып, күнделікті микроскопиялау арқылы термостатта ұстайды. Белгілі бір уақыт өткеннен кейін (5-12 тәулік) реакция нәтижесін оқиды. Бастапқыда вирустың титрін Рид және Менч әдісімен есептейді. Сау мал қан сарысуы бар түтіктермен салыстыра отыра, телімді қан сарысулары вирустардың титрін қандай деңгейге дейін төмендететіндігін бейтараптау индексі (БИ) деп атайды. Бейтараптау индексі келесі формуламен есептеледі: жүктеу/скачать 4.8 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|