Инструкция 10-15-21-2006 микробиологические методы выделения и идентификации возбудителей



бет10/10
Дата27.06.2016
өлшемі1.14 Mb.
#160828
түріИнструкция
1   2   3   4   5   6   7   8   9   10

+ ферментация с образованием кислоты; ++ ферментация с образованием кислоты и газа; - отсутствие ферментации; (+) замедленная ферментация.

Приложение 12

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации



возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»
Биовары S. flexneri 1-5, X-и Y-variant.


Биовар

Ферментация углеводов

мальтоза

арабиноза

сорбит

рамноза

1

+, (+)

+, (+)

+, (+)

+, (+)

2

+, (+)

+, (+)

+, (+)

-

3

+, (+)

-

+, (+)

+, (+)

4

+, (+)

-

-

-

5

+, (+)

-

+, (+)

-

6

+, (+)

+, (+)

-

-

7

+, (+)

+, (+)

-

+

8

-

+, (+)

+, (+)

+, (+)

9

-

-

+, (+)

+, (+)

10

-

+, (+)

+, (+)

-

11

-

-

+, (+)

-

12

-

+, (+)

-

-

13

-

+

-

+, (+)

14

-

-

-

+, (+)

15

-

-

-

-

+ ферментация с образованием кислоты; ++ ферментация с образованием кислоты и газа; - отсутствие ферментации; (+) замедленная ферментация.

Приложение 13

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации

возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»
Биовары S. boydii.


Биовар

Ферментация углеводов

сорбит

глицерин

ксилоза

дульцит

1

+

+

+

+

2

+

+

-

+

3

+

+

+

-

4

-

+

-

-

5

+

+

-

-

6

-

+

-

+

7

+

-

-

+

8

-

+

+

+

+ ферментация с образованием кислоты; - отсутствие ферментации.

Приложение 14

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации

возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»
Эталонные типовые колициногенные штаммы.


№ п/п

Наименование

штаммов


Регистрационный номер

Колициногенный номер

1

Sh. sonnei

100045



2

— ⁄⁄ —

100046



3

— ⁄⁄ —

100047

2

4

— ⁄⁄ —

100048

3

5

— ⁄⁄ —

100049



6

— ⁄⁄ —

100050

4

7

— ⁄⁄ —

100051

5

8

— ⁄⁄ —

100052

6

9

— ⁄⁄ —

100053

7

10

— ⁄⁄ —

100054

8

11

— ⁄⁄ —

100055

9

12

— ⁄⁄ —

100056

10

13

— ⁄⁄ —

100057

11

14

— ⁄⁄ —

100058

12

15

— ⁄⁄ —

100059

13

Приложение 15

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации



возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»
Сокращенная схема колициногенотипирования шигелл Зонне.


Колицино-генотипы

Индикаторные культуры

31

32

33

36

38

39

8218

40

43

44



+

+

+

+

-

-

+

-

-

+



+

+

+

+

-

+

+

-

-

+

2

-

+

+

-

-

+

-

-

-

+

3

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+



+

+

+

+

+

+

-

+

+

+

4

+

+

+

-

+

+

-

+

-

+

5

+

+

+

+

+

+

+

+

-

+

6

-

+

-

+

-

+

-

-

-

+

7

-

-

+

-

-

-

-

-

-

-

8

+

-

+

-

+

-

-

-

-

+

9

+

+

+

+

+

+

-

-

-

+

10

+

+

+

+

+

+

+

-

-

+

11

-

-

-

-

-

-

-

-

-

+

12

+

+

-

+

+

+

-

-

-

+

13

-

+

+

+

-

+

-

-

-

+

14

+

+

+

+

+

+

-

+

-

+

15

+

-

+

-

+

-

-

+

+

+

«О» (не колициногенный)

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

+ наличие зоны торможения роста индикаторного штамма;

- отсутствие зоны торможения роста индикаторного штамма;

Приложение 16

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации

возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»
Паспортные данные эталонных колициногенных штаммов из коллекции Фредерика


№ п/п

Наименование штамма

Тип продуцируемого колицина

1

E. coli Ca-7

V+m

2

E. coli Ca-18

B

3

E. coli Ca-23

D

4

E. freundi Ca-31

A

5

E. coli Ca-38

E+I

6

E. coli Ca-42

F

7

E. coli Ca-53

I

8

E. coli Ca-58

H

9

E. coli Ca-62

j+I

10

E. coli K-253

K

11

Sh. Boydii P1

S1

12

Sh. sonnei P9

S3+I

13

Sh. dispar P14

S5

14

Sh. dispar P15*

S4

15

E. coli Ca-46

G

* культуры Sh. dispar P15 на питательных средах при хранении образуют пигмент желтоватого цвета, интенсивность которого увеличивается до ярко-апельсинового цвета.


Приложение 17

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации

возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»


Паспортные данные индикаторных культур из коллекции Фредерика


№ п/п

Наименование штамма

Примечания

1

E. coli K-12, ROW

Чувствителен ко всем колицинам коллекции Фредерика

2

E. coli φ

Не чувствителен к S1 и S4

3

E. coli B

Не чувствителен к колицииам F, S1, S4 и S5

Приложение 18

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации

возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»


Основные биохимические свойства Е. сoli.


Текст или субстрат

Результат реакции

Текст или субстрат

Результат реакции

Цитрат Симонса

Мочевина


Малонат натрия

Сероводород

Фенилаланиндезаминаза

Ацетат натрия

Подвижность

Индол


Лизиндекарбоксилаза

Реакция с метиловым красным

Реакция Фогес-Проскауэра

Цитрат Кристенсена

Желатин

Орнитиндекарбоксилаза



-

-

-



-

-

+, (+)



+, -

+, -


Х
+

-

Х



-

Х


Аргининдегидролаза

Адонит


Арабиноза

Глюкоза (газ)

Дульцит

Инозит


Ксилоза

Лактоза


Манит

Мальтоза


Рамноза

Раффиноза

Сацилин

Сахароза


Сорбит

Х

-, +


Х

+, -


Х

-, +


Х

Х

+



Х

Х

Х



Х

Х

Х




+ положительная реакция через 18-24 ч у 90 % штаммов или более;

-отрицательная реакция в течение всего срока наблюдения у 90 % штаммов или более; +, (+) чаще положительная, реже замедленно положительная реакция у 90 % штаммов или более; +, - чаще положительная, реже отрицательная реакция у 90 % штаммов или более; Х различные варианты реакции; -,+ чаще отрицательная, реже положительная у 90 % штаммов или более.


Приложение 19

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации

возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»


Серовары Еscherichia сoli, наиболее часто вызывающие поражения у человека.

Поражения

Серогруппы

О-Ar

H-Ar

K-Ar

Кишечные

Энтеротоксигенные

О6, О8,О11, О20, О25, О27, О63, О78, О80, О85, О114, о115, О126, О128ас, О139, О148, О153, О159, О166, О167

Н4, Н7, Н9, Н11, Н12, Н19, Н20, Н21, Н28, Н40

_

Энтеропатогенные

О18, О26, О44, О55, О86, О111ab, О112, О114, О119, О125ас, О127, О128 ab, О142, О158

Н2, Н6, Н7, Н11, Н12, Н14, Н18

_


Энтероинвазивные

О28ас, О29, О112ас, О115, О124, О135, О136, О143, О144, О152, О146, О167

_


_


Энтерогеморрагические

О26, О111, О157

Н6, Н7, Н8, Н11

_

- - антиген отсутствует, либо не обнаружен.

Приложение 20

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации

возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»
Антигенно-диагностическая схема сероваров E. сoli, наиболее часто вызывающих кишечные инфекции.


п/п


ОК- группа

Н- антигены, определяющие серовары

1

2

3



4

5

6



7

8

9



10

11

12



13

14

15



16

17

18



19

20

21



22

23


О18ас:К77

О20:К84


О25:К11

О26:К60


О33:К

О44:К74


О55: К59

О75:К


О86а:К61

О112ас:К66

О111ab:К58

О114:К90


О119:К69

О124:К72


О125:К70

О126:К71


О127:К63

О128:К67**

О142:К86

О143:К


О144:К

О151:К-


«408»

1,4,7,8,10,12,16,26,30,32

9,10,19,25,26,34

6,12,30

2,6,7,8,9,10,11,12,14,16,18,19,27,30,32,33,46



2,6,7,10.11,21,25

4,12,18,32,34

1,2,4,6,7,8,10,11,12,19,21,25,27,32,33,34,39

9

2,6,7,8,9,10,11,12,18,21,26,27,34,47



Н-*

2,4,6,7,11,12,16,20,21,25.27.30,32,34,40, «635»

4,10,21,32,

1,2,4,5.6,8.9,11,18,25,27,32,39,40

2,16,19,30,32,38,12

2,4,6,7,10,11,12,15,19,21,25,30,32,40

2,5,7,9,10,11,12,19,20,21,25,27,29,30,33,34,45

1,4,5,6,9,11,19,21,26,27,33,40, «635»

2,6.7,8,9,10,11,12,16,19,21,27,35

6.18,38


12

4,Н-*


10,11

10,12


*неподвижные щтаммы (Н-) могут быть в каждой серогруппе и являются самостоятельным сероваром.

**Объединены обе разновидности-О128ab:К67 и О128ас:К67.


Приложение 21

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации

возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»


Биохимическая дифференциация Proteus, Providencia и Morganella morganii


Тест

Proteus

Morganella morganii

Providencia




mirabilis

myxo

faciens


penneri

vulgaris

alca

lifaciens



heim

bachae


rettgeri

rustigianii

stuartii

Образование индола

-

-

-

+

+

+

-

+

+

+

Реакция Фогес-Проскуэра

d

+

-

-

-

-

-

-

-

-

Цитрат (среда Симмонса)

d

+

-

[-]

-

+

-

+

[-]

+

Образование H2S

+

-

d

+

-

-

-

-

-

-

Гидролиз мочевины

+

+

+

+

+

-

-

+

-

d

Орнитиндекар

боксилаза



+

-

-

-

+

-

-

-

-

-

Гидролиз жела

тины


+

+

d

+

-

-

-

-

-

-

Образование газа из D-глюкозы

+

+

d

[+]

+

[+]

-

-

d

-

Образование кислоты из































D-адонитола

-

-

-

-

-

+

+

+

-

-

D-арабитола

-

-

-

-

-

-

+

+

-

-

Глицерола

d

+

d

d




[-]

-

d

-

d

Мио-изонитола

-

-

-

-

-

-

d

+

-

+

Мальтозы

-

+

+

+







d










D-маннозы

-

-

-

-

+

+

+

+

+

+

α-метил- D-

глюкозида



-

+

[+]

d

-

-

-

-

-

-

L-рамнозы

-

-

-

-

-

-

+




-

-

Сахарозы

[-]

+

+

+

-

[-]

-

[-]

d

d

Трегалозы

+

+

d

d

-

-

-

-

-




D-ксилозы

+

-

+

+

-

-

-

-

-

-

Дезоксирибонук

леаза


d

+

d

[+]

-

-

-

-

-

-

Липаза

+

+

d

[+]

-

-

-

-

-

-

Просветление среды с тирозином

+

-

+

+

+

+

+

+

+

+

Роение

+

+

d

+

-

-

-

-

-

-

«-» 0-10% - штаммов положительные;

[-] - 11-25% - штаммов положительные;

d - 25-75% - штаммов положительные;

[+] -76-89% - штаммов положительные;

«+» 90- 100% - штаммов положительные.

Приложение 22

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации

возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»
Сокращенная антигенно-диагностическая схема Proteus vulgaris, Proteus mirabilis.


О-антиген

(О-группа)



Н-антиген

Установлено

сероваров



О-антиген

(О-группа)



Н-антиген

Установлено

сероваров



1

1

2

26

2, 3, 6

3

2

1

1

27

2,3

2

3

1,2

3

28

1,3

2

4

1, 8, 16

3

29

13

1

5

1, 3

3

30

1, 2, 3, 4, 13, 15

6

6

1, 2, 3

3

31

1, 2

2

7

1, 3, 4

3

32

1, 3, 5

3

8

1

1

33

3

1

9

1, 2

2

34

6

1

10

1, 2, 3, 4, 5

5

35

2

1

11

1, 2, 3, 6

5

36

3, 7

2

12

1, 2

2

37

17

1

13

1, 2, 3, 4

4

38

1, 2

2

14

1, 3

2

39

18

1

15

1, 7

2

40

4

1

16

1, 9, 14

3

41

1, 2

2

17

1, 10

2

42

1

1

18

1

1

43

2

1

19

1, 3, 11

4

44

11, 19

2

20

1, 2

2

45

11

1

21

1

1

46

17

1

22

1

1

47

1

1

23

1, 2, 3, 12

5

48

1

1

24

1, 2, 3, 13

4

49

2

2

25

1

1










Приложение 23

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации

возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»

Дифференциация Providencia rettgeri на биовары



Субстрат

Биовары




1

2

3

4

Рамноза

Салицин


-

+


+

+


+

-


-

-


Приложение 24

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации

возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»


Дифференциация Providencia alcalifaciens и Providencia stuartii на биовары.

Субстрат

Providencia alcalifaciens

Providencia stuartii



биовары

биовары

1

2

3

4

5

6

Глюкоза (газ)

+

-

+

-

-

-

Адонит

+

+

-

-

-

+

Инозит

-

-

-

-

+

+

Приложение 25

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации

возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»


Основные дифференциальные признаки Vibrio parahaemolyticus и других галофилов

Наименование тестов

Vibrio parahaemolyticus

Vibrio alginolyticus

Vibrio angillarum

Подвижность

рост в пептонном бульоне

без NaCl

с 6% NaCl

с 8% NaCl

с 10% NaCl

Образование ацетилкарбинола

Ферментация:

сахарозы

арабинозы



+
-

+

+



-
-
-(+)

+(-)


+
-

+

+



+
+
+(-)

-(+)


+
-

+

-



-
+
+(-)

+


- отрицательная реакция; + положительная реакция; -, (+) чаще отрицательная реакция; (+), - чаще положительная реакция

Приложение 26

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации

возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»
Схема посева материала при исследовании на Bac. cereus.


Объект исследования




Разведение посевного материала

1х10

1х100

1х1000

1х10000

Кал

посевная доза в мл*

1,0

0,1

-

-

Рвотные массы

1,0

0,1

-

-

Промывные воды желудка

1,0

0,1

-

-

*При посеве 1,0 мл материал засевается по 0,3 мл на поверхность трех чашек Петри.
Приложение 27

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации

возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»


Тесты для идентификации Staphylococcus aureus


варианта



Плазмокоагулаза

Ферментация

маннита в

анаэробных

условиях


Принадлежность

штамма к виду Staphylococcus aureus



1.

+

-

Да

2.

+

+

Да

3.

-

-

Нет

4.

-

+

Да

Приложение 28

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации

возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»
Порядок нанесения фагов при фаготипировании стафилококков


29

52

52А

79

80





55

71

84

6

85

42Е

47

53

54

75

77

83А

42Д




81

187






Приложение 29

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации

возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»

Дифференциация энтерококков внутри вида



Виды

Резистен-тность к теллуриту калия

Энтерококковая дифференциально-диагностическая среда

Подвижность в 0,2% агаре

редукция ТТХ

гемолиз

протеолиз

S. faecalis

+

+

±

±

-

S. faecium

-

-

±

-

-

Подвижные энтерококки

+

+

±

-

+

- отрицательный результат; + положительный результат; ± данный признак у одних штаммов положителен у других отрицателен.

Приложение 30

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации

возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»

Типовой протокол постановки развернутой реакции нейтрализации






Исследуе

мый материал в мл



Антиботулинические сыворотки в мл

Физиологический раствор

тип А

тип В

тип С

тип Е

тип F

1 пробирка

2 пробирка

3 пробирка

4 пробирка

5 пробирка

6 пробирка




2,4

2,4


2,4

2,4


2,4

2,4


0,6

-

-



-

-

-



-

0,6


-

-

-



-

-

-

0,6



-

-

-



-

-

-



0,6

-

-



-

-

-



-

0,6


-

-

-

-



-

-

0,6 мл


Приложение 31

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации

возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»
Упрощенная классификация кампилобактеров

Приложение 32

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации

возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»
ПРОТОКОЛ ВЫДЕЛЕНИЯ CAMPYLOBACTER

ИЗ ФЕКАЛИЙ



Приложение 33

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации

возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»
Биохимическая характеристика основных видов Campylobacter,

выделенных из проб фекалий, воды и пищевых продуктов







C. jejuni

C.coli

C. lari

C.upsaliensis

тест KOH

+

+

+

+

тест с каталазой

+

+

+

W+

тест с оксидазой

+

+

+

+

гидролиз гиппурата

+

-

-

-

гидролиз индоксилацетата

+

+

-

+

«W+» - слабоположительная, учет результата проводят под микроскопом.

Приложение 34

К Инструкции 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации

возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»
ПРОТОКОЛ ВЫДЕЛЕНИЯ CAMPYLOBACTER

ИЗ ПРОДУКТОВ И ВОДЫ



ОГЛАВЛЕНИЕ


Инструкция 4.2. -2006

«Микробиологические методы выделения и идентификации возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях»




Глава 1 Общие положения……………………………………………..

Глава 2 Отбор, направление и подготовка проб для бактериологических исследований…………………………………………………...

Глава 3 Бактерии рода Salmonella…………………………………….

Глава 4 Бактерии рода Shigella………………………………………..

Глава 5 Бактерии рода Escherichia…………………………………….

Глава 6 Бактерии рода Proteus ………………………………………..

Глава 7 Vibrio parahaemolyticus ……………………………………….

Глава 8 Bacillus cereus ………………………………………………...

Глава 9 Staphylococcus aureus …………………………………………

Глава 10 Enterococcus ………………………………………………….

Глава 11 Clostridium botulinum ………………………………………..

Глава 12 Clostridium perfringens ………………………………………

Глава 13 Campylobacter ……………………………………………….

Глава 14 Серологическая диагностика заболеваний, вызываемых

энтеробактериями……………………………………………………...

Глава 15 Исследование объектов внешней среды (вода, смывы) …..

Глава 16 Ускоренные методы диагностики …………………………

Глава 17 Питательные среды и реактивы …………………………...

Приложение 1 Биохимические свойства бактерий рода Salmonella

Приложение 2 Дифференциальные характеристики видов и подвидов сальмонелл …………………………………………………………

Приложение 3 Сокращенная схема Кауфмана-Уайта 2001………..

Приложение 4 Дифференциация родов семейства Enterobacteriaceae

по биохимическим свойствам………………………………………..

Приложение 5 Биохимические свойства наиболее часто

встречающихся родов семейства Enterobacteriaceae…………….…..

Приложение 6 Биохимические свойства сальмонелл……………….

Приложение 7 Классификация бактерий рода Shigella …………….

Приложение 8 Биохимические свойства бактерий рода Shigella ….

Приложение 9 Биохимические свойства шигелл различных видов..

Приложение 10 Схема определения биоваров S. sonnei…………….

Приложение 11 Биовары S. flexneri 6 (S. newcastle) ………………..

Приложение 12 Биовары S. flexneri 1-5, X-и Y-variant …………….

Приложение 13 Биовары S. boydii ………………………………….

Приложение 14 Эталонные типовые колициногенные штаммы ….

Приложение 15 Сокращенная схема колициногенотипирования

шигелл Зонне ……………………………………………………………

Приложение 16 Паспортные данные эталонных колициногенных

штаммов из коллекции Фредерика …………………………………..

Приложение 17 Паспортные данные индикаторных культур из коллекции Фредерика ………………………………………………..

Приложение 18 Основные биохимические свойства Е. сoli ………..

Приложение 19 Серовары Еscherichia сoli, наиболее часто

вызывающие поражения у человека…………………………………

Приложение 20 Антигенно-диагностическая схема сероваров

E. сoli, наиболее часто вызывающих кишечные инфекции……….

Приложение 21 Биохимическая дифференциация Proteus,

Providencia и Morganella morganii …………………………………

Приложение 22 Сокращенная антигенно-диагностическая схема Proteus vulgaris, Proteus mirabilis.……………………………..

Приложение 23 Дифференциация Providencia rettgeri на биовары………………………………………………………………………...

Приложение 24 Дифференциация Providencia alcalifaciens и Providencia stuartii на биовары………………………………………………

Приложение 25 Основные дифференциальные признаки Vibrio

parahaemolyticus и других галлофилов……………………………

Приложение 26 Схема посева материала при исследовании

на Bac. сereus ……………………………………………………….

Приложение 27 Тесты для идентификации Staphylococcus aureus..

Приложение 28 Порядок нанесения фагов при фаготипировании…

стафилококков ………………………………………………………..

Приложение 29 Дифференциация энтерококков внутри вида …….

Приложение 30 Типовой протокол постановки развернутой

реакции нейтрализации ………………………………………………

Приложение 31 Протокол выделения Campylobacter из фекалий ….

Приложение 32 Протокол выделения Campylobacter

из продуктов и воды……………………………………………………

Приложение 33 Упрощенная классификация кампилобактеров…..

Приложение 34 Биохимическая характеристика основных

видов Campylobacter, выделенных из проб фекалий,

воды и пищевых продуктов…………………………………………



стр.





Достарыңызбен бөлісу:
1   2   3   4   5   6   7   8   9   10




©dereksiz.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет