Инструкция по применению учреждения-разработчики: гу «Республиканский научно-практический центр эпидемиологии и микробиологии»


 Лабораторная диагностика инфекций, передаваемых клещами



Pdf көрінісі
бет8/13
Дата12.12.2022
өлшемі497.3 Kb.
#467100
түріИнструкция
1   ...   5   6   7   8   9   10   11   12   13
инструкция диагностика клещевых инфекций

2. Лабораторная диагностика инфекций, передаваемых клещами 
Сбор, хранение и транспортировка образцов для лабораторной 
диагностики 
Все манипуляции по забору, транспортировке, хранению проб для 
проведения исследований смешанных клещевых инфекций выполняют в 
соответствии с Руководством «Порядок учета, хранения, передачи и 
транспортировки микроорганизмов I–IV групп патогенности» № 11-7-13-2002, 
утв. Главным государственным санитарным врачом Республики Беларусь 
30.12.2002.
1. Забор крови для проведения клинических и серологических исследований 
(выявление IgM и IgG) осуществляется в первые дни заболевания и затем в 
динамике в зависимости от особенностей иммунного ответа в отношении 
конкретного возбудителя: для клещевого боррелиоза — 4-я неделя с момента 
заражения, для КЭ, анаплазмоза и эрлихиоза — 2-я неделя от начала заболевания. 
Забор крови проводят натощак из локтевой вены одноразовой иглой 
(диаметр 0,8–1,1 мм) в одноразовый шприц объемом 5 мл или в пробирки типа 
вакутэйнер. При заборе в шприц кровь из него аккуратно переносят в 
одноразовую стерильную пробирку с завинчивающейся крышкой без 
антикоагулянта (получение сыворотки). Для получения сыворотки пробирки с 
кровью отстаивают при комнатной температуре (либо в термостате при 37

С) в 
течение 30 мин до образования сгустка крови, затем центрифугируют при 
3000 об./мин в течение 10 мин при комнатной температуре. После 
центрифугирования сыворотку отбирают стерильными наконечниками с 
фильтром в стерильные пластиковые пробирки объемом 1,5 мл. 


2. Для проведения молекулярно-биологических исследований (ПЦР) 
используется плазма крови. Забор крови производится на ранних сроках 
заболевания (до 14 дней от начала заболевания) в пробирки типа вакутэйнер с 
антикоагулянтом (6% раствор ЭДТА в соотношении 1:20). Пробирку аккуратно 
переворачивают несколько раз (для перемешивания с антикоагулянтом). Плазму 
крови получают центрифугированием пробирок с цельной кровью при 800–1600 g 
(3000 об./мин) в течение 20 мин при комнатной температуре. Затем отбирают 
плазму в объеме не менее 1 мл отдельными наконечниками с аэрозольным 
барьером в стерильные пробирки объемом 1,5 мл. 
В связи с низкой концентрацией возбудителей клещевых инфекций в плазме 
крови и ликворе, рекомендуется проводить концентрирование материала перед 
этапом выделения нуклеиновых кислот. Концентрирование материала проводится 
путем центрифугирования плазмы крови и ликвора при 12000 об./мин в течение 
20 мин, осадок и нижняя фракция (100–200 мкл) используются для выделения 
нуклеиновых кислот на коммерческих наборах для пробоподготовки материала к 
дальнейшему анализу методом ПЦР, разрешенные к применению на территории 
Республики Беларусь.
До начала исследований условия хранения образцов следующие. 
Образцы цельной крови: 
- при температуре 2–25

С в течение 12 ч с момента взятия крови для 
качественного определения нуклеиновых кислот; 
- при температуре 2–8

С в течение 1 сут для качественного определения 
РНК/ДНК инфекционных агентов. 
Недопустимо замораживание образцов цельной крови! 
Образцы плазмы, сыворотки, синовиальной жидкости и ликвора: 
- при температуре 2–8

С — до 5 сут; 
- при температуре -70

С — длительно (не менее года). 
Допускается только однократное замораживание-оттаивание материала
поэтому образцы для длительного хранения необходимо разлить небольшими 
(0,1-0,2 мл) порциями в отдельные стерильные пробирки объемом 1,5 мл. 
3. С целью выявления фагоцитов и гранулоцитов, инфицированных 
анаплазмами или эрлихиями, в первые дни заболевания готовят тонкие мазки 
крови. 
4. При 
наличии неврологической симптоматики, указывающей на 
поражение ЦНС, производится забор спинномозговой жидкости. Материал 
забирается в стерильные пластиковые пробирки. 
5. При наличии объективных признаков артрита (предположительно 
боррелиозной этиологии) производится забор синовиальной жидкости из полости 
пораженных суставов по общепринятой методике. Материал забирается в 
стерильные пластиковые пробирки.


Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   5   6   7   8   9   10   11   12   13




©dereksiz.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет