Исследование на производные 1,4-бензодиазепина методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Для разделения
производных 1,4-бензодиазепина методом ВЭЖХ рекомендуются следующие
условия: обращено-фазные сорбенты С
18
(«Сепарон», «Zorbax»), С
8
; подвижная
фаза – смесь 0,05 М раствора аммония гидрофосфата и ацетонитрила (65:35)
(для разделения нативных 1,4-бензодиазепинов) и система тех же
растворителей в соотношении 45:55 (для разделения аминобензофенонов);
режим элюирования – градиентный. Детектирование нативных 1,4-
бензодиазепинов проводится при длине волны 230 нм, аминобензофенонов и
мезапама – при 220 нм. Данные по чувствительности метода ВЭЖХ к
производным 1,4-бензодиазепина представлены в таблице 19.
Таблица 19. Пределы обнаружения некоторых производных 1,4-бензодиазепина методом ВЭЖХ Вещество Предел обнаружения, нг/мл Оксазепам
3,4
Нитразепам
11,1
Хлордиазепоксид
17,8
Феназепам
13,3
Диазепам
15,0
Медазепам
12,5
Для
количественного
определения
1,4-бензодиазепинов
и
аминобензофенонов в биологических объектах можно использовать различные
методы, в том числе метод добавки, метод внешнего стандарта и метод
внутреннего стандарта. В качестве внутренних стандартов используются как
74
сами производные 1,4-бензодиазепина, заведомо не содержащиеся в
анализируемом объекте, так и другие органические соединения, например, 6-
нитрохинолин.
