4. Выделение суммарной ДНК из растений с повышенным содержанием фенолов
Некоторые вторичные метаболиты, и прежде всего фенольные производные, после лизиса клеток могут связываться с ДНК и способствовать быстрой деградации нуклеиновых кислот. Выделение ДНК из растений, богатых полифенолами, с помощью обычных методик приводит к большим потерям и получению ДНК крайне низкого качества. К растениям с высоким содержанием полифенолов относят: фруктовые косточковые деревья и кустарники (яблоню, грушу, сливу, вишню, персик, абрикос, хурму, айву, виноград и др.), а также голосемянные растения (ель, сосну, пихту, лиственницу, тую, можжевельник и др.). Данный метод основан на использовании поливинилпиралидона (РУР) в качестве агента, ингибирующего действие полифенолов, что приводит к экстракции 5-12 мкг ДНК из -50 мкг растительного материала. При этом чистота полученной ДНК довольно высока, и отношение оптической плотности раствора при 260 и 280 нм составляет 1,6-1,9.
Достарыңызбен бөлісу: |